反射弧分析属于什么实验方法

反射弧分析

【实验目的】 分析反射弧的组成部分，探讨反射弧的完整性与反射活动的关系。

【实验原理】 在中枢神经系统参与下，机体对内外环境的刺激所产生的具有适应意义的规律性反应称为反射。反射活动的结构基础是反射弧。它由感受器、传入神经、反射中枢、传出神经和效应器五部分组成，其中任何一个环节受到破坏，反射活动均不能实现。

【实验动物】 牛蛙

【实验用品】 蛙类解剖器材一套、铁支架和双凹夹、肌夹、小烧杯、玻璃皿、滤纸片、药用棉球、1%H2SO4溶液、1%普鲁卡因等。

【实验步骤及观察项目】

1．制备脊蛙 自上颌处剪去蛙头部，保留脊髓和下颌。将脊蛙腹位固定于蛙板上，在右后腿背面作一纵形皮肤切口。用玻璃针在肌间沟内分离、钩出坐骨神经，在其下穿线备用。用肌夹将脊蛙下颌夹住，挂在铁支架上。

2．观察双侧后肢屈曲反射 用玻璃皿盛1% H2SO4溶液，将后肢足趾浸入硫酸溶液，观察有无屈腿反应？然后用小烧杯盛清水洗去足趾上的硫酸溶液。

3.反射弧完功能整性受影响后观察后肢屈曲反射

用线将坐骨神经轻轻提起，在神经下面放置浸有1%普鲁卡因的棉球，稍后将该后肢趾尖浸入硫酸溶液中，观察其屈曲反射是否消

失？麻醉坐骨神经出现屈曲反射消失后，迅即用任氏液反复冲洗坐骨

反射弧分析

【实验目的】 分析反射弧的组成部分，探讨反射弧的完整性与反射活动的关系。

【实验原理】 在中枢神经系统参与下，机体对内外环境的刺激所产生的具有适应意义的规律性反应称为反射。反射活动的结构基础是反射弧。它由感受器、传入神经、反射中枢、传出神经和效应器五部分组成，其中任何一个环节受到破坏，反射活动均不能实现。

【实验动物】 牛蛙

【实验用品】 蛙类解剖器材一套、铁支架和双凹夹、肌夹、小烧杯、玻璃皿、滤纸片、药用棉球、1%H2SO4溶液、1%普鲁卡因等。

【实验步骤及观察项目】

1．制备脊蛙 自上颌处剪去蛙头部，保留脊髓和下颌。将脊蛙腹位固定于蛙板上，在右后腿背面作一纵形皮肤切口。用玻璃针在肌间沟内分离、钩出坐骨神经，在其下穿线备用。用肌夹将脊蛙下颌夹住，挂在铁支架上。

2．观察双侧后肢屈曲反射 用玻璃皿盛1% H2SO4溶液，将后肢足趾浸入硫酸溶液，观察有无屈腿反应？然后用小烧杯盛清水洗去足趾上的硫酸溶液。

3.反射弧完功能整性受影响后观察后肢屈曲反射

用线将坐骨神经轻轻提起，在神经下面放置浸有1%普鲁卡因的棉球，稍后将该后肢趾尖浸入硫酸溶液中，观察其屈曲反射是否消

失？麻醉坐骨神经出现屈曲反射消失后，迅即用任氏液反复冲洗坐骨

反射时的测定及反射弧的分析实验报告

一、实验目的

1、学习测定反射时的方法。 2、了解反射弧的组成。

二、实验原理

从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射时。反射时是反射通过反射弧所用的时间，完整的反射弧则是反射的结构基础。反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不再出现。由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物（如脊蛙或脊蟾蜍）为实验材料，以利于观察和分析。

三、实验结果

1、屈反射的反射时结果（H2SO4浓度为0.5%）

刺激部位 右后肢最长趾 左后肢最长趾 反射时（s） 第1次 8.12 2.17 第2次 20.25 3.89 第3次 18.67 4.01 平均 15.68 3.36

分析：

在中枢神经系统的参与下，机体对刺激所产生的具有适应意义的反应过程称为反射。反射活动的结构基础是反射弧。典型的反射弧由感受器、传人神经、神经中枢、传出神经和效应器5个部分组成。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏，反射活动就无法实现。在反射活动中，由于神经元特别是中间神经元联系方式的不同，使反射活动表现出种种特征。

