杜康基因是指乙醇脱氢酶
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乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达
?类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶?类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性
乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA的克隆与表达
周文婷1,崔羽,王晓燕2,张永红,李世荣,李景鹏*
(东北农业大学生命科学与生物技术中心,哈尔滨 1500301;
哈尔滨医科大学附属第四医院检验科,哈尔滨 1500012)
摘 要: 类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为1.8± 0.3U/mg, 0.9±0.2U/mg和1.4±0.2U/mg。
关键词:乙醇脱氢酶(ADH);基因克隆,原核表达;酶活力检测1
酒是重要的
乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达
?类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶?类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性
乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA的克隆与表达
周文婷1,崔羽,王晓燕2,张永红,李世荣,李景鹏*
(东北农业大学生命科学与生物技术中心,哈尔滨 1500301;
哈尔滨医科大学附属第四医院检验科,哈尔滨 1500012)
摘 要: 类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为1.8± 0.3U/mg, 0.9±0.2U/mg和1.4±0.2U/mg。
关键词:乙醇脱氢酶(ADH);基因克隆,原核表达;酶活力检测1
酒是重要的
乳酸脱氢酶酶活力测定
实验六 乳酸脱氢酶酶活力测定 及紫外吸收法测定蛋白质含量
目的要求
(1) 掌握LDH活性测定原理;
(2) 学习用比色法测定酶活性的方法。
实验原理
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase简称LDH,EC.1.1.1.27, L-乳酸:NAD+氧化还原酶)广泛存在于生物细胞内,是糖代谢酵解途径的关键酶之一,可催化下列可逆反应。
LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多,其中紫外分光光度法更为
简单、快速。鉴于NADH, NAD+ 在340nm及260nm 处有各自的最大吸收峰,因此以NAD+为辅酶的各种脱氢酶类都可通过340nm光吸收值得改变,定量测定酶的含量。本实验测定LDH活力,基质液中含丙酮酸及NADH,在一定条件下,加入一定量酶液,观察NADH在反应过程中340 nm 处光吸收减少值,减少越多,则LDH活力越高。其活力单位定义是:在25℃,pH7.5条件下A340nm/min下降为1.0的酶量为1个单位。可定量测定每克湿重组织中LDH单位。定量测定蛋白质含量即可计算比活力(U/mg)。
利用上述原理,改变不同第五则可测定相应脱氢酶反应过程中A340nm的改变,定量测定酶活力,如苹果酸脱氢
花生12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析
花生学报 2006,35(1):1~7
JournalofPeanutScience,Vol.35,No.1,2006
文章编号:100224093(2006)0120001207
花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析3
张洪涛1,2,单 雷2,全先庆1,2,3,毕玉平1,2,杨家森1,2,王秀丽2
(1.山东师范大学生命科学学院,山东济南250014,
山东济南250100;3.临沂师范学院,)
摘要:花生油中亚油酸(LAΔ9,12),脂肪酸脱氢酶(Δ12FAD)的功能,用RT-AhD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转,KFAD2B。气相色谱分析脂肪酸成分,结果表明该基因能在酵母K601中表达,并使菌株产生了两种新的脂肪酸即棕榈二烯酸(C16∶2Δ9,12)和亚油酸(C18∶2Δ9,12),含量分别占总脂肪酸的2.1%和9.2%,棕榈油酸(C16∶1Δ9)和油酸(C18∶1Δ9)含量与对照相比相应地下降,证明该基因编码的Δ12脂肪酸脱氢酶除能作用于C18∶1Δ9,还具有催化16碳的C16∶1Δ9底物在Δ12位脱氢生成C16∶2Δ9,12的功能,但在两种底物之间可能更偏爱C18∶1Δ9。
关键词:花生;亚
花生12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析
花生学报 2006,35(1):1~7
JournalofPeanutScience,Vol.35,No.1,2006
文章编号:100224093(2006)0120001207
花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析3
张洪涛1,2,单 雷2,全先庆1,2,3,毕玉平1,2,杨家森1,2,王秀丽2
(1.山东师范大学生命科学学院,山东济南250014,
山东济南250100;3.临沂师范学院,)
摘要:花生油中亚油酸(LAΔ9,12),脂肪酸脱氢酶(Δ12FAD)的功能,用RT-AhD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转,KFAD2B。气相色谱分析脂肪酸成分,结果表明该基因能在酵母K601中表达,并使菌株产生了两种新的脂肪酸即棕榈二烯酸(C16∶2Δ9,12)和亚油酸(C18∶2Δ9,12),含量分别占总脂肪酸的2.1%和9.2%,棕榈油酸(C16∶1Δ9)和油酸(C18∶1Δ9)含量与对照相比相应地下降,证明该基因编码的Δ12脂肪酸脱氢酶除能作用于C18∶1Δ9,还具有催化16碳的C16∶1Δ9底物在Δ12位脱氢生成C16∶2Δ9,12的功能,但在两种底物之间可能更偏爱C18∶1Δ9。
