常用溶液的配置实验原理

试剂配制

（1）液体LB培养基（-） 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠

去离子水溶解并定容至 高压灭菌，4℃保存。

（2）氨苄青霉素溶液（100mg/ml） 氨苄青霉素

去离子水溶解并定容至 过滤除菌，-20℃分装保存。 （3）卡那霉素溶液（100mg/ml） 卡那霉素

去离子水溶解并定容至 过滤除菌，-20℃分装保存。 （4）固体LB培养基（-） 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 琼脂糖粉

去离子水溶解并定容至 （5）含抗生素 LB 固体培养基 固体LB培养基溶液

10ml 1g 10ml 10ml 1g 10ml 1000ml 10g 5g 10g 15g 1000ml 1000ml 1000ml 1000ml 10g 5g 10g 1000ml

高压灭菌后铺平板（6cm培养皿），冷却后4℃保存。

高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为 100μg/ml的氨苄青霉素或 100μg/ml 卡那霉素，并铺平板（6cm培养皿），冷却后， 4℃保存。

（6）0.1M CaCl2溶液—制备感受态 氯化钙

去离子水溶解，定容至 高压灭菌后4℃保存。

（7）0.1M MgCl2溶液---制备感受态 氯化镁

去离子水溶解，定容至 高压灭菌后4℃

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常用缓冲溶液的配制方法

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1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升

邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

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Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，

再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

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柠檬酸C6H8O7·H

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常用缓冲溶液的配制方法

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1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升

邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

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Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，

再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

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柠檬酸C6H8O7·H

实验室常用溶液的配制

1．30%丙烯酰胺溶液（100ml） 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。 2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L） 【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足 至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温

生物实验常用溶液的配制

一、DNA电泳相关：

1、DNA电泳缓冲液：

（1）Tris-乙酸（TAE）缓冲液：TAE较为常用，且价格低，但其缓冲能力较弱。所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环，而且TAE需要经常更新；且要加入EDTA，目的在于鳌合二价离子，抑制DNase，以保护DNA。

① TAE使用液：

1×：40mmol/L Tris-乙酸 1mmol/L EDTA ② TAE贮存液（每L）： 50×：242g Tris碱 57.1ml 冰乙酸

100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（2）Tris-硼酸（TBE）缓冲液：

① TBE使用液：

0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸 1mmol/L EDTA ② TBE贮存液（每L）： 5×： 54g Tris碱 27.5ml 硼酸

20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（3）Tris-磷酸（TPE）缓冲液：

① TPE使用液：

1×：90mmol/L Tris-磷酸 2mmol/L EDTA ② TPE贮

蛋白质常用buffer

实验室常用溶液配方

PBS(1×)(1L) 8.0g NaCl

0.2g KCl

1.44g Na2HPO4

(3.6283g Na2HPO4.12H2O

2.716g Na2HPO4.7H2O)

0.24g KH2PO4

80ml H2O

调至pH 7.4, add Milli-Q to 1L

Running Buffer(1×)(1L)

3g Tris

14.4g Gly

1g SDS

Add ddH2O to 1L

Transfer Buffer(1×)(1L)

5,8g Tris

2.9g Gly

0.37 SDS

200ml Methanol

Add ddH2O to 1L

TBE (5×)(1L)

54g Tris

27.5g Boric acid

20ml 0.5M EDTA (pH 8.0)

Add ddH2O to 1L

NP40 Lysis Buffer

5ml 3M NaCl

2.5ml 1M Tris-HCl (pH 6.8)

2.5ml 1M Tris-HCl (pH 8.0)

1ml NP40

Add ddH2O

实验室常用溶液及试剂配制

实验室常用溶液、试剂的配制 表一 普通酸碱溶液的配制

名 称 （分子式） 比重 （d） ） ） 盐 酸 （HcL） 硝 酸 （HNO3） 硫 酸 （H2SO4） 冰醋酸 （Hac） 磷 酸 （H3PO4） 氨水（NH3·H2O） 氢氧化钠（NaOH） 氢氧化钾（KOH） 9） 表二 常用酸碱指示剂

