线粒体在细胞的哪个地方

线粒体DNA的损伤及其对细胞的影响

张明帅 生物化学 291305117

摘要： 线粒体DNA(Mitochondrial DNA, mtDNA)是线粒体内具有遗传效应的双股闭环DNA分子，其遗传信息量虽小，却控制着线粒体一切最基本的性质，对细胞及其功能有着重要影响。mtDNA的损伤会导致细胞结构及功能的变化，已越来越引起人们的重视。本文就近年来mtDNA的损伤及其对细胞影响的研究进展作一综述。

关键词：DNA 线粒体 DNA损伤 细胞

线粒体是细胞质中最重要的细胞器之一，作为细胞能量储存和提供的场所，其以氧化磷酸化方式将食物内蕴藏的能量转变为可被机体直接利用的ATP高能磷酸化合物。动物体85%的能量产生于此。线粒体内的线粒体DNA( mitochondrial DNA, mtDNA)是核外惟一具有遗传效应的物质，控制着线粒体一此基本性质，对细胞的结构及功能有着重要影响。mtDNA由于其自身的结构特点及其处于线粒体这个氧化磷酸化活跃的部位，极易受损，从而影响细胞的能量代谢、分裂增生等，并且与细胞的凋亡、恶变等有着密切的关系。

1线粒体DNA的结构特点及其易损性

mtDNA具有自我复制功能并能控制一定的遗传性状，其遗传信息量虽小，却控制着线粒体一此最基

线粒体DNA的损伤及其对细胞的影响

张明帅 生物化学 291305117

摘要： 线粒体DNA(Mitochondrial DNA, mtDNA)是线粒体内具有遗传效应的双股闭环DNA分子，其遗传信息量虽小，却控制着线粒体一切最基本的性质，对细胞及其功能有着重要影响。mtDNA的损伤会导致细胞结构及功能的变化，已越来越引起人们的重视。本文就近年来mtDNA的损伤及其对细胞影响的研究进展作一综述。

关键词：DNA 线粒体 DNA损伤 细胞

线粒体是细胞质中最重要的细胞器之一，作为细胞能量储存和提供的场所，其以氧化磷酸化方式将食物内蕴藏的能量转变为可被机体直接利用的ATP高能磷酸化合物。动物体85%的能量产生于此。线粒体内的线粒体DNA( mitochondrial DNA, mtDNA)是核外惟一具有遗传效应的物质，控制着线粒体一此基本性质，对细胞的结构及功能有着重要影响。mtDNA由于其自身的结构特点及其处于线粒体这个氧化磷酸化活跃的部位，极易受损，从而影响细胞的能量代谢、分裂增生等，并且与细胞的凋亡、恶变等有着密切的关系。

1线粒体DNA的结构特点及其易损性

mtDNA具有自我复制功能并能控制一定的遗传性状，其遗传信息量虽小，却控制着线粒体一此最基

线粒体DNA的损伤及其对细胞的影响

张明帅 生物化学 291305117

摘要： 线粒体DNA(Mitochondrial DNA, mtDNA)是线粒体内具有遗传效应的双股闭环DNA分子，其遗传信息量虽小，却控制着线粒体一切最基本的性质，对细胞及其功能有着重要影响。mtDNA的损伤会导致细胞结构及功能的变化，已越来越引起人们的重视。本文就近年来mtDNA的损伤及其对细胞影响的研究进展作一综述。

关键词：DNA 线粒体 DNA损伤 细胞

线粒体是细胞质中最重要的细胞器之一，作为细胞能量储存和提供的场所，其以氧化磷酸化方式将食物内蕴藏的能量转变为可被机体直接利用的ATP高能磷酸化合物。动物体85%的能量产生于此。线粒体内的线粒体DNA( mitochondrial DNA, mtDNA)是核外惟一具有遗传效应的物质，控制着线粒体一此基本性质，对细胞的结构及功能有着重要影响。mtDNA由于其自身的结构特点及其处于线粒体这个氧化磷酸化活跃的部位，极易受损，从而影响细胞的能量代谢、分裂增生等，并且与细胞的凋亡、恶变等有着密切的关系。

1线粒体DNA的结构特点及其易损性

mtDNA具有自我复制功能并能控制一定的遗传性状，其遗传信息量虽小，却控制着线粒体一此最基

细胞器线粒体的分离与观察

高熹1120152430（李安一）

（北京理工大学生命学院16121501班）

摘要：差速离心法是交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。离心分离出细胞核与线粒体，进行染色，对细胞核和线粒体的形态进行观察并记录。

