dna重组技术的基本工具ppt

专题1 基因工程基因工程是指按照人 们的愿望，进行严格 的设计，并通过体外 DNA重组和转基因等技 术，赋予生物以新的 遗传特性，从而创造 出更符合人们需要的 新的生物类型和生物 产品。由于基因工程 是在 DNA 分子水平上进 行设计和施工的，因 此又叫做DNA重组技术。

能否培养出具有抗虫 性状的抗虫棉呢？

胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只 能从猪、牛等动物的胰腺中提取，产量低 成本高。 而微生物生长迅速，容易控制。于是科学 家设想，若能将人的胰岛素基因导入微生 物体内，并得以表达，就不仅能解决产量 问题，还能大大降低生产成本，使药品价 格大幅下降。 能否让微生物产生出人的 胰岛素等珍贵药物？

这些定向改造生物的设想能 实现么？ 经过多年的努力，科学家 终于在20世纪70年代创立了 可以定向改造生物的新技术

——基因工程

一、基因工程的概念：优点： 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通 俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物 定向地改造生物的遗传性状； 的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后 实现基因在不同物种之间的转移，迅速培育 放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物 出生物新品种 的遗传性状。原理 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程

DNA重组技术的基本工具

一、选择题

1．关于限制酶的说法中，正确的是( ) A．限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B．EcoRI切割的是G—A之间的氢键

C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中

2．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。

下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？( )

A．BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D．BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—

3．下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是( ) A．DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键

B．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D．同一种DN

DNA重组技术的基本工具

一、选择题

1．关于限制酶的说法中，正确的是( ) A．限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B．EcoRI切割的是G—A之间的氢键

C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中

2．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。

下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？( )

A．BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D．BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—

3．下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是( ) A．DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键

B．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D．同一种DN

《DNA重组技术的基本工具》教案设计

一、教学课题 （一）教学目标和要求 知识目标：（1）了解基因工程的基本概念。 （2）简述三种工具的作用 （3）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 能力目标：（1）通过对材料的观察，学会科学的观察方法，培养观察能力。 （2）通过对基本概念、基本原理、科学方法的正确理解和掌握，逐步形成比较、判断、推 理、 分析、综合等思维能力，具备能运用学到的生物学知识评价和解决某些实际问题的能力。 （3）通过学生动手制作重组DNA的模型，培养学生的动手能力以及合作精神。 情感目标：（1）通过学习基因工程的概念，使学生认识到科学研究的严谨，激发为祖国奋斗的精神。 （2）通过学习基因操作的工具，使学生树立结构与功能相统一的辩证唯物主义观念 (二)教学重点和难点 教学重点：（1）简述三种工具的作用 （2）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新 教学难点：载体必须具备的条件 二、教材分析 《DNA重组技术的基本工具》为生物选修三现代生物科技专题的第一章第一节，是我们高二下学期的内容。这节

《DNA重组技术的基本工具》教案设计

一、教学课题 （一）教学目标和要求 知识目标：（1）了解基因工程的基本概念。 （2）简述三种工具的作用 （3）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 能力目标：（1）通过对材料的观察，学会科学的观察方法，培养观察能力。 （2）通过对基本概念、基本原理、科学方法的正确理解和掌握，逐步形成比较、判断、推 理、 分析、综合等思维能力，具备能运用学到的生物学知识评价和解决某些实际问题的能力。 （3）通过学生动手制作重组DNA的模型，培养学生的动手能力以及合作精神。 情感目标：（1）通过学习基因工程的概念，使学生认识到科学研究的严谨，激发为祖国奋斗的精神。 （2）通过学习基因操作的工具，使学生树立结构与功能相统一的辩证唯物主义观念 (二)教学重点和难点 教学重点：（1）简述三种工具的作用 （2）认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新 教学难点：载体必须具备的条件 二、教材分析 《DNA重组技术的基本工具》为生物选修三现代生物科技专题的第一章第一节，是我们高二下学期的内容。这节

一、重组DNA技术相关概念 重组 技术相关概念DNA克隆： 应用酶学的方法， DNA 克隆：应用酶学的方法 ， 在体外将各种来源的 克隆 遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、 遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天 然的或人工的DNA 与载体DNA DNA) DNA接合成一具有自我复 然的或人工的DNA)与载体DNA接合成一具有自我复 制能力的DNA 分子—— 复制子(replicon) DNA分子 ——复制子 (replicon), 制能力的 DNA 分子 —— 复制子 (replicon) , 继而通 过转化或转染宿主细胞， 过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转 化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一DNA分子， DNA分子 化子细胞 ， 再进行扩增提取获得大量同一 DNA 分子 ， 也称基因克隆或重组DNA 也称基因克隆或重组DNA (recombinant DNA) 。

