细菌的糖发酵实验报告

实验报告

实验名称：与酵母菌发酵

所属课程名称：发酵工程工艺原理 班级：2011级生物技术 组长： 组员：

时间:2012.11.27—2012.12.3 实验指导教师：黄循吟

海南师范大学生命科学学院

2013年12月5日

摇瓶的应用与酵母菌发酵

摘要：发酵工程属于生物技术的范畴，是指利用微生物的生长繁殖和代谢活动来大量生产人们所需要的产品过程的理论和工程技术体系，是生物工程和生物技术学科的重要组成部分。本实验

通过对酵母菌进行摇瓶培养,并定时取样测定其OD值、pH和菌体数，制作菌体生长曲线，以此判断酵母菌的生长发酵状况。 关键词：发酵、摇床、酵母菌 一.目的

1.掌握酵母发酵工艺流程及其具体操作方法。 2.了解酵母菌的生长代谢的基本规律。 二．原理

千百年来，人类几乎天天离不开酵母菌，例如酒类的生产，面包的制作，乙醇和甘油的发酵，本实验主要通过对酵母菌发酵过程中一些数值的测定，绘制其生长曲线，来了解酵母菌的生长状况。为获得实验相关数据，需对酵母菌进行培养，首先涂布平板28℃培养48小时后挑取单菌落进行斜面保存，再挑取斜面保存的菌种进行扩大培养，自扩大培养起，每三个小时取一次样，在OD505下测吸光度，在显微镜下

细菌培养实验报告

篇一：培养基的制备与灭菌实验报告

陕西师范大学远程教育学院

生物学实验报告

报告题目培养基的制备与灭菌

姓 名 刘 伟

学 号

专 业 生 物 科 学

批次/层次

指导教师

学习中心培养基的制备与灭菌

一、目的要求

1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

2. 掌握培养基的配置原则和方法。

3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。

二、基本原理

牛肉膏蛋白胨培养基：

是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌：

主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。

三、实验材料

1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。

2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三

角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。

3. 其他物品：药匙、称量纸、ph试纸、记号

发酵工程综合实验报告

实验题目 蛋白酶的发酵工艺研究

学生姓名 杨益坤

学 号2012214114

专业班级 生物技术12-1班 院系名称 生物与食品工程学院 指导教师 杨 柳

学院：生物与食品工程学院

2015年 7月 31日

目录

标题 ................................................................................................................ 错误！未定义书签。 摘要 ................................................................................................................ 错误！未定义书签。 关键词 ...............................................................................................................

微生实验报告

姓名：王晶晖

专业年级：2011级生物技术 学号：040312011032

实验三 细菌的芽孢染色

一、实验目的

学习细菌芽孢的染色方法原理及操作步骤。 二、实验原理

芽孢是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，通常呈球形或椭圆形。细菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低不易着色，若用一般的染色法只能使菌体着色而芽孢不着色（芽孢呈无色透明状）。芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色但一旦染上色后有难以脱色这一特点而设计的。所有的芽孢染色法都基于同一个原则，除了用着色力强的染料外，还需加热，以促进芽孢染色。当染芽孢时，菌体也会着色，然后水洗，芽孢染上的颜色难以渗出，而菌体会脱色，然后用对比度强的染料对菌体复染，使菌体和芽孢呈现出不同的颜色，因而能更明显地衬托出芽孢，容易辨认。 三、实验器材

1、菌种：培养24~36h的苏云金芽孢杆菌或者枯草芽孢杆菌。 2、染色剂和试剂：5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液。

3、器材：小试管，滴管，玻片搁架，接种环，擦镜纸，镊子，显微镜等。 四、实验方法

1、涂片：按常规方法将待检细菌制成一薄的涂片。

2、晾干固定：待涂片晾干后在酒精灯火上通过2~3次。 3、染色：

（1）加染色液：加5%孔雀绿水

生物技术大实验

实 验 报 告 集

班级 生物技术1212 学号 1220212206 姓名 宋扬 使用时间 2015.12.14 至 2015.12.19 组别 一

苏 州 科 技 学 院 化 学 与 生 物 工 程 学 院

苏州科技学院化生学院学生实验报告 生物技术大实验 发酵工程工艺控制

实验室学生守则

一、严格遵守实验室各项规章制度和管理措施，服从教师及实验技术人员

的指导。

二、严格按照实验要求，做好实验预习,实验之前5分钟进入实验室，及时、

准确地完成实验任务，实事求是地完成实验报告，杜绝弄虚作假。 三、严格执行操作规定，爱护仪器设备及工具。凡不按教师的指导擅自操

作引起仪器、设备损坏者，应予赔偿。

四、爱护实验室公共财物，节约水电、材料和试剂。未经允许不得随便挪

动非实验需用的其他仪器，不得随便拆装仪器或将仪器、工具带至室 外。

五、持实验室的严肃安静，不得大声喧哗、嘻闹，严禁在实验室内抽烟和

吃东西。

六、严防事故，确保实验室安全，发现异常情况，应及时

细菌发酵L乳酸的研究

南开大学硕士学位论文细菌发酵L-乳酸的研究

姓名：徐子钧申请学位级别：硕士专业：微生物学指导教师：刘如林

20030601

细菌发酵L乳酸的研究

细菌发酵Ｌ（＋）一乳酸的研究

摘婪

摘要

从自然界筛选到一株产高光学纯度Ｌ（＋）｛Ｌ酸产生菌ｓ３，经初步鉴定为乳杆菌属。经过复合诱变（Ｕ．Ｖ、ＮＴＧ、ＬｉＣｌ和ＤＥＳ），并根据对其代谢途径的分析和代谢调控理论筛选诱变菌株，最后成功地得到Ｍ７菌株，其Ｌ（＋）．乳酸产量提

