细菌内毒素凝胶法操作规程

细菌内毒素检查标准操作规程

1 简述

1.1 本规范适用于中国药典2005年版附录中细菌内毒素检查法一凝胶法和光度测定法。后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行实验。当

测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。 1.2 供试品细菌毒素限值的确定。

（一）药典中有规定的，按供试品各论中规定限值； （二）尚无标准规定的，按以下公式确定供试品内毒素限值： L=K/M 式中

L为供试品的细菌内毒素限值，以EU/ml、EU/mg、EU/U表示。

K为按规定的给药途径，人用每公斤体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/kg/h表示。其中注射剂，K=5EU/kg/h；放射性药品注射剂，K=2.5EU/kg/h；鞘内用注射剂，

K=0.2EU/kg/h。

M为人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量，以ml/kg/h、ml/kg/h、U/kg/h表示。药品人用最大剂量可参阅国家批准的药品说明书和《临床用药须知》等权威著作，中国人

均体重按60kg计算，注射时间小于1小时的按1小时计。按人用剂量计算限值时，如遇特殊情况，可根据生产和临床用实际情况做必要调整，但需说明理由。 1.3 供试品最大有效稀释倍数的确定

供试品的最大

记录编码：LZ-B00-TJL-2011-010-A 序号：

北京灵泽医药技术开发有限公司

编制：李树权审核：批准：

一次性肠外营养输液袋

内细菌毒素检查法验证方案

日期：2012.11.7 日期：

日期：

1. 验证目的

为公司产品细菌内毒素检测方法提供依据。 2. 验证依据

3. 《中华人民共和国药典》 2010年版 第二部 附录Ⅺ E 细菌内毒素检查法 4. 验证条件

无菌操作间（万级） 5. 验证准备 4.1 试验设备

设备名称 内毒素检测仪 鼓风式干燥箱 5.2 试剂

设备编号 A10-2012-A-004-0 A10-2010-A-007-1 设备状态 完好 完好 试剂名称 内毒素工作品（10EU/ml） 鲎试剂(0.25EU/ml) 内毒素检查用水 5.3 样品：

来源 湛江博康海洋生物 湛江博康海洋生物 湛江博康海洋生物 批号 1107010 1206110 120406 样品名称 一次性肠外营养输液袋 4.4 实验前准备：

规格型号 PN-E-W 3500ml 批号 数量 2 1) 实验用具移液管（或刻度吸管、微量加样器及无热原吸头）、凝集管（10mm×75mm）、三角瓶、试

中国药典2010年版《细菌内毒素检查法》

——凝胶法

凝胶法

凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素的方法。

鲎试剂灵敏度复核试验 在本检查法规定的条件下，使鲎试剂产生凝集的内毒素的最低浓度即为鲎试剂的标示灵敏度，用EU/ml表示。当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。

根据鲎试剂灵敏度的标示值（λ），将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟。取分装有0.1ml鲎试剂溶液的10mm×75mm试管或复溶后的0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿18支，其中16管分别加入0.1ml不同浓度的内毒素标准溶液，每一个内毒素浓度平行做4管；另外2管加入0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃±1℃恒温器中，保温60分钟±2分钟。

将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱者为

医院检验科 微生物sop 文件编号 生效日期 页 码 版本/修订号 编写： 审核： 细菌动力试验试验操作规程 1. 目的

规范细菌动力试验操作规程，保证试验质量。 2. 原理

培养基为胰蛋白胨的半固体培养基，有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。 3培养基

3.1氯化钠 6.0g/l 胰蛋白胨20.0g/l 琼脂4.0g/l 3.2 制备：

3.2.1称取氯化钠 5.0g/l胰蛋白胨10.0g/l琼脂4.0g/l 溶解于1000ml蒸馏水中。 3.2.2校正PH至7.4±0.2。

3.2.3置高压灭菌器内，经121℃灭菌15分钟。 3.2.4分装于无菌玻璃试管，每管约3 ml左右。 3.2.5存于2-8℃冰箱中备用，有效期：7天。 4.质控

