生物实验整理

生物实验常用溶液的配制

一、DNA电泳相关：

1、DNA电泳缓冲液：

（1）Tris-乙酸（TAE）缓冲液：TAE较为常用，且价格低，但其缓冲能力较弱。所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环，而且TAE需要经常更新；且要加入EDTA，目的在于鳌合二价离子，抑制DNase，以保护DNA。

① TAE使用液：

1×：40mmol/L Tris-乙酸 1mmol/L EDTA ② TAE贮存液（每L）： 50×：242g Tris碱 57.1ml 冰乙酸

100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（2）Tris-硼酸（TBE）缓冲液：

① TBE使用液：

0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸 1mmol/L EDTA ② TBE贮存液（每L）： 5×： 54g Tris碱 27.5ml 硼酸

20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（3）Tris-磷酸（TPE）缓冲液：

① TPE使用液：

1×：90mmol/L Tris-磷酸 2mmol/L EDTA ② TPE贮

<医学生物学实验>整理

1. 常用的吸量管有：

奥氏吸量管、移液管、刻度吸量管

4. 如何正确使用吸量管？

答：(1) 选用原则：就近原则

(2) 吸量管的使用：吸-擦-调-放

5. 如何正确使用微量加样器？

答：转-按-吸-擦-按

6. 如何正确使用离心机？

放置-装管-平衡-启动-取出

二、主要实验方法原理

1.分光光度法基本原理是什么？

答：不同物质由于其分子结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同，因此每种物质都具有其特异的吸收光谱，在一定条件下，其吸收程度与该物质浓度成正比，故可利用各种物质的不同的吸收光谱特征及其强度, 对不同物质进行定性和定量的分析。分光光度法常被用来测定溶液中存在的光吸收物质的浓度，其基本原理是根据Lambert和Beer定律。该定律阐明了溶液对单色光吸收的多少与溶液浓度及溶液厚度之间的关系。

2. 利用分光光度法对物质进行定量测定的方法主要有哪两种？

答：直接比较法（公式法）、标准曲线法

3. 层析法基本原理是什么？

答：层析法就是利用混合物在经过固定相和流动相两相的过程中，其中的待分离物质在不同的两相中不断地进行交换、分配、吸附及解吸附等过程，由于混合物中各组分间在理化性质如吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系

前言

1. 本课程主要讲述了哪些实验技术，其中被称为生化实验室中三大实验技术的是？

答：层析技术、电泳技术、离心技术、分光光度技术、免疫化学技术。其中层析技术、电泳技术、离心技术是生物学的三大实验技术。 第一章 生物化学基本操作与要求

1.洗涤液的种类配置与应用 答：（1）铬酸洗液（称取5g重铬酸钾粉末置于250mL烧杯中，加水5mL，尽量使其溶解，慢慢加入浓硫酸100mL，边加边搅拌。冷却后贮存备用，若颜色变绿，表示洗液已失效。）用于洗涤玻璃器皿。（2）浓盐酸，洗去水垢或某些无机盐沉淀。（3）30%硝酸，洗涤CO2测定仪器及微量滴管（4）45%尿素，洗涤蛋白制剂、血样（5）有机溶剂，洗涤油脂、脂溶性染料（6）去污粉，一般污染物 2. 化学试剂的分级

答：

3. 什么是准确度、精密度？

答：准确度表示实验分析测量值与真实值相接近的程度。误差。精密度是指在相同条件下多次测量结果互相吻合的程度，表现了测定结果的再现性。偏差。 4. 如何提高实验的准确度、精密度？

答：准确度：减少系统误差1.仪器校正2.空白试验3.对照实验；精密度：减少偶然误差1.平均取样2.多次取样。

第二章 层析技术 1. 层析技术及其原理

答：层析技术是一种基于被分离物质的物

坐骨神经-腓肠肌标本的制备

剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？ 离体实验时，由于离体器官的生存条件不完全等同于正常体内，其保持正常生理活性的时间较短，因此需要我们在标本的制作过程中特别注意对标本生存条件的维护，即模拟体内环境。任式液是两栖类动物实验常用的生理盐溶液，含有组织正常生命活动必需的营养物质和电解质，其渗透压和酸碱度也与动物体液相似；因此用任式液冲洗标本不会影响组织的兴奋性；而自来水是低渗溶液，其理化性质与任式液截然不同，用自来水冲洗标本会改变组织细胞的理化环境，轻则影响标本的正常生物活性，造成实验过程中出现很多异常现象，重则使神经和肌肉吸水膨胀乃至死亡。

