根际细菌分离鉴定的论文

第22卷　第1期　　　　　　　　　　　　　　云南农业大学学报　　　　　　　

2007年　2月　　　　　　　　　　JournalofYunnanAgriculturalUniversity　　　　　

Vol122　No11

Feb.2007

根际细菌Serratiaplymuthica

3

HRO-C48的生防作用初探

马迎新,刘晓光

33

,高克祥,秦乃花,庞延东,时呈奎

(山东农业大学植物保护学院,山东泰安271018)

摘要:沙雷氏菌SerratiaplymuthicaHRO-C48分离自油菜根际,是一种产几丁质酶和IAA的植物根际促生细菌。离体抑菌活性测定表明,菌株HRO-C48具有广谱抗真菌活性。与12种测试的植物病原真菌平板对峙培养,产生大小不同的抑菌圈,说明可能通过产生抗生素抑制真菌生长。温室盆栽试验中,用HRO-C48菌悬液对番茄进行浸种和灌根处理,该菌在番茄植株根际能大量定殖,4周后根表和根际土壤中的菌量仍稳定在110×

10cfu/g水平。在温室条件下,菌株HRO-C48可有效防治黄瓜猝倒病,防治效果达49157;还能诱导番茄叶片

6

对灰霉病的系统抗性,诱抗效果达44145%。综合以上结果,说明菌株HRO-C48、溶菌、根际竞争、促生和诱导

环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验

实验报告

环境科学与工程学院实验中心

实验题目 细菌的分离纯化和接种实验 实验类别 综合

实验原理问答题：

1. 为什么湖水用10_4、10_5

低的浓度? 答：因为在这三个浓度范围内能尽量使样品中的微生物分散开, /细胞存在，否则一个菌落就不只是代表一个个体生长而成的，从而方便计数。

2. 为什么平板培养皿要倒置放入恒温箱中进行培养

:第一，为了防止重力对菌落的生成产生影响；第二，为了防止培养基中的水 分蒸发后凝结在壁上，滴落后影响菌的生长和形态观察；第三，防止培养基干涸。

3. 微生物常用接种方式有哪些？进行微生物接种应该注意哪些方面?

答：⑴划线接种，涂布接种，穿刺接种，三点接种，浇混接种，液体接种，注射 接种，活体接种等。

⑵接种用具及培养基等均需灭菌处理， 接种过程必须在煤气灯旁进行，接种 环、玻

璃涂棒等器具要过火处理，把所要用到的器材和菌种培养基有序编号放置， 操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品的接触， 往培养基是划线或 点菌时动作要轻以防把培养基划破等。

四、实验步骤

1. 制备细菌稀释液：

使用5ml 移液管加4.5ml 无菌水放入贴有10-3、10-4、10-5、10-6

标签的小试管中， 用一根Iml

菌落

定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 2、细菌在液体培养基中的生长现象 混浊

沉淀：多见于链状排列的细菌。 菌膜：多见于厌氧菌。

3、细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛细菌：

在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌：

只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。

生化试验鉴定：糖发酵试验、淀粉实验、油脂水解试验、吲哚实验、M.R.及V.P的原理及方法。

1.淀粉水解试验

1.将固体淀粉培养基熔化后冷却至50℃左右，无菌操作制成平板。 2.用记号笔在平板底部划成4部分。

3.将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌分别在不同的部分点种，在平板的反面分别在4部分写上菌名。

4将平板倒置在37℃温箱中培养48h。

5观察各种细菌的生长情况，打开平板盖子，滴入少量卢氏碘液于平板中，轻轻旋转平板，使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，说明淀粉已被水解，为阳性。透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱，即产生胞外淀粉酶活力的高低。 2油脂水解试验

1将熔化的固体油脂培养基冷却至50℃左右时，充分摇荡

水生态处理中植物根际环境作用研究

王 健1,侯文华2,何绪文1

摘 要：本文综述了国内外利用水生植物生物生态处理水体的研究进展，介绍植物根际环境在水体修复中的作用、重要性原理分析及其、当前的研究热点，最后展望了植物根际环境研究在水生态修复中的发展前景。

