石油开采微生物研究

[关于微生物修复石油污染研究的文献综述]

关于微生物修复石油污染研究的文献综述

【摘要】现如今石油的大量开采，使石油泄漏事故发生的几率持续升高，对于近几年的几起漏油事故，后续的处理工作非常关键，特别是如何恢复原来的生态环境。而利用微生物进行处理不失为一种环保的方式。本文对现有文献进行了梳理，较全面地介绍了环境中降解石油的微生物、被石油污染土壤的微生物修复技术以及影响微生物修复被石油污染土壤的几种主要因素。

【关键词】石油污染、微生物修复技术、原位微生物修复技术、异位微生物修复技术 【引言】石油是不可再生资源，是人类宝贵的能源和重要的化工原料，目前国际原油价格的持续上涨，直接影响着我国经济的可持续发展［1］。但同时，我国每年有大量的原油及其加工品流入环境，这不但浪费了宝贵的资源，而且对生态环境造成了污染［2］。石油进入土壤后，会引起土壤理化性质的改变，进而改变土壤有机质的组成和结构，对作物的生长发育也有不利的影响［3］。同时石油通过生长于该土壤中的植物及其加工品，以食物链的方式严重威胁着人类的身体健康［4］。在最初的石油污染治理工艺中，物理和化学方式处理是最主要的技术，并且已比较成熟。自20 世纪70 年代以来，随着生物修复技术的发展，微生物处

微生物学假期综合教学实习

实习时间： 2013年 6 月 25 日 开始

实习班级： 应技1101-1102 人

生命科学技术学院微生物教研室

微生物教学实习基本实验流程

第 配制牛肉膏固体培养基、3倍和单倍乳糖发酵液， 一准备无菌水及各种器皿、器材 天

）

灭菌

采集样品

（

第按要求做10倍梯度稀释

二

天

）配制伊红美测样品的细菌总数： 乳糖培养基初发酵试验：

样品的稀释液涂布按实验要求将稀释液接入兰固体和E.C液 牛肉膏平板 3倍、单倍乳糖发酵培养液 体培养基

37OC培养 37OC培养 灭菌

数平板上菌落看乳酸发酵 倒伊红美兰平板 （数，计算样品的细结果，查MPN表 第菌总数 三 检验乳酸发酵管中产酸产气的样品天 ）

伊红美兰平板划线 接E.C管

37OC培养 44.5OC培养

（挑有金属光泽、看结果，鉴定是 第

无光泽的菌落 否有粪大肠杆菌 四

天接单倍乳糖发酵管 革兰氏染色 ）

37OC培养

看复发酵结果 （ 第 综合本实验的六项结果（细菌总数、乳糖管初发酵（MPN）、伊红美兰平板鉴定、 五E.C平板鉴定、革兰氏染色、乳糖复发酵），写出实验报告 天清洗器材，并做好室内清洁。 ） （

微生物学综合教学实习

学习目

第四章 病毒

1 病毒具有哪些特点？病毒壳体有哪几种对称类型？

答：①体积微小 ②无完整的细胞结构，主要成分是核酸跟蛋白质 ③严格活细胞内寄生 ④对干扰素敏感，对抗生素不敏感 ⑤繁殖方式是复制，且具有感染性；有螺旋对称型、二十面体对称型、复合对称型。

2 什么是病毒的一步生长曲线？包括几个期？各有何特点？

答：主要以烈性噬菌体为例，一步生长曲线是定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线，反映了每种噬菌体的三个重要的特征参数：潜伏期、裂解期的长短及裂解量。包括潜伏期、裂解期和平稳期，潜伏期细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段，裂解期宿主菌迅速裂解、溶液中噬菌体颗粒急速增加的阶段，平稳期宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高峰的时期。

3 以噬菌体为例，说明病毒的增殖过程。

答：①吸附和侵入：噬菌体感染细菌时，其尾部为吸附器官，能识别宿主菌表面的特殊受体，然后分泌酶类溶解细胞壁，使细胞壁出现小孔，讲头部的核酸注入宿主菌内，蛋白质外壳留在宿主菌细胞外；②生物合成：进入宿主菌内的噬菌体核酸，首先转录翻译产生早期蛋白，进行晚期转录并复制子代核酸，再转录产生噬菌体的结构蛋白，子代核酸和蛋白质按一定程序装配成完整的子代噬菌体颗粒；③当宿主菌细胞

