果蔬中维生素C的测定分光光度法

实验一 紫外分光光度法测定维生素C片中的VC含量

一、实验目的

1、了解紫外分光光度计的主要结构及工作原理。

2、掌握紫外分光光度计的操作方法及紫外定性定量分析方法

3．掌握紫外分光光度法测定水中维生素C含量的原理与分析条件的选择。

二 、实验原理

维生素C是人体重要的维生素之一，它影响胶元蛋白的形成，参与人体多种氧化-还原反应,并且有解毒作用。人体不能自身制造Vc，所以人体必须不断地从食物中摄入Vc，通常还需储藏能维持一个月左右的Vc。缺乏时会产生坏血病，故又称抗坏血酸。

维生素C属水溶性维生素，分子式C6H8O6。分子结构中具有二烯醇结构，其结构如下：

它易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚。分子中的二烯醇基具极强的还原性，性质活泼，易被氧化为二酮基而成为脱氢抗坏血酸。维生素 C分子结构中有共轭双键，固在紫外光区有较强的吸收。

根据维生素C 在稀盐酸溶液中，Vc吸收曲线比较稳定，在最大吸收波长处，其吸收值A的大小与维生素C的浓度c的大小成正比，符合郎伯—比尔定律：

1

A=εbc

其中A为吸收度；c为试样中维生素C的浓度，mol·L-1；b为吸收池厚度，cm；ε为摩尔吸收系数，L·mol-1·cm-1。若在最大吸收波长下，首先绘制出

实验十：果蔬中维生素C的测定（2，6—二氯靛酚滴定法）

教学目的要求 基本知识点

1、了解从果蔬中提取VC的方法。

2、掌握2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操

作关键。

3、熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 4、掌数据处理和结果计算技术。 重点 2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 难点

2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理 课时教学方案： 复习与提问：

1、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。

2、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。 3、检查学生实验准备情况。 【引入新课】

VC在人体内的主要功能是：参加体内的氧化还原过程，促进人体的生长发育，增强人体对疾病的抵抗能力，促进细胞间质中胶原的形成，维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能，增强肝脏的解毒能力。当人体中缺少VC时，就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。近年来，科学家们还发现，VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质—亚脱胺，从而减低癌的发病率。

据测定，成年男子每天约需VC 65 mg，成年女子每天约需VC 60 mg。 VC广泛存在

上海大学生命科学实验中心

课 程： 学 号：

生化分析实验 09123364

实 验 报 告

姓 名： 吴梦楠 同组者： 温 度：

日 期： 2011.09.21 指导老师： 戴小峰 湿 度：

实验时间： 2011.09.19

实 验 名 称：紫外可见分光光度法测定维生素B2 实 验 目 的：1、维生素B2的紫外可见光谱图的测绘

2、根据E1M444nm文献值323求取样品中VB2的含量 3、用标准曲线法求取样品中VB2的含量 4、比较两种方法的误差来源

实 验 原 理：维生素B2，通常指核黄素。维生素B2在224、267、375、444nm处具有吸收峰。一

般取444nm的波峰为定量吸收峰，除了用一般的工作曲线法外，还可按C17H20N4O6 的吸收系数（E1M444nm）为323计算，求取样品中维生素B2的含量。

实 验 器 材：Cary100UV-Vis分光光度计、冰醋酸（AR）、氢氧化钠1mol/L（AR）、维生素B2标

准试剂（0.3mg/ml）、药片（含维生素B2片）。

实 验 步 骤：1、取待测片剂20 片，精密称定、研细，精密称取适量（约相当于维生素B210mg），

HPLC法测定果蔬中维生素C

摘要通过高效液相色谱法和国标法2种方法测定了果蔬中的维生素C，通过精密度、准确度、回收率等方法对比结果表明：液相色谱法是一种高效、快速、准确、高灵敏度的分离分析方法。

AbstractIn this paper，high performance liquid chromatography and national standard method were used to determine VC in fruits and vegetables. Through the precision， accuracy，recovery methods，etc.，such as comparative results showed that liquid chromatography was an efficient，fast，accurate and high sensitivity separation analysis method.

Key wordsHPLC method；fruits and vegetables；vitamin C；determination

维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它能

新疆医科大学

卫生化学教学大纲

（供预防医学类专业用）

编写者：哈及尼沙

药学院分析/药分教研室

2012年12月

1

I 前言

课程名称：卫生化学

英文名称：Sanitary Chemistry 课程类别：专业基础课（必修） 面向专业：预防医学专业（本科）

选用教材：《卫生化学》（第六版）， 郭爱民主编 出版单位：人民卫生出版社

学时：54学时（理论课36学时，实验课18学时）

卫生化学（Sanitary chemistry）是高等医学教育预防医学专业学生必修的专业基础课。是探讨和研究预防医学中所需要的检验方法、理论和新分析技术的一门学科。其主要任务是为学生讲授专业课和生产实习所必需的分析课学基础理论、基本知识及基本技能。在医学教育中，卫生化学与分析化学、仪器分析和统计学等前期基础课程有着密切联系，并为环境卫生学、营养与食品卫生学、劳动卫生学及流行病学等后期专业课程提供基础理论和相关知识。

