基因工程领域的生物技术企业

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分子与基因工程-生物技术-复习题讲义

标签:文库时间:2025-02-15
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1、简述rRNA在肽链合成中的作用?

功能是作为mRNA的支架,使mRNA分子在其上展开,形成肽链 2、分别说出5种以上RNA的功能?

mRNA:信使RNA是转录产物,可翻译成多肽链。 tRNA:转运RNA,是用来翻译过程中运输氨基酸。 rRNA:核糖体RNA,构建核糖体的成分。

hRNA:小发卡结构RNA,是生成mRNA的前体RNA,也是在DNA干扰中起作用。 micRNA:反义RNA,对基因的表达起调节作用。

3、基因工程载体的必备条件是什么,列举三种以上的常用载体。

必备条件:a具有对受体细胞的可转移性b具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点c具有较高的外源DNA的装载能力d具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点e具有合适的筛选标记 常用载体:噬菌体,质粒,病毒DNA,噬菌粒

4、什么是报告基因,举例说明报告基因在分子生物学研究中的二种以上的用途?

报告基因: 是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。

应用:① β-D-葡萄

海洋生物技术第六章 海产蓝藻基因工程

标签:文库时间:2025-02-15
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第六章 海产蓝藻基因工程

一、蓝藻简介与分类

蓝藻是原核生物,又叫蓝绿藻 蓝细菌;大多数蓝 藻的细胞壁外面有胶质衣,因此又叫粘藻。在所有藻类生物中,蓝藻是最简单、最原始的一种。 蓝藻是单细胞生物,没有细胞核,但细胞中央含有 核物质,通常呈颗粒状或网状,染色质和色素均匀 的分布在细胞质中。 该核物质没有核膜和核仁,但具有核的功能,故称 其为原核(或拟核)。

在蓝藻中还有一种环状DNA——质粒,在基因工程 中担当了运载体的作用。和细菌一样,蓝藻属于 “原核生物”。

蓝藻属蓝藻门分为两纲:色球藻纲和藻殖段纲。

色球藻纲藻体为单细胞体或群体;藻殖段纲藻体为丝状体,有藻殖段。

蓝藻在地球上大约出现在距今35~33亿年前,已知蓝藻约2000种,中国已有记录的约900种。

分布十分广泛,遍及世界各地,但大多数(约75%)淡水产,少数海产。

在我国三亚湾海域,主要以来自外海的外源性 海洋蓝藻束毛藻为主要优势群落, 其次有共生 蓝藻胞内植生藻Richeliaintracel luularis 和单细胞蓝藻集胞藻属Synechocystis。 在珊瑚礁生态系统中, 蓝藻呈多样性分布, 有 集胞藻属、鱼腥藻属Anabaena、念珠藻属 Nostoc、眉藻属Catothrix 、

基因工程涉及的主要技术

标签:文库时间:2025-02-15
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基因工程涉及的主要技术

遗传专业 姓名:张红 学号1310170039 导师:张斌

基因工程基因工程(Genetic engineering)原称遗 传工程。从狭义上讲,基因工程是指将一种或多 种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接 重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之 按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。

基因工程的操作流程

限制酶的切割与连接

分子杂交及DNA测序

1、目的 基因的 获取

2、基 因表达 载体的 构建

3、将目 的基因 导入受 体细胞

4、目的 基因的 检测与 鉴定

①DNA和RNA的提取和纯化 ②PCR扩增 ③构建基因文库,从基因文 库中“钓”取

农杆菌转化法等

基因工程主要技术1 2DNA和RNA的提取和纯化

凝胶电泳

34 5

基因扩增技术-PCR反应

分子杂交

DNA序列测序

一、DNA和RNA的提取和纯化 核酸是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作 。 一般程序 1、供体的核酸分离 供体细胞培养 收集(菌体)细胞 细胞破碎 分离总DNA 分离细胞器 分离总RNA

分离细胞器DNA

RNA poly(A)RNA 特异性RNAcDNA(组建cDNA文库)

