香菇多糖含量的测定

时珍国医国药２００７年第１８卷第８期

ＩＪＩｓＨＩｚＨＥＮＭＥＤＩｃｌＮＥＡＮＤ

ＭＡＴＥＲｎＭＥＤＩｃＡＲＥＳＥＡＲｃＨ２０ｃｒ７ＶｏＬ．１８

Ｎｏ．８‘

多糖含量测定方法比较

钟方晓１，任海华２，李岩１

（１．山东省中医药研究院，山东济南２５００１４；２．山东省肿瘤医院，山东济南２５０１１７）

摘要：目的探讨中药多糖含量测定方法酶可行性及稳定性。方法对测定多糖常用对照品葡萄糖、鼠李糖、半乳糖，参

考文献方法，分别采用硫酸一苯酚法、硫酸一蒽酮法比较显色反应后吸收曲线的稳定性。结果不同单糖对照品显色反

应后最大吸收波长不同，其中硫酸一苯酚法显色反应后稳定性较好，硫酸一蒽酮法稳定性较差。结论硫酸一苯酚法为

较理想的多糖含量测定方法。

关键词：多糖；硫酸一苯酚法；硫酸一蒽酮法．中图分类号：Ｒ２８４．２

文献标识码：Ａ

文章编号：１００８电８０５（２００７）０８－１９１６旬１

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注射用香菇多糖含量测定 检验方法学确认方案

文件编号：VP-4F119MV-00

2013年03月

南京绿叶思科药业有限公司 Nanjing Luye Sike Pharmaceutical Co.,Ltd

南京绿叶思科药业有限公司

验证方案审批表

方案名称： 方案编号：

注射用香菇多糖含量测定检验方法学确认方案 VP-4F119MV-00

方案起草 部 门 姓 名 签 名 日 期 质管部

王峰 方案审核 部 门 姓 名 签 名 日 期 质管部 质管部 质管部 质管部 质管部 *** /

杨红艳 王志华 张 飞 冯 晶 余 冬 *** / / / 方案批准 部 门 姓 名 签 名 日 期 /

卓亚红 年 月 日

颁发日期：

目 录

1. 概述 ....................................................................................................................................... 1 2. 目的 .......

超声波法提取香菇多糖

研究背景：

香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、 调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能

用途：抗肿瘤药。为化、放疗辅助药。主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。

生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。状况良好。

操作过程：

方案设计：香菇多糖的提取

香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用

香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。

2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml

离子色谱的知识

高效毛细管电泳法测定香菇多糖中单糖的组成

汲晨锋，季宇彬

(哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研发中心，黑龙江哈尔滨，150076)

摘要: 目的 测定分析纯化的香菇多糖的单糖组分。方法 单糖经α-萘胺衍生化以后，用硼砂做电泳介质，实现高效毛细管电泳分离，得到标准的α-萘胺衍生单糖的毛细管区带电泳谱图。将香菇多糖水解成单糖，用相同的方法实施电泳，得到多糖的毛细管区带电泳谱图。结果 最佳工作条件：运行缓冲液为75mmol/L、pH10.5的硼砂水溶液，分离电压15 KV，进样压力0.5 Psi，进样时间 15s，柱温25℃。通过与标准谱图对照分析，香菇多糖由鼠李糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖组成。结论 高效毛细管电泳能有效分析多糖中单糖组分，灵敏度高，分离效果好。

关键词: 毛细管电泳；香菇多糖；组分

引言

目前多糖中单糖组成的分析主要采用纸层析、液相色谱、气相色谱等方法，样品用量大，实验条件严格，而毛细管电泳技术具有样品用量少，时间短，灵敏度高，分离效果明显的特点[1]，主要用在寡糖的分析上。多糖的高效毛细管电泳(HPCE)研究目前尚处于探索阶段[2-6]，由于单糖在水溶液中解离能力极差，在强碱条件下才能带上电荷。使用含硼砂的

Oct.2008268现代化工

ModernChemicalIndustry

第28卷增刊(2)2008年10月

高品质竹叶多糖的筛选及含量测定方法的研究

叶建中,陈文英,王成章,周　昊,郑光耀

(中国林业科学研究院林产化学工业研究所;国家林业局林产化学工程重点开放性实验室,

江苏南京210042)