关键词：差速离心法；细胞核；线粒体；实验。

1 引言

差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。起始的离心速度较低，让较大的颗粒沉降到管底，小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀，改用较高的离心速度离心悬浮液，将较小的颗粒沉降，以此类推，达到分离不同大小颗粒的目的。

线粒体是真核细胞特有的，司能量转换的重要细胞器。细胞种的能源物质——糖、脂肪、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸华生成ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体的结构和功能的研究通常是在离体线粒体上进行的。

制备线粒体用组织匀浆在悬浮介质中进行差速离心的方法。在一给定的离心场中（对于所使用的离心机，就是选用一定的转速），球形颗粒的沉降速度取决于它的密度、半径和悬浮介质的粘度。在一均匀悬浮介质中离心某一时间内，组织匀降中的

运动与心肌细胞凋亡的线粒体机制

第 1 7卷第 3期 2 0年 3月 01

体

育

学

刊

V 1 1 o 3 o . 7 N .M a r .2 0 10

J u n l f P y i a E u a i n o r a o h s c l d c t o

运动与心肌细胞凋亡的线粒体机制张琳，邓树勋，郝选明(华南师范大学体育科学学院，广东广州 5 00 ) 106

摘

要：综述了线粒体的结构功能及心肌细胞凋亡过程与线粒体的密切关系，探讨其参与运

动诱导心肌细胞凋亡的可能机制。线粒体在心肌细胞凋亡中起关键的作用，细胞凋亡过程中许多 重要事件的发生都与线粒体密切相关，包括线粒体通透转变孔道( P P的开放、线粒体膜电位 m T) ( )△的丧失、线粒体内外膜间隙促凋亡蛋白的释放、细胞内氧化还原状态的改变、 超载、 c 2 C B 1 .

家族促进和抑制凋亡蛋白的参与等。 关键词：运动医学；线粒体通透转变孔道；线粒体膜间隙；运动；心肌；细胞凋亡；综述文献标识码：A 文章编号：10 .162 1)30 9 .7 067 1(0 00 .0 20中图分类号：G 0 . 84 2

M e ha im so io ho dr ao a i c t po t

有关线粒体

（问答题）

1、线粒体的大小？（直径为0.3-1.0微米，长度为1.5-3.0微米，与细菌相当） 2、简述线粒体内膜和外膜各自的特点和区别？（线粒体外膜上蛋白质和脂质的比约为1:1，外膜含有大量的孔蛋白，通透性很高；线粒体内膜上蛋白质和脂质的比≥3:1，高于外膜。内膜缺乏胆固醇、富含心磷脂，高度不透。）

3、线粒体外膜、内膜、膜间隙的标志酶分别是什么？（单胺氧化酶、细胞色素氧化酶、腺苷激酶）

4、简述线粒体分裂增殖的3个阶段？（分裂早期：线粒体分裂的准备阶段，膜内陷尚未发生；分裂中期：线粒体膜呈现环形内陷并逐渐加深；分裂后期：线粒体膜被分断，线粒体一分为二）

5、线粒体的起源是？（原始真核细胞内共生的有氧呼吸细菌）

6、什么是半自主性细胞器？（功能在主要受到细胞核基因组调控的同时还受到自身基因组的调控的细胞器） （判断题）

7、在许多动、植物细胞或特定细胞周期中，线粒体的大小和形态可能随着细胞生命活动变化而呈现出很大的变化.(对)