4.1大肠埃希菌ATCC25922为穿刺线清晰，未扩散生长。 4.2奇异变形杆菌ATCC49005为穿刺线周围有扩散生长。 5.操作步骤

5.1用接种针挑取待测细菌，然后垂直从半固体琼脂表面插下去，插到离小试管底部只有5mm左右时再垂直抽回来，即做一条穿刺线。

6.结果判断

6.1穿刺线清晰，未扩散，则表明动力阴性。

医院检验科 微生物sop 文件编号 生效日期 页 码

微柱凝胶交叉配血卡标

准操作规程

公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]

微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程

一．准备工作

1.微柱凝胶试剂卡的准备

观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。

2.检测标本的准备

3.红细胞悬液的制备

取被检者压积红细胞50微升，加入1毫升红细胞稀释液（盐水），外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。

二．操作步骤

1．将准备好的抗人球蛋白交叉配血卡做好标记。

2．将受血者血清1滴（或50μl）与献血者红细胞悬液10μl先后加入主侧管中。

3．将献血者血清1滴（或50μl）与受血者红细胞悬液10μl先后加入次侧管中。

4．加样后的试剂卡，置37℃孵育器中孵育15分钟。

5．使用专用离心机离心5分钟，取出肉眼观察结果。

三．结果判定

1．阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与献血者血型相合。

2．阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者血型不相合。

四．注意事项

1.红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可

能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本

毫针刺法操作规程

毫针刺法是指应用不同型号的金属针，采用一定手法，刺激人体腧穴，调整脏腑功能，以调和阴阳，疏通经络，行气活血，扶正驱邪，从而达到防病治病的目的。

一、 评估

1.核对患者，自我介绍，解释操作目的，与患者沟通时语言要适当 2.患者年龄、体质、病情、精神状态，当前主要症状，发病部位及相关因素，心理状况及配合程度 3.局部皮肤情况，有无出血倾向 二、准备

1. 护士：仪表端庄，衣帽整洁，戴好口罩，洗手

2. 用物： 治疗盘、消毒液、棉签、无菌毫针盒（内备各种毫针）、干棉球、纱

布、镊子及清洁弯盘、必要时备屏风

3. 环境：整洁安静、光线明亮，调节适宜的温度，关闭门窗，防止对流风，必

要时屏风遮挡

三、操作方法

1. 备齐用物，再次核对，解释操作的方法，请患者配合

2.取适当体位，协助患者松开衣着，暴露针刺部位，注意保暖，必要时用屏风遮挡

3. 定位：拇指循经按压腧穴，询问患者感觉，以确定穴位 4.消毒：局部皮肤消毒，术者消毒手指

5.进针：选用型号适当的毫针，检查针柄、针体是否有质量问题。根据部位选择正确的进针方法

6.行针：运用提插或捻转等手法使用者产生酸、麻、重、胀感并向远端扩散，即为“得气”，并根据病情运用补泻手法，达最佳针感后

毫针刺法操作规程

毫针刺法是指应用不同型号的金属针，采用一定手法，刺激人体腧穴，调整脏腑功能，以调和阴阳，疏通经络，行气活血，扶正驱邪，从而达到防病治病的目的。

一、 评估

1.核对患者，自我介绍，解释操作目的，与患者沟通时语言要适当 2.患者年龄、体质、病情、精神状态，当前主要症状，发病部位及相关因素，心理状况及配合程度 3.局部皮肤情况，有无出血倾向 二、准备