2. 金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌，可能引起哪些不良后果？

金属在溶液中都要发生一定程度的电离，因此金属器械碰压、触及神经时，一些金属离子往往会使神经肌肉疲劳，影响其兴奋性。如果碰的较重,损伤了神经及腓肠肌，损伤部位及近端的神经甚至就死亡了兴奋不能传导。 3. 如何保持标本的机能正常？

1）制备标本的操作过程中，勿过度牵拉、损伤神经和肌肉 2）金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌；

3）也不要使动物的皮肤分泌物和血液等接触神经和肌肉，以免硬性标本活性 4）制备好的标本

1. 细菌的特殊结构及其应用

细菌主要构成：

细胞壁、细胞膜、细胞质 、核质体等

有些细菌还有荚膜、鞭毛、菌毛，芽孢，黏液层，光合作用片等特殊结构。 荚膜的应用：

①鉴别细菌：通过荚膜的血清学反应进行细菌鉴定（荚膜膨胀实验）。

②制备疫苗：荚膜能有选择地黏附到特定细胞的表面上，表现出对靶细胞的专一攻击能力。例如，伤寒沙门杆菌能专一性地侵犯肠道淋巴组织。细菌荚膜的纤丝还能把细菌分泌的消化酶贮存起来，以备攻击靶细胞之用。 鞭毛的应用： 微型细菌机器人

– 这种微型螺旋线形状的机器人是模拟大肠杆菌和类似的细菌设计的；

– 目前科学家称它们为“人造细菌鞭毛”(ABFs)，这里的鞭毛是指细菌身体上像

鞭子一样的尾部

– 人造细菌鞭毛的应用

– 携带药物抵达人体内预定的位置 – 移除人体内动脉斑块

– 帮助生物学家修改细胞结构

– 但这一研究仍处于初级阶段，在实际应用前还需要进一步试验

菌毛的应用：

淋病奈瑟氏球菌： 菌毛可使其吸附于尿道粘膜上皮的表面而不被尿液冲走； 芽孢的应用：

一些芽孢菌可用来杀灭害虫，如苏云金杆菌、青虫菌、杀螟杆菌等在形成芽孢时，还产生蛋白质伴胞晶体，对鳞翅目昆虫有强大的毒杀作用。因而将这些芽孢杆菌制成杀虫剂，实行以菌

生物材料表面改性及评价 （技术）

? ? ?

背景：研发全新的生物材料很难得到专家认可，尤其是SFDA或FDA认可。 生物材料研究的一大类共性问题，针对不同基材(聚合物、陶瓷、金属)各有不同的改性技术；

旨在改进已有生物材料的物理性能(如抗凝血)或提高其细胞/组织相容性；

1. 生物材料的表面与界面

张兴栋、翁杰、林昌健、冷永祥、乔明强、孔德领、黄楠、计剑、齐民、冷扬、蔡开勇、憨勇、崔春祥、包崇云、郝玉林、刘宣勇、屈树新、吴方、高长有、王贵学、 2. 生物材料评价与分子相容性

蔡开勇、张胜民、王贵学、奚廷斐、吕晓迎、王远亮、罗彦凤、冷扬、 3. 医用高分子材料的表面改性

丁建东、徐福建、计剑、贝建中、王身国、孔德领、周长忍、 序号 1. 张兴栋 骨、软骨：研究羟基磷灰石，磷酸钙；有羟基磷灰石、四川大学 （国家生聚乳酸膜等7个生产许可证；著有生物材料骨诱导理物医学材料工程技论。 吴方 纳米生物涂层材料、骨组织工程用支架材料、生物玻璃涂层材料及复合材料 2. 孔德领 血液净化吸附树脂、小口径血管 3. 乔明强 疏水蛋白构建及应用 4. 高长有 医用高分子材料及改性、水凝胶、软组织工程 5. 计剑 医用性高分子材料、分子自组装、表面改

第一章

动物的主要类群

复习方向

? 1、各动物类群的主要特征

（体形、体表、结构、消化、运动、 呼吸、生殖等特征）

? 2、常见种类

? 3、与人类生活的关系 动物的分类

? 根据体内有无由脊椎骨组成的脊柱，将动物分为两大类： 1、无脊椎动物——腔肠动物、扁形动物、 线形动物、环节动物、 软体动物、节肢动物 2、脊椎动物——鱼、两栖动物、爬行动物、 鸟、哺乳动物

按照从低等到高等的顺序进行划分。

? 动物界中的第一大类群是节肢动物， 节肢动物中种类最多的一类动物是昆虫；

? 动物界中的第二大类群是软体动物； ? 脊椎动物中种类最多的类群是鱼。 动物腔肠 类群 动物 扁形 动物 线形 动物 环节 动物 软体 动物 节肢 动物 身体呈两身体细身体呈圆柔软的身身体呈辐侧对称长，呈圆筒形，由体表面有体表有坚射对称 （左右对柱形 许多彼此外套膜，韧的外骨称） 相似的体大多具有骼 主要体表有刺背腹 体表有角节组成 贝壳 特征 细胞 扁平 质层 有口 无肛门 有口 无肛门 有口 有肛门 靠刚毛或运动器官身体和附疣足辅助 是足 肢都分节