该阶段实验中使用的H2SO4浓度均为0.5% ，将蛙的后肢浸入H2SO4中的深度尽量保持在3mm，单一变量为右后

Western blot 实验

1、试剂配制： （一）母液

1.0mol/L Tris·HCl

Tris (MW121.14) 12.12g 蒸馏水 50ml

溶解后，用浓盐酸调pH至6.8（见下所示），最后用蒸馏水定容至100ml，室温下保存。 注：PH ： 6.8 约需22ml浓盐酸

10％ SDS

SDS 10g

蒸馏水定容至 100ml

50℃水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。

10％过硫酸胺（AP） 过硫酸胺 0.1g 超纯水 1.0ml

溶解后，4℃保存，保存时间为1周，最好现配先用。

1.5mol/L Tris·HCl（pH8.8） Tris 18.2g

蒸馏水 50ml

溶解后，用浓盐酸调pH至8.8，最后用蒸馏水定容至100ml，室温下保存。

30％Acr/Bic（29：1

★脾细胞保存方法

（一）短期保存技术

适用范围：术后1周PRT反应。

保存方法：将分离到的细胞用适量含10％～20％灭活小牛血清的RPMI1640培养液稀释重悬。置4℃保存较好，可减低细胞代谢活动。要注意不要迅速改变细胞所处的温度，以免造成细胞“温度”休克。保存1管即可。 （二）长期冷冻保存技术

适用范围：术后2周以后的PRT反应。 保存方法：利用液氮深低温（－196℃）环境保存细胞，冷冻时的降温速度和细胞解冻时的升温速度对细胞活力的保存有很大影响。低速离心后，取沉积细胞用含10％二甲亚砜的小牛血清配制成适当浓度的细胞悬液，分装于冻存管内（保存3管），速即放入降温过渡站中，避免二甲亚砜对细胞的损伤。用两步降温法，即迅速降温至－80℃低温冰箱过夜，或在液氮罐液面以上的一层空间放置片刻，然后再放入液氮中。如需复苏细胞，则需迅速解冻以恢复细胞的活力，要求在20s以内完全融化。将冻存管自液氮中取出，立即放入40℃温水中，融化后即从水中取出，吸出细胞悬液，加入10倍的培养液中混匀，继而低速离心，尽快洗去保护剂，再悬于新培养液中，计数并检查细胞活力，然后置37℃培养箱内培养。

★相关试剂的配制

（一）PBS：800ml蒸馏水中，溶解8克N

实验一 准备实验（一）

分光光度计的使用

一. 目的

通过电化教学方式学习分光光度计的工作原理 掌握比色测定的基本操作方法

二. 原理

光线的本质是电磁波的一种，有不同的波长。肉眼可见的彩色光称为可见光，波长范围在400～750nm：小于400nm的光线称为紫外光；大于750nm的光线称为红外光。

当光线通过透明溶液介质时，其辐射的波长有一部分被吸收，一部分透过、因此光线射出溶液之后，部分光波减少，这种光波的吸收和透过可用于某些物质的定性定量分析。

LI0CI分光光度法依据Lambert-Beer定律：lg令A = lgI0II0I = KCL

，T =

II0，则A = KCL，A = -lgT

A：吸光度（有时用光密度OD表示） I0：入射光强度 L：溶液的光径长度

其中：T：透光率 I： 透射光强度 K：吸收系数 C：溶液的浓度

从上式可以看出，一束单色光通过溶液后，光波被吸收一部分，其吸收多少与溶液中溶质的浓度和溶液厚度成正比，当入射光、吸收系数K和溶液的光径长度L不变时，吸光度A与溶液的浓度C成正比。

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三. 实验材料及设备

1. 仪器

分光光度计 放相

一、土壤有机碳测定

实验方法：重铬酸钾容量法——外加热法

仪器：油浴消化装置、矿物油或植物油、可调温电炉、分析天平（感应量0.0001g）、硬质试管、温度计（0~300℃）、酸式滴定管、三角瓶（250ml）、小漏斗 试剂：0.8mol·L-1（1/6K2Cr2O7）标准溶液、浓硫酸（分析纯）、0.2mol·L-1FeSO4溶液、0.1mol·L-1（1/6K2Cr2O7）标准溶液、邻菲罗啉指示剂

二、土壤全氮量测定

实验方法：凯氏定氮法

仪器：消化炉、消化管、分析天平（感量0.0001g）、凯氏定氮仪 试剂：浓硫酸、混合催化剂、40%NaOH溶液、硼酸指示剂

三、土壤有效性氮测定

实验方法：扩散吸收法

仪器：半微量滴定管（5ml）、扩散皿

试剂：1.8mol·L-1氢氧化钠溶液（适用于旱地土壤）、1.2mol·L-1氢氧化钠溶液（适用于水稻土）、2%硼酸溶液、0.01mol·L-1盐酸溶液、特制胶水（阿拉伯胶）、硫酸亚铁（粉状）