1. 护士：仪表端庄，衣帽整洁，戴好口罩，洗手

2. 用物： 治疗盘、消毒液、棉签、无菌毫针盒（内备各种毫针）、干棉球、纱

布、镊子及清洁弯盘、必要时备屏风

3. 环境：整洁安静、光线明亮，调节适宜的温度，关闭门窗，防止对流风，必

要时屏风遮挡

三、操作方法

1. 备齐用物，再次核对，解释操作的方法，请患者配合

2.取适当体位，协助患者松开衣着，暴露针刺部位，注意保暖，必要时用屏风遮挡

3. 定位：拇指循经按压腧穴，询问患者感觉，以确定穴位 4.消毒：局部皮肤消毒，术者消毒手指

5.进针：选用型号适当的毫针，检查针柄、针体是否有质量问题。根据部位选择正确的进针方法

6.行针：运用提插或捻转等手法使用者产生酸、麻、重、胀感并向远端扩散，即为“得气”，并根据病情运用补泻手法，达最佳针感后

GPC

凝胶渗透色谱仪操作规程

（1）仪器与电脑开机顺序并无先后，但是只有等仪器初始化好后，才能启动装在电脑上的CLASS-VP软件。

（2

）双击图标，进入操作界面。此时会出现一个Shimadzu CLASS-VP 窗口，双击

Instrument1图标，仪器会发出蜂鸣声，以表示建立了与计算机的连接。

随即出现如下主操作界面：

GPC

（3

）点击图标工具栏：

、和，打开instrument、pump和oven 。

②RID R. Flow

On/Off ④Zero RID

⑥Rinse ⑧Turn pumpsAutosample On/off ⑩LC Setup

Assistant

①Oven ③Balance RID⑤Purge ⑦Instrument ⑨LCD

On/Off Autosample On/off

按下①⑦⑧⑨按钮，完成仪器初始化，此时这些按钮呈高亮状态，如上图所示。

②③④为走基线时调整基线所用，②为冲洗参比池，③平衡参比池与样品池，④基线归零。 ⑥为排赶进样针气泡，⑤为清洗进样针外壁 ⑩为返回主操作界面 (4)点击图标

，冲洗进样针25

分钟。点击图标

，冲洗autosampler 3次。

（5）按主界面中的任何实物图标（溶剂瓶、进样架、泵、检测器）进入Inst

标 准 操 作 规 程

STANDARD OPERATION PROCEDURE

编号 版本号 编制部门 审核部门 审核部门 批准 颁发部门 SOP-02-QC-014 0.0 QC QC经理 QA经理 质量副总经理 质量保证部 题目 生效日期 签名/日期 签名/日期 签名/日期 签名/日期 分发部门 薄层色谱法标准操作规程 2015年12月1日 QC 1目的：规范薄层色谱法的标准操作程序，使其操作过程规范化，避免人为错误。 2适用范围：适用于薄层色谱法的标准操作。 3责任：QC人员对本SOP实施负责。 4内容

薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检查或含量测定。 4.1.仪器与材料

4.1.1.薄层板 按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板；按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。固定相中可加入黏合剂、荧光剂。硅胶薄层板常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254、G、H表示含或不含石膏黏合剂。F254为在紫

原油含水蒸馏法化验操作规程

一、准备工作

1、穿戴好劳保用品。

2、化验用电炉若干，托盘天平一台，水浴锅一台，玻璃仪器及支架一套，玻璃棒、鸭毛刷、脱脂棉、循环水及水桶、乳胶管、凡士林油、120号无水化验汽油、棉纱等。

二、操作步骤

1、检查电源、加热器、器皿是否正常。通风是否良好。

2、预先加热，使试样温度在45-50℃，充分搅抖均匀。

3、油样含有游离水时，将试样连同桶一起称重，游离水倒入计量筒，量其游离水体积，做好记录。

4、在托盘天平上直接用预先洗净并烘干的烧瓶称取搅拌过的试样，精度为0.1g，最终蒸出的水不得超过10m1。含水不同称取试样量也不同：

（1）试样含水小于5%，称取100g ；

（2）试样含水5-10%，称取50g；

（3）试样含水10-30%；称取20g；

（4）试样含水大于30%；称取10g；

5、用量筒量取80-100m1溶剂油倒入烧瓶中，稀释并摇匀试样。

6、用接收器的支管紧密安装在烧瓶上，使支管的斜口进入烧瓶口15-20mm ，然后在接收器上连接直形冷凝管，冷凝管末端的斜口切面与接收器的支管口相对。

7、不得使蒸汽逸出，应在塞子缝隙上涂抹火棉胶，进入冷凝管的水温与室温温差较大时，应在冷凝管的上端用棉花轻轻塞住，以免空气中的水蒸汽进入冷凝管。