基因工程作业之基因工程载体

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基因工程载体

---乳酸菌表达载体pMG36e及其应用现状

目前,多数外源基因的克隆与表达,主要采用大肠杆菌。然而,由于大肠杆

菌能够引起人类和动物发生不同程度的腹泻,导致机体损伤,所以其表达产物需要经过复杂的分离纯化才能达到食品医药标准。与之相比,乳酸菌作为人和动物肠道内正常菌群之一,已被证明具有诸多益生功能,而且被公认为安全无毒的 (Generally regarded as safe,GRAS)。因此,采用乳酸菌表达的外源蛋白质可免去上述复杂、繁琐的后提纯工艺;同时,乳酸菌可以在肠道中存活定植,其外源基因表达用于治疗或免疫作用的活性物质可以持续地在肠道中产生,成为人和动物体内功能性生物制剂的“加工车间”,从而起到相应的保护和治疗性作用。

乳酸菌(Lacticacidbacteria,LAB)是一类能够发酵糖类产生乳酸的革兰氏阳性细菌[1],具有诸如缓解乳糖不耐症、调节消化道微生态平衡等益生作用,应用领域十分广泛。随着近二十几年来分子生物学的发展,以乳酸菌作为宿主,利用质粒表达外源基因,对乳酸菌进行改造以进一步提高其功能已成为目前的研究热点之一。乳酸菌常用质粒载体主要有pWV01衍生载体,pNZ系列载体[2]等。质粒pMG36e来源

基因工程原理_王莹_基因工程题库

标签:文库时间:2025-02-15
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基因工程试题库

001 基因工程操作的三大基本元件是【 】 I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体 A I + II + III B I + III + IV C II + III + IV D II + IV + V E III + IV + V

002 根据当今生命科学理论,基因工程的用途是【 】

I 分离纯化基因 II 大量生产生物分子 III 构建新型物种 IV 提高基因重组效率 A I + II + III B I + II + IV C I + III + IV D II + III + IV

E I + II + III + IV

003 基因工程的三大理论基石是【 】 A 经典遗传学、细胞生物学、微生物学 B 分子遗传学、分子生物学、生化工程学 C 动物学、植物学、微生物学

D 生物化学、生化工程学、化学工程学 E 生理学、仿生学、免疫学

004 根据基因工程的定义,下列各名词中不能替代基因工程的是【 】 A 基因诱变 B 分子克隆 C DNA重组 D 遗传工程

E 基因无性繁殖

005 基因工程的单元操作顺序是【 】 A 增,转,检,切,接 B 切,接,转,增,检 C 接,转,增,检,切 D 检,

基因工程的应用

标签:文库时间:2025-02-15
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篇一:基因工程的应用(有解析)

第一章基因工程

篇二:基因工程的应用教学设计

1.3《基因工程的应用》教学设计

篇三:基因工程成果应用与发展前景

基因工程在现代社会中的应用与前景

基因工程是新世纪的最具发展前景的工程,随着生物科学技术的发展,基因工程的某些

成果已经成功应用于我们的生活中,然而我们对基因的了解并没有想象中的那么彻底,基因

工程的发展仍需要几代人的探索。

基因工程的概念是,在基因水平上,采用与工程设计十分类似的方法,按照人类的需要

进行设计,然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系,并能使之稳定地遗传给

后代。

基因工程一般包括四个步骤:一是取得符合人们要求的DNA片段,即“目的基因”。被

称为“分子剪刀”的“限制性转切酶”可以在DNA分子上找到特定的“切点”,然后将认准的双

链交错切断。自70年代以来,人们已找到400多种形形色色的“分子剪刀”。二是将目的基

因与质粒或病毒DNA连接成重组 DNA。在用同一种“分子剪刀”剪切的两种DNA碎片中加

上“分子针线”——“DNA连接酶”,就可以把两种DNA片段重新连接起来。三是把重组DNA

引入某种细胞。把“拼接”好的DNA分子运送到受体细胞中去,必须寻找一种分子小、能自

由进出细胞,而且在装载了外来的DNA片

基因工程的利与弊

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基因工程的利与弊 基因工程的原理: 基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。