关键词：水污染，根际环境，根际分泌物，根际微生物

1. 引言

水污染是一个世界性问题，它会导致水资源的可利用性能降低，自然水生态系统的逐渐退化。我国是水资源短缺的国家，随着人们对水环境的重视，对水处理的要求的也越来越高。目前，生物学处理法成为了水处理领域中的热点，尤其是水生、湿生植物处理法。用这种生物生态的处理技术来补充传统的生化二级处理技术的不足，它不仅能起到净化水的作用，还能改善生态环境，促进退化水生态系的恢复。无论是在人工湿地和植物浮床的处理系统中，水生植物除了直接吸收、固定、分解污染物外，还通过对土壤中细菌、真菌等微生物的调控来进行环境的修复。了解植物的根际环境对发展植物生态处理技术在水处理中的应用有很大的促进作用。

2. 国外研究现状

近20 年来，世界上许多国家均已广泛利用水生植物来净化生活污水、工业废水以及富营养湖泊治理中，并产生了一种以大型水生植物为基础的AMAT

细菌鉴定

一、标本的处理：

1、先按标准操作规程（SOP）对标本进行接种（一般种普通血平板和选择性麦康凯平板；真菌-沙保弱；链球菌-巧克力平板，CO2温箱；结核菌-罗氏;粪-SS）。一般细菌置于35℃培养24h；真菌置于30℃培养

2、后将标本涂片，进行革兰染色，判断是革兰阴性或阳性，杆状，球状，短杆，球杆及弧状。

二、根据菌落形态，颜色，光滑与否，边缘，大小，是否有溶血环等初步判断所属菌属。

三、生化鉴定（最主要的依据）

定向实验

(最重要两实验)

API微生物鉴定系统

生理生化鉴定：根据微生物对各种生理条件（温度、pH、氧气、渗透压）、生化指标（唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱性）代谢反应进行分析，并将结果转化成软件可以识别的数据，进行聚类分析，与已知的参比菌株数据库进行比较，最终对未知菌进行鉴定的一种技术。

生物梅里埃API试剂类型

? API 20E革兰氏阴性杆菌鉴定 ? API 20NE非发酵菌鉴定

? API STAPH葡萄球菌及微球菌 常用5种 ? API STREP链球菌鉴定 ? API CORYNE棒状杆菌 ? API 20C AUX酵母菌 ? API 20A厌氧菌 ? API LISTERIA李斯特菌 ? A

细菌分类鉴定规程

细菌分类鉴定规程

杜艳、余翔、罗国升

新菌鉴定主要流程：

1、 潜在新菌的确定

拿到拼接好的16Sr RNA gene序列后，进入NCBI blastN (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)或EzTaxon server 2.1 (http://147.47.212.35:8080/) 进行比较，同源性低于98%的序列(同源性处于98-97%之间的序列最好少于3株)，可初步判断存在新菌的可能。

2、 选择标准菌株构建进化树

选择参考菌株构建三种进化树 (NJ、MP和ML)，构建进化树是需要注意以下几点：1）所选择的序列必须都是在IJSEM上正式发表的序列，2）所选择的参考菌株必须包含新菌所在属的所有标准菌株，3）需要选择新菌所在科的一些与新种所在属相近的属的type species作为参考菌株，4）需要选择一个远源的菌株作为参考菌株，如：E. coli。 3、 购买标准菌株

根据进化树位置和同源性高低选择标准菌株作为参考菌株，联系相关保藏机构购买标准菌株。具体信息可以在http://www.bacterio.cict.fr/ 上查找。

标准菌株的选择需遵循以下几点：1) 如果要用到不同的属但不是用这些

细菌分类鉴定规程

细菌分类鉴定规程

杜艳、余翔、罗国升

新菌鉴定主要流程：

1、 潜在新菌的确定

拿到拼接好的16Sr RNA gene序列后，进入NCBI blastN (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)或EzTaxon server 2.1 (http://147.47.212.35:8080/) 进行比较，同源性低于98%的序列(同源性处于98-97%之间的序列最好少于3株)，可初步判断存在新菌的可能。