8、线粒体是高度动态的细胞器，不断融合又分开，并沿细胞骨架（微管）运动。（对）

9、不同类型、相同类型的真核细胞生物中线粒体的数目都相差较大。（错） 10、线粒体在有些细胞中形成长的可移动的链状结构，而

第六章 线粒体与细胞的能量转换

一 、选择题

1．可在光学显微镜下见到的结构是 A、微粒体 B、基粒 C、溶酶体 D、线粒体 E、过氧物酶体

2．由两层单位膜围成的细胞器是 A、高尔基复合体 B、溶酶体 C、线粒体 D、内质网 E、过氧物酶体

3．真核细胞的核膜外DNA存在于 A、核膜 B、线粒体 C、内质网 D、核糖体 E、过氧物酶体

4．动物细胞中含有DNA分子并能产生ATP的细胞器是 A、中心体 B、溶酶体 C、核糖体 D、线粒体 E、过氧物酶体

5．线粒体半自主性的一个重要方面体现于下列那一事实 A、线粒体ＤＮＡ能独立复制 B、线粒体含有核糖体

C、在遗传上由线粒体基因组和细胞核基因组共同控制 D、线粒体ＤＮＡ与细胞核ＤＮＡ的遗传密码有所不同 E、线粒体ＤＮＡ是裸露的

6．关于线粒体的结构哪一种说法是不正确的 A、是由单层膜包裹而成的细胞器 B、是由双层单位膜封闭的细胞器 C、线粒体嵴上有许多基粒 D、是含ＤＮＡ的细胞器 E、是含核糖体的细胞器 7．线粒体的功能是 A、蛋白质合成场所 B、营养和保护作用 C、细胞的供能中心 D、物质储存与加工 E、消化场所

8．下列细胞中含线粒体最多的是 A、上皮细胞 B、心肌细胞 C、成熟红细胞

线粒体的提取步骤

制备程序：

a. 组织匀浆：称取50-200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS冲洗，用剪刀剪为0.5cm2碎块放入小容量玻璃匀浆器内。估计组织块总体积。加入1.5 ml冰预冷的Mito Sdution。上下研磨组织20次。

b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 × g 5~10 min离心收集细胞。计7

数。每次提取需要2-5 × 10个细胞。加入1.5 ml冰预冷的Mito Sdution重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内。用间隙严密的研杵研磨细胞30-40次。

1. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管。800 × g 离心5 min 4 oC。细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞等在管底,弃去。

2. 收集上清液并转移到新的离心管。800 × g 离心5 min at 4 oC。弃沉淀

3. 将上清液转移到新的离心管。10,000 × g 离心10 min 4 oC。离心后的上清含胞浆成分，将上清转移到新离心管，可收集用于对照实验。线粒体沉淀在管底。

4. 洗涤线粒体：清除管内壁粘连的液体和碎片，加入0.2 ml Mito Sdution轻弹管底重悬线粒体沉淀，12,000 × g 离心10

　　叶落花残

　　你却趁着这一季节的荒凉

　　远离了我的视线

　　记忆中，没下雨

　　你的背影，却在我的泪眼中模糊

　　你说过：牵手一生的诺言

　　到最后，都不过是风筝放飞的线

　　我知道

　　纵使花再开，你也不会来

　　你留下了名字

　　让我枕着落泪无语

　　你留下了影子

　　使我彻夜相思，这孤单的夜

　　我多想闻到你的气息

　　爱若是风，我会站在风中微笑

　　爱却是雨

　　把我的世界变成了汪洋

　　我不知何时变得如此的痴情

　　常常在梦中为你撑伞

　　我也不知何时变得如此的无奈

　　总是一个人，独对夕阳

　　饮着消愁的酒，唱着心酸的歌

　　静夜，点一盏心灯

　　让亮光燃尽你的谎言

　　我用深情奠祭着你的无情

　　把与你的过往埋葬在梦里

　　窗外，月光满地

　　那花开的地方，一定有萤火

　　那花开的地方

　　一定，有爱的芬芳

DNA提取

191

论　著 　

线粒体DNA提取方法的比较3

李伟文　陆松敏　刘建仓　武　凡　李　萍　柏干荣

第三军医大学野战外科研究所(重庆,400042)

　　摘要　目的将提取线粒体DNA的碱变性法、改进高盐沉淀法加以比较,以得到最方便快速提取线Triton法、粒体DNA的方法。方法分离Wistar大鼠小肠上皮细胞,用3种方法提取线粒体DNA,紫外分光光度法定量。用琼脂糖凝胶电泳和线粒体ATPase8亚基基因PCR扩增产物鉴定所提取的线粒体DNA。结果改进高盐沉淀法线粒体DNA量最多,Triton法最少。OD260 ～1.85间。将改进高盐沉淀法提取线粒体DNA用于OD280均在1.78结论改进高盐沉淀法提取线粒体DNA具有操作简单,PCR扩增,测定出了线粒体DNAATPase8亚基基因序列。产量多的优点,该法所提取mtDNA可用于mtDNA测序。

关键词　线粒体;DNA;分子遗传学

　　1981年,Anderson用氯化铯密度梯度分离得到线粒体DNA(mtDNA),进行了全序列分析。此后,mtDNA的研究日益得到重视。本实验将Triton法、碱变性法与改进高盐沉淀法进行了比较,发现后者具有简便、经济、易重复等优点。1　材料和方法111112　细