关键词:花生;亚
测定精浆和全精子中的乳酸脱氢酶同工酶X活性及其比值在评价精液质量中的应用
目的通过比较精浆及全精子中乳酸脱氢酶同工酶X(LDH—X)活性及其比值在生育男性与不育男性中的差异,探讨其在评价精液质量中的应用。方法以长链α-酮酸为底物,用全自动生化分析仪检测各实验组精浆及全精子中的LDH~X活性,并通过精子总数计算出精子LDH—X的活性、精浆/全精子中LDH—X的比值,进行统计学分析。结果不育A、B组精浆LDH—X活性大于生育组男性,精子LDH—X的活性
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现代中西医结合杂志 Mo en o r a o t rt rd i a C i s n s r d i 0 7D c 1 ( 5 d r u nl f ne a dT a io l hn e dWet n Me i n 2 0 e, 6 3 ) J I g e tn e a e ce
测定精浆和全精子中的乳酸脱氢酶同工酶 X活性及其比值在评价精液质量中的应用卢卫国周迎春何静朱辉超 ,,, ( .广州中医药大学第一附属医院,东广州 5 0 0; .广东省佛山市顺德区陈村医院,东佛山 5 8 1 ) 1广 14 5 2广 2 3 3[要]目的通过比较精浆及全精子中乳酸脱氢酶同工酶 x( D摘 L H—x)性及其比值在生育男性与不育男性活中的差
双荧光素酶报告基因分析promega
双荧光素酶报告基因分析
1. 介绍
荧光素酶报告基因表达的转录调控常被用来研究培养细胞的生物学特性。荧光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性荧光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的荧光素酶。
Dual-Luciferase?双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光素酶。通常,报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响,共转染的“对照”报告基因会作为内对照,为试验提供一基准线。实验报告基因经过内参照的处理可以减小细胞活性和转染效率对实验的影响,因此双报告系统减少了外部干扰,使得实验数据更可信。实验中报告基因和对照基因的酶没有种源同源性,萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物,反应中没有任何的交叉干扰。
萤火虫荧光素酶底物和海肾荧光素酶底物分别与检测试剂反应可以使灵敏度最大化。由于超强的光信号和超高的信噪比,本系统被广泛用于制药和生物技术产业中。双荧光素酶报告基因检测系统适配于各种培养哺乳细胞的培养基,如1640,MEM,DMEM,F12等。这些试剂与被动裂解液所附带的试剂盒,可以从Promega试剂盒中分开,单独使用。
具有超高灵敏度和超宽线性范围的Veritas?微孔板发光检测仪特别适合DLR 报告
债务相互抵销是指什么
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债务相互抵销是指什么?
债务相互抵销,指当事人互负到期债务,又互享债权,以自己的债权充抵对方的债权,使自己的债务与对方的债务在等额内消灭。比如,乙在合同约定的还款日期,应支付给甲十万元人民币货款,与此同时甲也欠乙十万元人民币,并已到清偿日期,此时,乙可以向甲表明,自己不偿还甲的十万元债务,甲也不必偿还欠乙的十万元债务。两相抵销,互不相欠。
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知识产权是指公民 - 图文
知识产权:是指公民、法人或者其他组织对其在科学技术和文学艺术等领域内,主要基于脑力劳动创造完成的智力成果所依法享有的专有权利,包括:版权、专利权、商标权。 一、商标
商标火了 农民乐了
给浅水藕贴上商标;铜山县黄集镇的藕农每年增收300多万元;给葡萄贴上商标,睢宁县高作镇的果农一年多赚500万元;把多种蔬菜混合装箱,再贴上商标,铜山县棠张镇的菜农每年创收5000万元。江苏徐州实施的“农副产品商标战略”正在给当地农民带来巨大的经济利益。
睢于县高作镇的现代农业开发中心2001年引进了美国红提和无核葡萄,尽管质量优良,尽管质量优良,但在市场上的默默无闻使得睢宁葡萄“质优价不优”。睢宁工商部门得知情况后立即帮助其申请注册了“利生”商标。去年夏季,睢宁“利生”牌美国红提和无核葡萄不仅畅销,而且每公斤价格上涨2元。两种葡萄的种植面积超过了1000亩,年产250万公斤,如此计算,“利生”品牌让果农一年多赚500万元。 二、专利:是指一项发明创造,即发明、实用新型或外观设计向国务院行政部门提出专利申请,经依法审查合格后,向专利申请人授予的在规定的时间内对该项发明创造享有的专有权。专利的种类包括发明、实用新型和外观设计。
1、专利的发展历程:
所谓计算机病毒是指
篇一:计算机文化基础(专)模拟试卷2答案
北京语言大学网络教育学院
《计算机文化基础》(专)模拟试卷2答案
一.选择题答案
二.填空题答案
1.控制器,输出设备 2.晶体管 3.高级筛选 4.超级链接
5.磁盘碎片整理程序 或 磁盘碎片整理 6.整个文档 7.标记
8.单个,任意个
三.简答题答案 1. (1)字长:指计算机能直接处理的二进制数据的位数,字长直接影响到计算机的性能;(2)速度:①主频:计算机的时钟主频 ②运算速度:计算机第秒钟能执行的指令数 ③存取速度:存储器完成一次读或写操作所需的时间称为存储器的存取时间或访问时间 (3)容量:主要是指内存容量,即内存储器能够存储信息的总字节数
2.所谓计算机病毒就是一种人为特制的具有特殊破坏性的计算机程序。这种程序通过非授权侵入他人计算机而隐藏在可执行程序或数据文件中,具有自我复制能力 ,极易传播,可造成计算机系统运行失常或整个计算机系统瘫痪的灾难性的后果。一般来说具有以下特点: 可执行性:计算机病毒是一段可执行的指令代码。
寄生性:大多数病毒将自身附着在已存在的程序上,并将其代码插入该程序,当该程序执行时,该病毒也被执行。
传染性: 所有计算机病毒都能传染给其他未感染该类计算机病毒的计算机。 破坏性:计算机