配制培养基抗生素

常用培养基及抗生素配置 1310466559 来源：生物秀知道 浏览次数：1592 网友评论 0 条 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 10g 5g 10g 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 1 mol/L 氯化钾 20g 5g 0.5g 2.5ml 用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。 SOC培养基 成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。 TB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 酵母提取物 甘油 12g 24g 4ml 各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 m

以160万IU青霉素和80万IU链霉素配制抗生素母液,制备终浓度分别为160IU／mL、480IU／mL、800IU／mL、1140IU／mL、1440IU／mL抗生素平板培养基接种高羊肚菌菌株MH1,观察菌落和菌丝生长势,结果显示：终浓度为1140IU／mL的抗生素平板培养基对高羊肚菌菌丝生长影响较小,能较好的抑制细菌生长,对分离野生高羊肚菌菌种提供了参考依据。

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抗生素培养基对高羊肚菌菌丝生长的影响侯军张春梦林晓民张华黄江东李荣荣 (南科技大学林学院，南洛阳 4 10 )河河 7 0 3

摘

要以 10万 I 6 u青霉素和 8 0万 I U链霉素配制抗生素母

灭菌冷却至 6℃无菌条件下分别加入 1mL 3 mL、、 0 、 5 mL

液，制备终浓度分别为】0I/ L、8/ L、0 /、 4 6 埘 4 0Ⅱ) U埘 8 0I mL】10 U I/ 14 0 I/ L抗生素平板培养基接种高羊肚菌菌株 UmL、 4 U m MH1观察菌落和菌丝生长势，果显示：浓度为 110I/ ,结终 4 mL U的抗生素平板培养基对高羊肚菌菌丝生长影响较小，较好的能抑制细菌生长，分离野生高羊肚菌菌种提供了参考依据。对 关键词抗细菌生

常用培养基的配制

（一）营养琼脂培养基

【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。

【成分】牛肉膏 3g

NaCl 5g 蛋白胨 10g 琼 脂 20g

【pH值】7.2±0.2

【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml，经121.3℃ 30min高压灭菌备用。 （二）蛋白胨水培养基

【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g

氯化钠 5g

【pH值】7.6 【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，过滤，分装于试管，每管2～3ml，经121.3℃ 20min高压灭菌备用。

（三）半固体培养基

【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。 【成分】蛋白胨 10g

氯化钠 5g 琼脂 2.5～3g

【pH值】7.6

【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中，加热溶解，分装于试管，每管3～4ml，经 121.3℃ 20min高压灭菌备用。

（四）营养肉汤培养基

【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等，也可用于消毒效果的测定。 【成

2018淮北市人民医院抗菌药物临床应用考试(二)

科室 姓名 得分

1、主治医师临床应用中一般情况下，可以选用的抗菌药物有（ ） A、特殊使用级和限制使用级 B、非限制使用级和限制使用级 C、非限制使用级和特殊使用级 D、三种级别可任意选用

2、根据抗菌药物临床应用指导原则，医疗机构抗菌药物使用强度力争控制在（ ）DDD以下。 A、20 B、30 C、40 D、50

3、急性胆道感染时临床上最常选用（ ） A、第 1、2 代头孢菌素或喹诺酮类 B、第 3 代头孢菌素或四环素类 C、第 1、2 代头孢菌素或氨基糖甙类 D、第 3 代头孢菌素或广谱青霉素

4、最有效的杀阿米巴包囊的药物是（ ） A、 双碘喹啉 B、 二氯尼特 C、 氯喹 D、 吐根碱 5、最常见的致病曲霉是（ ）

A、 黑曲霉 B、 黄曲霉 C、 烟曲霉 D、 土曲霉 6、在头孢菌素中，抗阳性菌活性最强的是( )。

A、第一代头孢菌素 B、第二代头孢菌素 C、第三代头孢菌素 D、第四代头孢菌素

7、大环内酯类抗生素可抑制（ ）的正常代谢。 A、茶碱 B、胰岛素 C、血钠 D、血钾 8、对于（ ），红

2018淮北市人民医院抗菌药物临床应用考试(二)

科室 姓名 得分

1、主治医师临床应用中一般情况下，可以选用的抗菌药物有（ ） A、特殊使用级和限制使用级 B、非限制使用级和限制使用级 C、非限制使用级和特殊使用级 D、三种级别可任意选用

2、根据抗菌药物临床应用指导原则，医疗机构抗菌药物使用强度力争控制在（ ）DDD以下。 A、20 B、30 C、40 D、50

3、急性胆道感染时临床上最常选用（ ） A、第 1、2 代头孢菌素或喹诺酮类 B、第 3 代头孢菌素或四环素类 C、第 1、2 代头孢菌素或氨基糖甙类 D、第 3 代头孢菌素或广谱青霉素