基因工程(genetic engineering) —— 基因工程 实现基因克隆所用的方法及相关的工作 称基因工程，又称重组 工艺学。 称基因工程，又称重组DNA工艺学。 工艺学

(二)工具酶限制性核酸内切酶 DNA聚合酶Ⅰ DNA聚合酶Ⅰ 聚合酶 逆转

高中新人教版,生物选修2选修3

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重组DNA技术与基因工程1 2 3 4 5 6 重组DNA技术与基因工程的基本概念 重组DNA技术所需的基本条件 重组DNA技术的操作过程

目的基因的克隆与基因文库的构建外源基因在大肠杆菌中的表达 外源基因在酵母中的表达

5 外源基因在大肠杆菌中的表达A 大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征大肠杆菌表达外源基因的优势全基因组测序，共有4405个开放阅读框架 基因克隆表达系统成熟完善 繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定

被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物

5 外源基因在大肠杆菌中的表达A 大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征大肠杆菌表达外源基因的劣势缺乏对真核生物蛋白质的复性功能 缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统 内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白

细胞周质内含有种类繁多的内毒素

5 外源基因在大肠杆菌中的表达B 外源基因在大肠杆菌中高效表达的原理启动子 终止子

核糖体结合位点密码子 质粒拷贝数

启动子 启动子最佳距离的探测A

目的基因 E E

启动子

目的基因 E E

A 酶切开

Bal31酶解

启动子 启动子的筛选采用鸟枪法战略，将合适大小的DNA片段

克隆到启动子探针质粒pKO1上。 受体细胞染色体DNA上的galE、galT与质粒上报告基因galk

第一章DNA重组技术讨论4个问题：??1.什么是基因工程——基因工程的概念。2.为什么能进行基因工程——基因工程的原理和技术。（包括3大理论和3大技术准备）?3.怎样进行基因工程——3大步骤（DNA体外重组，重组DNA导入宿主细胞后扩增和表达，基因工程后处理）4.基因工程的应用和前景——对于医学来说即生产基因工程产品、开展基因治疗等。?第一节概

一.现代科学技术发展的特点

述

（一）科学技术加速发展和急剧变革

1.当代科学发展成指数增长趋势，全世界发表科技论文6000－8000/天，平均1篇/10.8秒问世。

2.人类科技知识在19世纪半衰期是50年，现在是3－5年（终身

教育学习）。

3.1973年，Cohen Group第一次实现了细菌遗传性状的转移terr+nersr→terrner，导致基因工程技术诞生，至今不到30年，人类

已经拥有了克隆羊、猪等等的技术，可以复制一个生命体。（克隆羊多利1997－2003，体细胞克隆，胚胎细胞克隆）

tetrnerPsclolRb-3srtetrnertetrOnertetrnerCohen Group第一次实现了细菌遗传性状转移示意图

一.现代科学技术发展的特点

(二)科学技术发展的综合化

1.19世纪中叶，科学和技术是

第十五章

债务重组(318)

本章要点 1. 债务人债务重组利得和债权人债务重组损失的 确定 2.修改其他债务条件下或有应付金额、或有应收 金额的处理 3.各种债务重组方式下债权人和债务人的会计处理 4.资产减值准备、债务重组和非货币性资产交换结 合的会计处理

一、债务重组的概念 债务重组，是指在债务人发生财务困 难的情况下，债权人按照其与债务人达成 的协议或者法院的裁定作出让步的事项。

1.债务人发生财务困难，是指因债务人出现 资金周转困难、经营陷入困境或者其他原因，导 致其无法或者没有能力按原定条件偿还债务。 2.债权人作出让步，是指债权人同意发生财 务困难的债务人现在或者将来以低于重组债务账 面价值的金额或者价值偿还债务。

二、以资产清偿债务(一)以现金清偿债务(319) 1.债务人的会计处理

借：应付账款 贷：银行存款 营业外收入—债务重组利得 (支付的现金小于应付债务账面价值的差额)

2.债权人的会计处理 借：银行存款 坏账准备 营业外支出—债务重组损失 (收到的现金小于应收债权账面价值的差额) 贷：应收账款 资产减值损失 (收到的现金大于应收债权账面价值的差额)

注意: (1)