高了３０％。经营养缺陷型类型鉴定，ｓ３为氨基酸和核酸碱基双缺型，Ｍ７为氨

基酸缺陷型。

利用数据统计软件ＳＡＳ系统（ＳｔａｔｉｓｔｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓＳｙｓｔｅｍ），采用较先进的试

验设计方法二水平设计中的ＰｌａｃｋｅＲ—Ｂｕｒｍａｎ设计以及响应面分析法中的

Ｂｏｘ—Ｂｅｈｎｋｅｎ设计优化培养基，使Ｌ（＋）哥Ｌ酸产量提高ｌ５％。在优化条件下，７２ｈｒ可产Ｌ（＋）．乳酸９２～１＿ｏｏｇ／Ｌ，初步建立了动力学数学模型。

选定大孔吸附弱碱性阴离子树脂Ｄ３０１Ｇ从发酵液中提取乳酸，进而对原位分离发酵生产Ｌ（＋）．乳酸进行了初步探讨。为了解决原位分离中菌体流失的问题，对固定化细胞发酵作了初步研究。

关键词：乳酸菌，Ｌ（＋）一乳酸，复合诱变，Ｐｌａｃ

实验二、黑曲霉发酵生产纤维素酶大实验

一、实验目的

1、了解纤维素酶的生产工艺和原理 2、掌握液体发酵和固体发酵工艺

3、学会DNS法测定还原糖含量的方法和原理 二、实验原理

纤维素酶可以用于一切含纤维素的生物质的降解，具有广阔的应用前景。高产纤维素酶的微生物主要有木霉属、曲霉属、根霉属，黑曲霉所产的纤维素酶中β-葡萄糖苷酶活力高，能避免酶解产物纤维二糖的阻遏作用，而且安全无毒，故而成为生产纤维素酶的主要菌种之一。纤维素酶是诱导酶，故发酵生产时需有纤维素物质作诱导剂。

以羧甲基纤维素钠作底物，用发酵所得纤维素酶对底物进行酶解，测定酶解液中的还原糖含量（以葡萄糖计），可以计算酶活力高低。还原糖与DNS反应形成棕色物质，颜色深浅与糖含量成正比。 三、材料与试剂配制

1、生产菌种：黑曲霉

2、斜面（活化）培养基：酵母膏0.4%，蛋白胨0.6%，可溶性淀粉1%，葡萄糖0.9%，马玲薯浸出液7%，琼脂2%，陈海水（或人工海水）配制，pH7.0-7.4。

3、人工海水：NaCl = 24 g/L ;MgSO4·7H2 O = 7.0 g/L ;NH4NO3 = 1 g/L ;KCl = 0.7 g/ L ; NaH2PO4 = 2.0 g/ L ;N

实验一：琼脂糖凝胶电泳对DNA提取

实验目的：学习使用水平式琼脂糖凝胶电泳进行DNA的提取。

实验原理：琼脂糖凝胶电泳是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。根据DNA分子量不同，采用外加电场使其分开，用生物染料嵌入DNA分子后在紫外下显色。

1）在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下，带负电的核酸分子向正极迁移。由于糖——磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。

2）在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即DNA分子本身的大小和构型。具有不同的相对分子质量和不同构型的DNA片段泳动速度不一样，可进行分离。

3）生物染料在紫外光照射下能发射荧光，当DNA样品在琼脂糖凝胶中从负极向正极泳动时，生物染料从正极向负极移动，就会嵌入DNA分子中形成络合物，使DNA在紫外光下发射很强的荧光。在生物染料足够的情况下，荧光的强度正比于DNA的含量，这样就可以检测DNA的浓度。

实验材料：微量移液器(2μl和4μl)，高压灭菌锅，电泳仪，琼脂糖平板电泳装置，微波炉等。TAE电泳缓冲液，琼脂糖凝胶，PCR 扩增样品

生物工程082

纳他霉素的发酵生产、分离纯化及检测

（广州大学 生物工程系，广州510006 ）

摘要：本实验利用褐黄孢链霉菌斜面菌种，先取约5个接种环的斜面菌种无菌接种到2瓶种子液体培养基中培养24小时，再分别在无菌条件下用移液枪吸取1mL种子培养基转接到6瓶发酵培养基，摇瓶发酵48小时后，连续3天吸取菌液进行镜检，菌液OD值测定，并利用500μg/mL的纳他霉素按照0mL,0.2mL,0.4mL,0.6mL,0.8mL,1.0mL加入量制定标准曲线；摇瓶发酵5天后，合并发酵液，离心获得菌泥，采用2倍菌泥体积的95%酒精，pH值在10~10.5搅拌溶解纳他霉素；离心保留上清液，上清液在Ph值在6.5，冰箱静置3h，纳他霉素在等电点析出；离心，保留产物；产物在55℃真空干燥2h，称重获得0.08g的纳他霉素。

关键词：褐黄孢链霉菌；种子培养基；发酵培养基；等电点溶解；真空干燥

引言：纳他霉素是一种多烯烃大环内酯类抗真菌剂， 其分子是一种具有活性的环状四烯化合物，含3个以上的结晶水，其外观白色（或奶油色），为无色、无味的结晶粉末，分子式C33H47NO13，分子量为665.73。微溶于水、甲醇，溶于稀酸、冰醋酸及二甲苯甲酰胺，难溶于大

测定细菌生长曲线

一、 实验目的

1． 了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时； 2． 学习液体培养基的配制以及接种方法； 3． 反复练习无菌操作技术；

4． 了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同； 5． 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法；

二、 实验原理

将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。

测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。