四、土壤全磷量测定

实验方法：HClO4—H2SO4消煮法

仪器：分析天平、开氏瓶或消化管、小漏斗、电炉、三角瓶、移液管、比色杯、容量瓶、分光光度计

试剂：浓硫酸、70%~72%高氯酸、2,6-二硝基酚或2,4

转染实验方案

1. LB培养基的配制：500ml（5皿+2锥形瓶）

准备：500ml玻璃瓶1个，250ml玻璃瓶2个，500ml容量瓶一个，平皿5个 称取：酵母浸提液 5.0g 蛋白胨 10.0g 氯化钠 10.0g 实验操作：

混合后加去离子水（或注射用水）水400ml，待充分溶解后加水定容至500ml，取100ml做固体培养基用装入A瓶，余下装入500ml B瓶中（400ml/瓶） 称取1.5g琼脂粉加入A瓶中

另取一瓶（C瓶）接100ml水（稀释氨苄西林用） 将以上3瓶高压灭菌：121°C , 30min 取氨苄西林一支：规格：1g/支

加水于安瓶中溶解后，移入C瓶中，浓度：10mg/ml 按照50μg/ml氨苄西林的浓度加到A B C三瓶中

A瓶：0.5ml（即为LB固体培养基）——松弛型100μg/ml,严紧型50μg/ml B瓶：2ml（即为LB液体培养基）

将A瓶按20ml/平皿，分别移到5个平皿中，待冷却后即为固体培养基。 用膜封口放入4℃保存。

2. 感受态转化与培养（TOP10）

准备：37℃摇床，37℃烘箱，10cm培养皿（LB琼脂凝胶+氨苄=50 ml LB+0.75 g琼脂+50μl氨苄），冰盒，

注意 : 氯化納溶於水, 酚酞只溶於酒精

鹽水濃度為0.2% ( 請用 分析純-氯化納)

並滴入適量的3%酚酞酒精溶液指示劑

酚酞酒精溶液 適量滴入 鹽水 的比例 GB國標沒說明清楚

漆包线针孔测试方法

1.取6米不弯曲未拉长试料,将其浸入3%酚酞酒精+0.2%食盐溶液中,以溶液为正极,以试料为负极施加DC 12V直流电一分钟,然后数针孔即可(有针孔的地方会有红色气泡冒出),针孔数在8PCS以下即为合格.

2.一般方法如下:

把0.06mm的铜线取出1.5m,0.07mm以上的铜线取出6m,然后在规定的温度下(没有规定温度的话,按122~128度)恒温里放入加热10分钟,加热时不得弯曲,不得拉伸.

再把0.06mm,以下的铜线取出1m,0.07mm以上的铜线取出5m,放入有0.2%的食盐水里倒有3%的Phenol pathalein的酒精,在加12V的直流电压加1分钟后确认其是否有针孔;

溶液的配比方法:

0.2%食盐水(例如:99.8g的水,2g盐)

3%酚酞溶液(例如:20g的纯酒精,6g酚酞)

浴液使用硫酸钠溶液，酚酞作为指示剂

如果漆包线上有针孔，那么针孔处就会发生电解反应，生成H2和OH-

酚酞遇OH-变红，就可以指示一个针孔了。

盐水针孔试验法作用探讨----

农业非点源污染

农业非点源污染数据采集方法一： 采样准备 1、 采样安排

a) 水样的采集与监测项目的确定。

确定采集水样的位置，能够反映非点源污染的特征。同时，人力能够到的地方，而且监测指标能够反映非点源污染的特点。 b) 采样时间、采样频率的安排

为了更好的了解污染物的年间变化，在11年和12年，原则上应以月单位进行水样采集，一旦出现天气突变情况，随时根据情况调整时间。

c) 除了特殊实验目的外（如研究雨季连续降雨），应当尽量排除前一场降雨对实验的影响，以免造成实验数据分析的困难。 由于目前还无法实现自动采样，所有水样都依靠人工进行采集。在实验过程中，根据实验情况调整采样时间，采样频率。 2、 采样点的空间设置

为了研究污染物的空间变化，本次研究选择的土地类型包括：水田，旱田，居民点，草地等。实验的水质采样点根据小流域的出口入口及土地利用类型等水污染影响因素确定。利用GPS定点采集水样。 3、 实验方法

由于氮、磷是农业面源污染的重要原因，所以应利用GPS定点

采样，N、P、COD、BOD等。每项测定方法： a) 总氮： b) 总磷： c) COD： d) BOD： e) ……

农业非点源污染数据采集方法二：

SWAT模型需要输入主要农作物