pcr生物安全手册

龙江县第一人民医院检验科

生物安全手册

（第一版）

总则 1.目的：为确保实验室全体员工熟悉生物安全法律、法规，建立生物安全意识，保证相关工作人员掌握开展工作必需的生物安全知识和技术，避免实验室感染，防止实验室事故，特制定此手册。 2.依据 ：《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《医疗废物管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《实验室生物安全手册》。 3.适用范围 ：适用于进入检验科实验室所有工作人员。 4.修订： 国家及卫生部门涉及生物安全的法律法规发生修订更改时，本手册应相应作出修订。

检验科生物安全管理组织结构及职责 1.检验科成立生物安全委员会，全面负责检验

2

科生物安全工作。

责任人：梁彦

1. 1 由科主任全面负责科内生物安全管理文件的制定。

1.2 督促、检查各个专业组遵守、落实生物安全情况。

1.3设立生物安全监督员一名。

1.4组织全科定期、不定期的学习生物安全的相关法律、法规。 实验室人员准入制度

1.目的：明确实验室人员的资格要求，避免不符合要求的人员进出实验室或承担相关工作造成生物安全事故。 2.范围：适用于进入检验科实验室所有工作人员。 3.职责

3.1检验科生物安全负责人负责实验室人员准入工作的监督和实施。

检验科安全手册 第一节检验科安全委员会

一、 安全委员会组织架构：

安全委员会 安全委员会顾问 总安全主任 安全主管 生化室 免疫 室 微生物室 H I V室 血液室 基因室 安全委员会成员：

二、职责：

1.实验室安全委员会及总安全主任职责：

1.1负责或组织相关专家对中心的实验室安全状况进行年度评估，并对各种规章制度的有效性、充分性进行审议和评估。

1.2负责批准实验室安全计划，负责批准有关实验室安全的各种软硬件配置。

1.3对中心实验室安全的具体实施提出指导性意见。

1.4调查和审议中心的各实验室安全计划是否符合国家的相关规定并批准计划的实施。

1.5监督实验室安全教育及健康管理的落实。

1.6讨论中心工作人员违反实验室安全政策的处理措施，负责并授权对重大实验室安全事故及事故隐患进行处理。

1.7总安全主任负责每年对中心的实验室安全手册进行评审及提出并根据实际需要提出修改意见和见意。

1.8在对新的涉及安全的程序进行修改后，总安全主任或其委托人应对修改的内容进行审核并批准后方可实施。

1.9审议其它与实验室安全相关的必要事项。 2.实验室安全主管职责：

2.1具体

检验科安全手册 第一节检验科安全委员会

一、 安全委员会组织架构：

安全委员会 安全委员会顾问 总安全主任 安全主管 生化室 免疫 室 微生物室 H I V室 血液室 基因室 安全委员会成员：

二、职责：

1.实验室安全委员会及总安全主任职责：

1.1负责或组织相关专家对中心的实验室安全状况进行年度评估，并对各种规章制度的有效性、充分性进行审议和评估。

1.2负责批准实验室安全计划，负责批准有关实验室安全的各种软硬件配置。

1.3对中心实验室安全的具体实施提出指导性意见。

1.4调查和审议中心的各实验室安全计划是否符合国家的相关规定并批准计划的实施。

1.5监督实验室安全教育及健康管理的落实。

1.6讨论中心工作人员违反实验室安全政策的处理措施，负责并授权对重大实验室安全事故及事故隐患进行处理。

1.7总安全主任负责每年对中心的实验室安全手册进行评审及提出并根据实际需要提出修改意见和见意。

1.8在对新的涉及安全的程序进行修改后，总安全主任或其委托人应对修改的内容进行审核并批准后方可实施。

1.9审议其它与实验室安全相关的必要事项。 2.实验室安全主管职责：

2.1具体

个人收集整理 仅供参考学习

MEMS生物芯片技术

——PCR芯片技术

勾海波 22011325

近年来, 科学家们在微机电系统(MEMS) 、纳米技术和分子生物学领域取得了无可争议的进步和突破, 将这些技术结合起来形成功能更强大的分析系统成为目前人们科学探索的目标。生物MEMS(BIOMEMS) 将MEMS 技术应用在生物、医学领域,研究适合于生物领域的微器件和微制造系统, 是最具吸引力的。特别是在寻找新基因、DNA 测序、疾病诊断、药物筛选等方面, 是最有应用前途的研究方向。