第四章 病毒

1 病毒具有哪些特点？病毒壳体有哪几种对称类型？

答：①体积微小 ②无完整的细胞结构，主要成分是核酸跟蛋白质 ③严格活细胞内寄生 ④对干扰素敏感，对抗生素不敏感 ⑤繁殖方式是复制，且具有感染性；有螺旋对称型、二十面体对称型、复合对称型。

2 什么是病毒的一步生长曲线？包括几个期？各有何特点？

答：主要以烈性噬菌体为例，一步生长曲线是定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线，反映了每种噬菌体的三个重要的特征参数：潜伏期、裂解期的长短及裂解量。包括潜伏期、裂解期和平稳期，潜伏期细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段，裂解期宿主菌迅速裂解、溶液中噬菌体颗粒急速增加的阶段，平稳期宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高峰的时期。

3 以噬菌体为例，说明病毒的增殖过程。

答：①吸附和侵入：噬菌体感染细菌时，其尾部为吸附器官，能识别宿主菌表面的特殊受体，然后分泌酶类溶解细胞壁，使细胞壁出现小孔，讲头部的核酸注入宿主菌内，蛋白质外壳留在宿主菌细胞外；②生物合成：进入宿主菌内的噬菌体核酸，首先转录翻译产生早期蛋白，进行晚期转录并复制子代核酸，再转录产生噬菌体的结构蛋白，子代核酸和蛋白质按一定程序装配成完整的子代噬菌体颗粒；③当宿主菌细胞

环境因素 对微生物生长的影响

班级：食品科学与工程102班

指导老师：郭玉宝 学号：3100401214 姓名：何月

实验目的：

1、了解抗生素对微生物生长的影响，学习抗菌谱实验的基本方法。

2、了解常用化学消毒剂对微生物生长的影响。 实验原理：

微生物的生长繁殖受外界因素的影响。物理，化学，生物及营养等不同环境因素影响微生物生长繁殖的机制不同，而，不同类型微生物对同一环境因素的适应能力也有差别。 1、生物因素

在自然界中普遍存在网速间的颉颃现象，许多微生物可以产生抗生素，能选择性的一致或杀死其他微生物。不同抗生素的抗菌谱是不同的。当滤纸条上的抗生素溶液在琼脂平板上向四周扩散后可形成抗生素浓度由高到低的梯度，将不同试验菌与滤纸条划线接种。培养后，根据抑菌带的长短可判断出该抗生素对不同试验菌生长的影响程度，初步确定其抗菌谱。 2、化学消毒剂

常用的化学消毒剂包括有机溶剂、重金属盐、卤族元素及其化合物。燃料和表面活性剂。 实验器材： 1、菌种

大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌 2、培养基

牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 3、溶液和试剂

青霉素溶液、无菌生理盐水、2.5%碘酒、5%石碳酸、1%来苏尔、75%乙醇、0.25%新洁尔灭 4、仪器和其他用品

一，芽孢具有强抵抗性的原因：

某些细菌在它的生活史中的某个阶段或某些细菌在它遇到不良环境时，在其细胞内形成一个内生苞子叫芽孢。 1， 含水量下降，蛋白质凝固点提高，受热不易变形。 2， 形成了厚而致密的芽孢壁，渗透性降低，代谢活力随之降低。使其进入休眠状态。 3， 芽孢含有耐热性较强的酶。 4， 合成了一种特有的耐热芽孢成分—2.6吡啶二羧酸（DPA）。 性质：不是一种繁殖方式，而是一种休眠体。

二，原核微生物和真核微生物各自特点及代表生物： 1， 原核微生物的核很原始，发育不全，只是DNA链高度折叠形成的一个核区，没有核膜，核质裸露，与细胞质没有明显界线，叫拟核或似核。原核微生物没有细胞器，只有由细胞质膜内陷形成的不规则泡沫结构体系，如间体和光合作用片层及其他内折，也不进行有丝分裂。原核微生物包括古菌，细菌，蓝细菌，放线菌，立克次氏体，支原体，衣原体和螺旋体。 2， 真核微生物有发育完好的细胞核，核内有核仁和染色质。其有核膜将细胞核和细胞质分开，使两者有明显的界线，其有高度分化的细胞器。如线粒体，中心体，高尔基体，内质网，溶酶体，和叶绿体等。其进行有丝分裂，真核微生物包括除蓝细菌以外的藻类，酵母菌，霉菌，伞菌，原生动物，微型后生动物等。