本大纲适用于预防医学类专业五年制汉、民族本科学生使用。现将大纲使用中有关问题说明如下：

1、为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容

紫外可见分光光度法

一．选择题

1．.在紫外-可见分光光度计中, 强度大且光谱区域广的光源是 ( ) (1) 钨灯 (2) 氢灯 (3) 氙灯 (4) 汞灯

2．紫外-可见吸收光谱曲线呈高斯分布的是 ( ) (1)多普勒变宽 (2)自吸现象 (3)分子吸收特征 (4)原子吸收特征 3．.某化合物的浓度为1.0 ×10-5mol/L,在?max=380nm时, 有透射比为50%, 用1.0cm吸收池, 则在该波长处的摩尔吸收系数?max /[L/(mol?cm)]为 ( ) (1) 5.0 ×104 (2) 2.5 ×104 (3) 1.5 ×104 (4) 3.0 ×104

4．下列结构中哪一种能产生分子荧光？ ( )

(1)OH(2)NO2(3)COOH(4)I

5．按一般光度法用空白溶液作参比溶液，测得某试液的透射比

红外分光光度法

一、填空题

1. 红外光谱是介于 与 之间的电磁波，其波长范围是 。

2. 化合物的红外吸收曲线可由 来描述。 3. 不同分子在红外谱图中出现的吸收峰位，是由 所决定的。

-1

4.乙醛CH3CHO的vc=0为1731cm，若醛上氢被一氯原子所取代形成CH3—C—Cl后，则vc=0向 移动。

-1

5. 丙酮的vc=0为l715cm，若其中一个甲基被一苯基所取代形成苯乙酮后，则vc=0向 移动。

6. 化合物的vc=0为l663cm，若8位上氢被甲基取代后则vc=0由于 因而频率 。

7. 红外光谱中所说的特征频率区是指 的区间，其特点是 。

-1-1

8. 苯甲醛的红外光谱中出现了2780cm和 2700cm两个吸收峰，是由 而产生的。

9. 分子内形成氢键与分子间形成氢键一样会使基团的振动频率向低波数移动。但是分子间氢键 而分子内氢键

新疆医科大学

卫生化学教学大纲

（供预防医学类专业用）

编写者：哈及尼沙

药学院分析/药分教研室

2012年12月

1

I 前言

课程名称：卫生化学

英文名称：Sanitary Chemistry 课程类别：专业基础课（必修） 面向专业：预防医学专业（本科）

选用教材：《卫生化学》（第六版）， 郭爱民主编 出版单位：人民卫生出版社

学时：54学时（理论课36学时，实验课18学时）

卫生化学（Sanitary chemistry）是高等医学教育预防医学专业学生必修的专业基础课。是探讨和研究预防医学中所需要的检验方法、理论和新分析技术的一门学科。其主要任务是为学生讲授专业课和生产实习所必需的分析课学基础理论、基本知识及基本技能。在医学教育中，卫生化学与分析化学、仪器分析和统计学等前期基础课程有着密切联系，并为环境卫生学、营养与食品卫生学、劳动卫生学及流行病学等后期专业课程提供基础理论和相关知识。

本大纲适用于预防医学类专业五年制汉、民族本科学生使用。现将大纲使用中有关问题说明如下：

1、为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容

第六节 分光光度法

(一)基础知识 分类号：W6-0 一、填空题

1．分光光度法测定样品的基本原理是利用朗伯—比尔定律，根据不同浓度样品溶液对光信号具有不同的 ，对待测组分进行定量测定。 答案：吸光度(或吸光性，或吸收)

2．应用分光光度法测定样品时，校正波长是为了检验波长刻度与实际波长的 ，并通过适当方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的光度测定误差。 答案：符合程度

3．分光光度法测定样品时，比色皿表面不清洁是造成测量误差的常见原因之一，每当测定有色溶液后，一定要充分洗涤。可用 涮洗，或用 浸泡。注意浸泡时间不宜过长，以防比色皿脱胶损坏。 答案：相应的溶剂 (1+3)HNO3 二、判断题

1．分光光度计可根据使用的波长范围、光路的构造、单色器的结构、扫描的机构分为不同类型的光度计。( ) 答案：正确

2．应用分光光度法进行试样测定时，由于不同浓度下的测定误差不同，因此选择最适宜的测定浓度可减少测定误差。一般来说，透光度在20％～65％或吸光值在0.2～0.7之间时，测定误差相对较小。(

原子吸收分光光度法 1原子吸收分光光度法基本原理：原子吸收光谱分析是利用分析处于基态的待测原子蒸汽对特征辐射的吸收来测定样品中该元素含量的一种办法。

2共振吸收线：原子从基态激发到能量最低的激发态，产生的谱线称为共振吸收线。由于元素的原子结构和外层电子排布不同，吸收的能量不同，共振吸收线各具有特征性，这种共振线称为元素的特征谱线，是元素所有谱线中最灵敏的谱线。

3原子吸收谱线轮廓和谱线宽度：谱线轮廓是指谱线具有一定频率范围和形状。吸收线轮廓常用吸收系数Kv随频率（或波长）的变化曲线来描述，而原子吸收线的特点是用谱线中心频率（由各原子能级分布特征所决定）、半宽度（最大吸收系数一半处峰的频率差）和强度来表征。

4原子吸收分光光度计：主要部件：瑞线光源、原子化器、单色器、检测器。 ①光源：作用是发射待测元素的特征曲线，发射辐射波长的半宽度要明显小于吸收线的宽度，辐射强度大，稳定且背景信号小。常用空心阴极灯。②原子化器：将试样中的待测元素转变成原子蒸气。主要有火焰原子化器和无火焰原子化器两类。③单色器：衍射光栅是常用的分光元件。单色器的作用是将所需的共振吸收线与邻近干扰线分离。④检测系统：作用