BIOMEMS 的研究内容主要包括在生物体外进行生物医学诊断的微系统和在生物体内进行生物医学治疗的微系统。微机械制造技术使BIOMEMS 具有微米量级的特征尺寸, 得以实现器件和系统的微型化, 使生物医学的诊断和治疗可以快速、自动化、高通量、较小损伤地完成。BIOMEMS 技术批量生产能力更极大地降低了生物医学诊断和治疗的成本, 因此BIOMEMS 技术已成为21 世纪科学研究和商品化的主要研究目标。

生物微机电系统( BIOMEMS) 是在生物医学工程中使用的MEMS, 其中最典型的就是生物芯片。由尺度效应可以知道,MEMS

生物安全手册

（第一版）

AA大学附属RYC医院检验科

AA大学附属RYC医院检验科目录

AA大学附属RYC医院检验科目录

目录

1．生物安全管理体系1-1

1.1 紧急事件电话和办公室联系方式

1.2 生物安全管理机构

1.2.1 RYC医院生物安全管理机构

1.2.2 RYC医院检验科生物安全管理小组

1.3 职责

2．生物安全评估和管理2-1

2.1风险评估和风险管理表

2.2 暴露途径

2.3 生物安全等级和检查制度

3．标志3-1

3.1 墙面标志

3.2 门上标志

3.3 标贴和颜色

3.4 外送维修或处理的设备

4．生物安全要求和人员管理4-1

4.1 生物物质的使用登记

4.2 生物安全柜

4.3 人员管理

5．医学监督程序5-1

5.1 暴露于结核杆菌实验室工作人员的筛选

5.2 免疫

5.3 医学限制

5.4 实验室工作人员血清贮存

6．个人防护装备（PPE）6-1

6.1 实验服、隔离衣

6.2 手套

6.3 工作鞋

6.4 护目镜

6.5 口罩、帽子

7．实验室设备7-1

7.1 生物安全柜

7.2 离心沉淀程序

AA大学附属RYC医院检验科目录

7.3 化学吸附真空管和过滤器

7.4 注射器和针头

7.5 移液管

7.6 搅拌机、混匀器、超声波清洗和粉碎机

7.7 冻干

7.8 其它设备（水浴箱、冷藏箱、

RT-PCR实验步骤

一．实验器具：

1.移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2.5μl 2.吸头：1ml、200μl、20μl 3.匀浆管：5ml

4.EP管：1.5ml、500μl、200μl

5.试剂瓶：棕色试剂瓶(广口，放75%乙醇) 6.量筒：100ml 7.容量瓶：1000ml

8.试管架：5ml、1.5ml、20μl 9.铝制饭盒：1-2个 10.大瓷缸：1个 11.锡泊纸：一卷 12.卷纸：2卷

13.三角烧瓶：带盖，稍大

二．实验器具处理

1.塑料制品：(包括枪头、EP管、匀浆管等)先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中，将塑料制品逐个浸泡其中(注意：小枪头要充分浸泡，必要时需要针筒打入DEPC水)，过夜后取出(注意：DEPC水很难自然晾干，所以建议先将刚取出的DEPC物品甩干，枪头装入枪头盒后甩干，EP管和匀浆管装入饭盒后甩干，然后在37度孵箱烘干)。高压后烤干备用。如果DEPC处理过的物品时间已超过一个星期，再次使用前应再次高压。

2.玻璃制品：泡酸过夜，冲洗干净，先泡1‰DEPC过夜，再蒙锡纸烤干备用。 3.匀浆器：(包括剪刀、镊子)先洗净后，超声消毒即可(不需要泡DE

1. 如果要增加特异性，要考虑是否升温，复性时候的较高温度有利于筛选特定片段，减少其他GC丰富片段的竞争。

2. 考虑使用甘油：加甘油也可以的,一般终浓度在10%左右.我的实验也曾遇到过GC高达73%的情况,加过甘油非特异性改善了很多,你不妨试一下.