生物接触氧化法处理有机工业废水的启动——

生物膜的接种、培养与驯化

一、实验目的与实验原理

生物接触氧化法是以附着在载体（俗称填料）上的生物膜为主，净化有机废水的一种高效水处理工艺。具有活性污泥法特点的生物膜法，兼有活性污泥法和生物膜法的优点。在可生化条件下，不论应用于工业废水还是养殖污水、生活污水的处理，都取得了良好的经济效益。该工艺因具有高效节能、占地面积小、耐冲击负荷、运行管理方便等特点而被广泛应用于各行各业的污水处理系统。

生物处理是有机工业废水处理的重要环节，在这里氨/氮、亚硝酸、硝酸盐、硫化氰等有害物质都将得到去除，对以后流程中水质的进一步处理将起到关键作用。

如果能配合JBM新型组合式生物填料使用，可加速生物分解过程，具有运行管理简便、投资省、处理效果高、最大限度地减少占地等优点。

/

1、生物接触氧化法的反应机理

生物接触氧化法是一种介于活性污泥法与生物滤池之间的生物膜法工艺，其特点是在池内设置填料，池底曝气对污水进行充氧，并使池体内污水处于流动状态，以保证污水与污水中的填料充分接触，避免生物接触氧化池中存在污水与填料接触不均的缺陷。

该法中微生物所需氧由鼓风曝气供给，生物膜生长至一定厚度后，填料壁的微生物会因缺氧而进行厌氧代谢，产生的气体及曝

生物接触氧化法处理有机工业废水的启动——

生物膜的接种、培养与驯化

一、实验目的与实验原理

生物接触氧化法是以附着在载体（俗称填料）上的生物膜为主，净化有机废水的一种高效水处理工艺。具有活性污泥法特点的生物膜法，兼有活性污泥法和生物膜法的优点。在可生化条件下，不论应用于工业废水还是养殖污水、生活污水的处理，都取得了良好的经济效益。该工艺因具有高效节能、占地面积小、耐冲击负荷、运行管理方便等特点而被广泛应用于各行各业的污水处理系统。

生物处理是有机工业废水处理的重要环节，在这里氨/氮、亚硝酸、硝酸盐、硫化氰等有害物质都将得到去除，对以后流程中水质的进一步处理将起到关键作用。

如果能配合JBM新型组合式生物填料使用，可加速生物分解过程，具有运行管理简便、投资省、处理效果高、最大限度地减少占地等优点。

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1、生物接触氧化法的反应机理

生物接触氧化法是一种介于活性污泥法与生物滤池之间的生物膜法工艺，其特点是在池内设置填料，池底曝气对污水进行充氧，并使池体内污水处于流动状态，以保证污水与污水中的填料充分接触，避免生物接触氧化池中存在污水与填料接触不均的缺陷。

该法中微生物所需氧由鼓风曝气供给，生物膜生长至一定厚度后，填料壁的微生物会因缺氧而进行厌氧代谢，产生的气体及曝

生 物 化 学

第一章：糖类的结构与性质

本章主要内容

一、糖类概况 二、糖的旋光性

三、单糖（结构、性质、代表性单糖及衍生物） 四、寡糖

五、复合糖（糖胺聚糖、蛋白聚糖、糖蛋白） 六、糖链结构分析 基本概念

异构：化合物具有相同的分子式，但原子连接次序或原子空间排布不同。 构型：具有相同的分子式和结构式，但原子在空间的排布不同，称之构型。 旋光异构：由于存在手性碳（不对称碳原子）而具有旋光性。

不对称碳原子：与四个不同的原子或基团相连并因此失去对称性的四面体碳。用C*表示 。 对映体：一个不对称碳原子的取代基在空间里的两种取向是物体与镜像的关系，并且两者不

能重叠。这两种旋光异构体称为对映体。两个对映体具有程度相同但方向相反的旋光性（D+与L-;D-与L+）和不同的生物活性，其他物理和化学性质完全相同。含n个C*的化合物，其旋光异构体的数目是2n, 组成2n /2对对映体。

任一旋光化合物都只有一个对映体，它的其他旋光异构体在理、化性质都与之

不同，不是对映体的旋光异构体称非对映体。

仅一个手性碳构型不同的非对映体称差向异构体（有几种情况）。

异头物：单糖由直链结构变成环状结构后，羰基碳成为新的