摘要:以硫酸-蒽酮比色法,葡萄糖为标准品,建立竹叶中多糖的分析方法,对27种竹叶中多糖活性组分的含量进行了测定。结果表明:多糖质量分数在1194%～5169%,其中多糖质量分数在4%以上的有绿竹、毛竹、鹅毛竹、小叶箬竹、矮箬竹、铺地竹、百夹竹等,淡竹、绿竹、毛竹分布广、多糖含量较高,成为工业上提取竹叶多糖活性组分的最佳原料;而鹅毛竹含量特别高,但是分布较少。同品种的竹叶上下部位多糖含量有所不同,且含量都是下部老叶高于上部嫩叶。

关键词:竹叶多糖;含量;分光光度法中图分类号:TQ91;Q539　

文献标识码:A　

文章编号:0253-4320(2008)S2-0268-03

ScreeningofPolysaccharideandstudyontheiranalysisforhigh2qualitybambooleaves

YEJian2zhong,CHENWen2yin

茶多酚的含量测定

高锰酸钾直接滴定法

目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作 原理

茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

仪器与试剂

仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。 试剂：

1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。 2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。开始

叶绿素含量的测定

一、 实验目的

1. 了解分光光度计的工作原理； 2. 掌握不同型号分光光度计的操作方计；

3. 通过本实验的学习掌握叶绿素含量测定的一种常见的方法------分光光度

法。

二、 实验原理

叶绿素是脂溶性色素，主要存在于以叶绿体为首的色素体中。在活体中，叶绿素与脂蛋白结合并受到还原系统的保护，对氧和光是稳定的。

叶绿素的80%丙酮提取液在波长663nm，645nm有吸收峰，叶绿素a和叶绿素b的浓度符合以下公式：

Ca=0.0127A663-0.00259A645

Cb=0.0229A645-0.00467A663 浓度单位是：g/L

Ca=12.7A663-2.59A645

Cb=22.9A645-4.67A663 浓度单位是：mg/L

叶绿素总浓度为： CT=Ca+Cb 若以试液中色素含量来表示，则

C(mg/L)?提取液总体积(ml)叶绿素含量（mg/g鲜样）?

样品重(g)?1000

三、 仪器、试剂和材料 1. 仪器

紫外-可见分光光度计、研体、25ml容量瓶、玻璃漏斗、玻璃棒、皮头滴管 2. 试剂

丙酮（分析纯）、85%丙酮、

茶多酚的含量测定

高锰酸钾直接滴定法

目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作 原理

茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

仪器与试剂

仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。 试剂：

1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。 2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。开始

-相当于标示量%的计算公式

片剂：V×F×T/W×平均片重/标示量×100% 针剂： V×F×T/W/标示量（g/ml） ×100%

-以重量/片计的计算公式：V×F×T/W×平均片重=重量/片 例1

司可巴比妥钠胶囊含量测定：精密称取内容物0.1385g，置碘量瓶中，加水10mL，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25 mL，再加盐酸5 mL，立即密塞并振摇1分钟，暗处静置15分钟后，加碘化钾试液10 mL，立即密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L，F=0.992）滴定，至近终点时加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。已知：样品消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）17.05 mL，空白试验消耗25.22mL，每1mL溴滴定液（0.05mol/L）相当于13.01mg的司可巴比妥钠。计算本品相当于标示量的百分含量（规格0.1g，20粒胶囊内容物重2.7506 g）？ (p.90－生成物滴定法) 司可巴比妥钠的滴定度计算 HHNaONaOOBrBrONN CH2CH2+Br2 (过量定量)NN OOCH3CH3CH3CH3 2KBr+I2Br2+2KI (剩余) 2NaI+Na2s4o

叶绿素含量的测定

一、原理

根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。

根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A＝αCL

式中：α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。

如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。 已知叶绿素a、叶绿素b的80%丙酮溶液在红外区的最大吸收峰分别位于663、645nm处。已知在波长663nm下叶绿素a、叶绿素b在该溶液中的吸光系数的分别为82.04和9.27；在波长645nm处的吸光系数分别为16.75和45.60。根据加和性原