3. 使用甜菜碱：

DMSO can usually give results in GC-rich regions when used at a final

concentration of 5%, although there are reports in the literature of

genes which required 10% DMSO, so a bit of experimentation may be

necessary to optimise the concentration for your genes. Alternatively,

addition of Betaine to concentrations of 1M in reactions can also be

beneficial in GC-rich regions.

There was a comparison pub

RT-PCR实验步骤

一、总RNA提取

1）试剂配制

1. 0.1TPC水：1000mL双蒸水中加入1mLDEPC，室温下静置4小时。（①用来泡使用

器具处理12小时；②在120℃下高压灭菌30分钟后室温放置备用用来溶解RNA。） 2. 氯仿 3. 异丙醇

4. 75%乙醇：用无水乙醇和高压后的DPEC水配制，现配现用。

2）操作步骤：

1. 样品处理

a. 组织：将组织放在液氮中磨碎（低温处理）。每50-100mg组织加1mL裂解液TRZOL，

用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过裂解液TRZOL体积的十分之一。 b. 单层培养细胞；直接在培养板上加入裂解液TRZOL裂解细胞，每10cm2面积加1mL

TRZOL。用取样器抽打几次。（注意：裂解液RZ的加入量根据培养瓶面积决定，不是由细胞数决定。如果加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污染。）

c. 细胞悬液：离心取细胞，弃上清。每5-10×106动物细胞和植物细胞加入1mL裂解液RZ。

加裂解液RZ前不要洗涤细胞，以免降解RNA。

d. 血液：直接取新鲜血液，加入3倍体积RZ（推荐0.25mL血液+0.75mLRZ），充分震荡

混匀。

2. 将裂解样品在室温放置5分钟，使得核酸蛋白质复合

前 言

各位工友：

欢迎加入舟山中远船务工程有限公司。人的生命是最宝贵的，生命于每个人都只有一次。为保证您的生命安全和身体健康，保证您家庭的幸福和美满，请您认真阅读本手册每一条安全条规，理解并严格按照条规的要求进行操作，千万不要贸然涉险！

舟山中远船务工程有限公司

2007/6/1

目 录

1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10、 11、 12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、

公司基本安全要求 个人安全劳护用品使用要求 安全通道的要求 危险作业许可要求 明火作业审批要求 明火作业安全要求

密闭舱室或狭小空间作业安全要求 起运作业的安全要求 高处作业安全要求 喷砂作业安全要求 油漆作业安全要求 密闭舱室涂装作业安全要求 清油作业安全要求

油轮（舱）及危险液货船施工安全基本要求 油舱测量管、透气管割换安全操作方法 化学清洗作业安全要求 铜工作业安全要求

发放号： 文件号：MMY -PGL

×××畜牧兽医技术推广中心

生物安全管理手册

（第一版）

批 准：

审 核：

受控状态：受 控

2009年9月10日发布 2009年11月01日实施

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批 准 令

为确保实验室生物安全，本中心依据中华人民共和国国务院令第423号 《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全认可准则》(CNAS-CL05:1909)和《实验室生物安全通用要求》（GB 18489-1908）编写了《实验室生物安全管理手册（试行）》等生物安全管理体系文件，本中心生物安全委员会保证在今后的运行中严格遵守生物安全管理体系文件，并努力改进，使本生物安全管理体系的运行保持持续性和有效性。

实验室生物安全管理手册（试行）》等生物安全管理体系文件是中心实验室生物安全管理运行的依据和指南，是本实验室开展各种生物实验活动应遵循的法规性文件。全体工作人员必须认真学习,正确领会，全面掌握，并严格执行，确保所从事的实验活动符合生物安全要求。

本手册于2009年9月10日经×××畜牧