操作方法是:将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。

例如:将大鼠的生长激素基因导入小鼠受精卵.首先在大鼠的体细胞中提取染色体,分离目标基因.用限制性核酸内切酶处理载体,再将载体与基因片段连接(这里用到DNA连接酶)。 通过显微注射的方法将这些重组基因注入小鼠的受精卵内,最后让这些受精卵生长发育。结果小鼠生出几只带有大鼠生长激素基因的小鼠,这些小鼠的生长速度非常快,其个体是同窝其他小鼠的1.8倍,成为“巨型小鼠”。

基因工程

基因工程 - 图文

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幻灯片1

基因工程

(GENETIC ENGINEERING)

幻灯片2

第一节 概 述

幻灯片3

基因工程技术的定义

用人工方法,提取或制备某种细胞的某种基因,在体外把它和一种载体连接构造杂种DNA分子,然后导入受体细胞,让其复制与表达,以改变受体细胞的某些性状或产生人们所需的产物的实验工程技术。

幻灯片4

DNA重组(DNA recombination)

DNA重组(DNA recombination):不同来源的DNA分子末端通过磷酸二酯键共价连接,形成重新组合的DNA分子。 幻灯片5

克隆(clone)

克隆(clone):由一个细胞经无性繁殖而形成的细胞群体。 幻灯片6

分子克隆(molecular cloning)

分子克隆(molecular cloning):指建立单一的重组DNA的无性系的过程。即指在体外制备DNA,切割拼接成重组D

基因工程实验

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1.动物细胞DNA提取原理是什么?

答:先用SDS裂解细胞,使染色体离析,蛋白质变性,释放出核酸。然后用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提,使蛋白质变性沉降到酚与水相的界面,DNA则留在水相中,离心后在上清液中加入醋酸钠和两倍体积无水乙醇,除去多糖物质和沉淀DNA,然后离心后沉淀用70%乙醇洗涤,最后用ddH2O溶解沉淀DNA,-20℃保存。 2.DNA提取中用到了哪些试剂?有什么作用?

EDTA:二价金属离子螯合剂,螯合Mg2+,抑制DNA酶活性。因为Mg离子是DNA酶的辅因子。

SDS:一种阴离子去污剂,在高温(55℃—65℃)条件下能裂解细胞,使染色体离析,蛋白质变性,释放出核酸。 酚:使蛋白质变性。

氯仿:作为除杂剂,除去糖、脂等杂质;加速有机相与液相分离;抽提核酸溶液中残留的酚。 乙丙醇:作为消泡剂;降低DNA的水溶性,让DNA从溶液中析出;有利于分层,使离心后的上层含DNA水相,中间的蛋白质相及下层有机溶液相维持稳定。 无水乙醇:降低DNA的水溶性,沉淀DNA。

醋酸纳:调PH,中和Tris-Buffer,形成中性环境,利于DNA沉淀。 Tris-Buffer(PH8.0):提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏。 70%乙醇:清洗溶液中离子及

基因工程讲义

标签:文库时间:2025-02-15
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基 因 工 程 讲 义

主讲教师──陈永胜

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目 录

第一章 绪 论???????????????????3

一、基因工程的诞生???????????????????3 二、基因工程的成就???????????????????5 三、基因工程安全性的问题???????????????? 6 四、基因工程研究的内容????????????????? 8

第二章 基因克隆所需的工具酶??????????? 12

一、限制性内切酶(restriction enzyme)????????????

12

二、DNA连接酶???????????????????? 20 三、DNA聚合酶???????????????????? 24 四、逆转录酶????????????????????? 27

第三章 基因的克隆载体 ?????????????? 28

一、质粒载体????????????????????? 28 二、大肠杆菌质粒载体 ????????????????? 30 三、λ噬菌体载体????????????????????33 四、粘粒载体(柯斯质粒载体)??????????????