指示剂 In 百里酚蓝 （麝香草酚蓝） 甲基橙 3.4 3.1～4.4 红 黄 溴甲酚绿 4.9 3.8～5.4 黄 蓝 0.1%的20%乙醇溶液或0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml 橙0.05%水溶液 1.65 PKHpH 12.～2.8 变色范围色 红 酸色 黄 0.1%的20%乙醇溶液 碱配 制 方 法 0.90～0.91 0） （330） （240） （173） （12） （11.5） （80） （56（4028 15 400 200 134 77 1.69 85 15 39 19 12 6 1.05 99.9 17 253 177 118 59 1.83～1.84 95～98 18 84 42 28 14 1.39～1.40 65～6

标准溶液的配制

⒈ 0.1mol／LHcl:量取分析纯盐酸配(相对密度1.19)9ml；以水稀释至1L ⒉ 1mol／L Hcl:量取分析纯盐酸配（相对密度1.19)90ml；以水稀释至1L ⒊ 0.1mol／LNaOH:称取分析纯4g氢氧化钠溶于水；稀释到1L

⒋ 0.1mol／L AgNO3:取分析纯硝酸银于120℃干燥2h；在干燥器内冷却，准确称取17g，溶于水；在容量瓶中稀释至1000ml；储于棕色瓶中

⒌ 0.05mol／LEDTA：称取分析纯乙二胺四乙酸二钠20g；以水加热溶解后，冷却；稀释至1L

⒍ 0.1mol／L碘溶液：称取分析纯碘26g及碘化钾80g溶于最少量水中；待溶解完全后稀释至1L。储于棕色瓶中备用

⒎ 0.1mol／L硫代硫酸钠溶液：称取硫代硫酸钠（分析纯）25g溶于水中；加入碳酸钠0.1g；稀释至1L

⒏ 0.05mol／L硫酸亚铁铵：称取硫酸亚铁铵20g，溶于冷的5％硫酸500ml；溶解完毕后，以5％的硫酸稀释至1L

⒐ 0.1mol／L重铬酸钾标准液：取分析纯重铬酸钾于150℃干燥1h；在干燥器内冷却；准确称取29.421g溶解于水，在容量瓶中稀释至1000ml，并加入30g硫酸汞

⒑ 25％硫代硫酸钠：称

实验室常用溶液及试剂配制

一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1

表一 普通酸碱溶液的配制 表二 常用酸碱指示剂配制 表三 混合酸碱指示剂配制

表四 容量分析基准物质的干燥 表五 缓冲溶液的配制

1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液

2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液

5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 8、 常用缓冲溶液的配制

二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4

1、硝酸银（CAgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（CI2=0.1mol/L）标准溶液的配制

3、硫代硫酸钠（CNa2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（CHClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（

实验一 常用网络命令的使用与TCP/IP协议配置（3学时）

一、实验目的：

1. 了解各种查看网络参数的方法；

2. 认识 IE 的功能与一般使用方法，理解 IE 各项参数的意义并会合理设

置； 3. 了解ping命令各项参数的含义，掌握 ping命令的使用方法，了解ping

命令的工作原理。 4. 掌握Tracert命令的使用方法，掌握pathping命令的使用方法，了解Tracert

和pathping命令的工作原理。 5. 了解ARP命令的主要功能，掌握ARP命令的使用方法，了解ARP命令

的工作原理。 6. 掌握netstat网络命令的使用方法，了解netstat网络命令的工作原理。

二、实验设备：

1. 计算机，网卡 2. 交换机（或集线器） 3. 网线 4. 路由器 5. 网络

三、实验内容及实验步骤：

（一）网络参数的查看(以windows XP为例)

1. 方法一

(1) 在桌面上右击―网上邻居‖，从快捷菜单中选择―属性‖，如图 1.1 所

示；

图1.1 点击网上邻居查看网络属性

(2) 从打开的窗口中右击―本地连接‖，从快捷菜单中选择―属性‖，打开如

图 1.2 所示的对话框；

图1.2 本地连接 属性

在―本地连接 属