《微生物学》练习题库

一．选择题

0001 微生物是一些个体微小，构造简单的低等生物的总称，它们的大小一般小于（ ）

A、 1cm B、 1mm C、 0.1mm D、1um

0002 在微生物学发展史上曾出现过寻找重要病原菌的“黄金时期“其主要原因是（ ）

A、显微镜的应用 B、消毒灭菌技术的建立 C、微生物纯种分离技术的成功 D、纯种微生物培养技术的创立 0003 世界上第一个发现青霉素的学者是（ ）

A、 列文.虎克 B、弗莱明 C、秦纳 D、欧之希 0004 微生物五大共性的基础是（ ）

A、体积小，面积大 B、吸收多，转化快 C、生长性，繁殖快 D、适应性，易变异

0005 巴斯德为了否定“后生说”，他在前人工作的基础上，进行了许多实验，其中著名的（ ）无可辩驳地证实了空气中确实含有微生物，它们引起有机质的腐败。

A、巴斯德原则 B、柯赫原则 C、首种原则 D、免疫原则 0006 微生物学发展史的奠基期的开创者为（

第一章

1、什么是微生物简述微生物的生物学特征。 2、什么是食品微生物学它的地位与作用？ 3、阐明微生物奠基人之一巴斯德的王要贡献。 4、阐明微生物奠基人之一柯赫的主要贡献。

5、为什么微生物对微生物学家作为实验模型非常重要？

第二章

1、什么是革兰氏染色？其原理和关键是什么？。

2、比较革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的成分和构造

3、细菌的细胞结构包括一般结构和特殊结构，试说明这些结构及其生理功能。

4、芽孢有何特殊生理功能？其抗性机理是什么？芽孢的这些特点对实践有何指导意义。 5、什么叫菌落？怎样识别细菌和放线菌的菌落？ 6、比较原生质体、枝原体和L-型细菌的异同。

第三章

1、以啤酒酵母为例，说明酵母菌的形态和繁殖方式。 2、描述青霉和曲霉的分生孢子结构？

3、比较细菌、放线菌、霉菌和酵母菌菌落的特征。

第四章

1、 病毒粒子的结构与形状如何？ 2、 什么是一步生长曲线。 3、 烈性噬菌体的生长周期。

4、 什么是温和噬菌体？什么是溶源菌？

第五章

1、常用测定微生物生长的方法有几种？试比较较其优缺点。

2、单细胞微生物的典型生长曲线可分几期？其划分的依据是什么。 3、试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的特点。

4、什么是

情境一：分离纯化和选育生产菌种 发酵工艺技术教材

项目2 保藏微生物菌种操作

◆ 学习目标 1.了解各种菌种保藏的基本原理和优缺点； 2.学会根据菌种的特点选择相应的保藏方法；学会采用不同方法进行保藏菌种操作。 菌种是从事微生物学以及生命科学研究的基本材料，特别是利用微生物进行有关生产，如抗生素、氨基酸、酿造等工业，更离不开菌种。所以菌种保藏是进行微生物学研究和微生物育种工作的重要组成部分。其任务首先是使菌种不死亡，同时还要尽可能设法把菌种的优良特性保持下来而不致向坏的方面转化。 当然保藏菌种使其不变异亦是相对而言的。实际上没有一种方法可使菌种绝对不变化，所以研究菌种保藏就是要采用最合适的保存方法，使菌种的变异和死亡减少到最低限度。

菌种是国家的重要资源，世界各国对这项资源都给予极大重视，很早就设臵了各种专业性的保存机构，如ATCC、NRRL等。1980年我国成立了中国微生物菌种保藏委员会。 1 基础知识

菌种保藏主要是根据菌种的生理生化特点，人工创造条件，使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异。一般可通

微生物复习要点

燆

第一章 绪 论 很多微生物可应用在食品制造方面：

（1）酿酒、制醋、生产干酪、酸乳及腐乳等生产中使用的发酵微生物；

（2）另有一些微生物，可使贮藏和运输过程中的食品发生腐败变质，如大量的腐败微生物；

（3）还有少数微生物能引起人类食物中毒或使人、动植物感染而发生传染病，即所谓的病原微生物。 一 什么是微生物

微生物是一群形体微小，结构简单，必须借助光学或电子显微镜才能看清其外形的一类微小生物的统称。微生物学是研究微生物在一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异以及微生物的进化、分类、生态等生命活动规律及其应用的一门学科，是生物学的分支学科之一。 二 微生物的基本类群

非细胞结构 : 病毒、亚病毒、噬菌体

微生物 ｛ 原核生物：细菌、放线菌、蓝细菌、衣原体、立克次氏体及支原体 细胞结构 ：｛真核微生物：真菌（酵母菌霉菌及病原真菌）、澡类植物和原生动物 三 微生物的特点

1 . 种类多，数量大，分布广 2 . 代谢能力强、繁殖