2、 选择标准菌株构建进化树

选择参考菌株构建三种进化树 (NJ、MP和ML)，构建进化树是需要注意以下几点：1）所选择的序列必须都是在IJSEM上正式发表的序列，2）所选择的参考菌株必须包含新菌所在属的所有标准菌株，3）需要选择新菌所在科的一些与新种所在属相近的属的type species作为参考菌株，4）需要选择一个远源的菌株作为参考菌株，如：E. coli。 3、 购买标准菌株

根据进化树位置和同源性高低选择标准菌株作为参考菌株，联系相关保藏机构购买标准菌株。具体信息可以在http://www.bacterio.cict.fr/ 上查找。

标准菌株的选择需遵循以下几点：1) 如果要用到不同的属但不是用这些

芽孢杆菌的分离与鉴定 实验器材：铲子（1）,盆（1）,电子天平（1），洗耳球(1)，接种勾和环（1）,1ml吸管（7）,玻璃涂棒（1）,平皿（12）,250ml带玻璃珠三角瓶（1）,双层纱布（1）,试管（7），标签纸（1）,恒温箱，显微镜（4）。

实验试剂：无菌水，1mol/L NaOH、1mol/L HCL、草酸铵结晶紫染色液、卢戈氏碘液、95%乙醇、复红液、5%孔雀绿、沙黄、乙醚、吲哚试剂、40%NaOH、肌酸

牛肉蛋白胨培养基：牛肉膏1g，蛋白胨2g，Nacl 1g，水200ml，ph7.2，琼脂3.0-4.0g； 生孢培养基：0.1%蛋白胨，0.1%葡萄糖，0.07%酵母粉，0.02%硫酸镁晶体（七水），0.02%硫酸铵，0.1%磷酸氢二钾（3水），1.5%琼脂； 一、土壤中芽孢杆菌的筛选 A.培养基配置步骤：（1）称量：按比例称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠，共置于烧杯中； （2）溶解：先加入适量无菌水，加热使其溶解，再补足水至总量； （3）调pH：用1mol/L NaOH或1mol/L HCL调PH至7

A sub-proteome of Arabidopsis thaliana mature stems trapped on Concanavalin A is enriched in cell wall glycoside hydrolases

Michel Zivy3, and

90% of plant cell walls and constitute three different kinds of polymers: cellulose,

hemicelluloses and pectins. Plant cell wall polysaccharide composition and structure change

during plant development and are different from one plant species to another (Cosgrove,

1997; Popper and Fry, 2003). Cell wall proteins (CWPs) contribute to wall architecture or are

involved in the regulation of grow

姓名：刘孟良 学号：0953010411 学院：潇湘学院

专业：机械设计制造及其自动化

超级细菌

【摘要】超级细菌，指滥用抗生素使得细菌的抗药性越来越强，所以给这类细菌统称超级细菌。超级细菌还指耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌MRSA，是皮肤细菌的一种，由于一般抗生素很难杀死它，所以很难诊治。一旦人类，特别是免疫力低的患者感染这种病菌后，常常会引起败血症、肺炎等并发症，危及生命，对产妇、老人、儿童来说都相当危险。超级细菌主要通过接触传播，感染发病的主要是抵抗力低的人群，对普通人群不会产生大的危害。

【关键词】超级细菌，抗药性，超级病菌 【正文】

⒈超级细菌的来源？

“超级细菌”现身日本 可抗目前所有抗生素 “超级细菌”早已波及世界

耐万古霉素肠球菌（简称VRE），VRE早在1987年就被分离出来了，地点是英国伦敦，随后纽约发现北美第一例VRE感染，再后来VRE感染迅速波及世界各地，也包括我国在内。 李六亿说，肠球菌属感染作为一种引起医院感染的主要致病菌已经引起医学界的广泛关注，美国全国医院感染监测与控制系统将其列为医院感染的第二大病原菌。近年来由于抗菌药物的广泛使用，使原本就对部分抗菌药物具有内在抗药性的肠球