4、最有效的杀阿米巴包囊的药物是（ ） A、 双碘喹啉 B、 二氯尼特 C、 氯喹 D、 吐根碱 5、最常见的致病曲霉是（ ）

A、 黑曲霉 B、 黄曲霉 C、 烟曲霉 D、 土曲霉 6、在头孢菌素中，抗阳性菌活性最强的是( )。

A、第一代头孢菌素 B、第二代头孢菌素 C、第三代头孢菌素 D、第四代头孢菌素

7、大环内酯类抗生素可抑制（ ）的正常代谢。 A、茶碱 B、胰岛素 C、血钠 D、血钾 8、对于（ ），红

培养基的配制及灭菌

一． 实验目的

1. 三角瓶，培养皿，试剂瓶，试管，枪尖盒等仪器的清洗。

2. 三角瓶棉塞的制作，三角瓶，吸管，培养皿，试剂瓶，试管，枪尖盒的包装与灭菌。

3. 高温蒸汽灭菌原理的学习。

4. LB和MacConkey培养基的制作与灭菌。

二． 实验原理

1. 高温灭菌的原理：

由于培养基配置过程中并非是无菌操作，所以要通过立即灭菌来防止配制过程中混入的杂菌利用培养基中的营养物质进行繁殖从而破坏培养基的性能。

高压蒸汽灭菌是生物试验应用最广，效果最好的一种湿热灭菌法。在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

注意：①使用高压蒸汽灭菌前一定要完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。否则在同一压力下，锅内实际温度和理想温度就会有差距，不能达到最好灭菌效果。②在使用灭菌锅前切勿忘记加水，水加至与三角搁架相平，以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故。③使用完后要等到压力降为零再打开锅盖，否则会因为锅内外压力不平衡而导致棉塞蹦出造成污染，也容易伤害到操作者。

2. 培养基的配置原

质量技术监督检测检验所

微生物室试剂及培养基配制记录 试剂、培养基名称 双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨 单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨 煌绿乳糖胆盐（BGLB） 乳糖胆盐（双料） 乳糖胆盐（单料） 0.85%生理盐水 BPW 志贺氏菌增菌肉汤 TTB增菌液 SC增菌液 7.5%NaCl肉汤 平板计数琼脂 BP琼脂 MAC琼脂 BS琼脂 XLD琼脂 孟加拉红琼脂 伊红美蓝琼脂 结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA） 1mol/L氢氧化钠 1mol/L盐酸 备注： 类型 液体 液体 液体 液体 液体 液体 液体 液体 液体 液体 液体 固体 固体 固体 固体 固体 固体 固体 固体 液体 液体 试剂称取量 g 加入蒸馏水mL 10 mL× 10 mL× 10 mL× 10 mL× 10 mL× 225 mL× 9 mL× 225 mL× / 225 mL× / 10ml× 10 mL× 225 mL× /

综上所述，现有的饲用抗生素替代品仍存在许多不足，在畜禽促生长和抗菌防病作用上尚不能完全替代抗生素，尤其是单纯使用一种替代品的效果与使用抗生素的效果还有相当差距。今后饲用抗生素替代品的研究除了要大力研究开发新的高效替代品，更应加强对各种替代品联合使用效果的研究，包括几种替代品联合使用可能产生的互作效应的研究。抗生素的替代品研究将是一个漫长的过程，在研究新型抗生素替代品的同时，更要从动物营养、饲料卫生及饲养管理上加强工作，给动物营造良好的生长环境，保证动物的健康生长，减少抗生素的使用。

中 国 每 年生 产 抗 生素原料21万吨，有9.7万吨 抗 生 素用于畜牧养殖业，占年总产量的46.1%。在国际上，早在2006年1月，欧盟就已全面禁止在饲料中使用生长素、抗生素作为饲料生长添加剂。抗生素种类繁多，主要包含氨基糖苷类、β-内酰胺类、大环内酯类、酰胺醇类、四环素类、林可酰胺类、抗真菌抗生素、抗肿瘤抗生素、具有免疫抑制作用的抗生素、多磷类抗生素等。对抗生素残留的检测需要根据其不同的性质和特点选用不同的检测手段和方法。目前对抗生素残留的检测主要分为三大块，分别为：微生物检测、试剂盒检测和仪器检测。

饲用抗生素的不当使用!尤其是抗生素促长剂的滥用!导致动

BG11培养基配方 成分

浓度(mg/l) 母液配制 Con. (g/l) 每升水取母液体积(ml/l) 物质称重(g) 定容(ml)

NaNO 3 1500 150 10 15 100 K 2HPO 4﹒3H 20 40 40 1 4 MgSO 4﹒7H 20 75 75 1 7.5 CaCl 2﹒2H 20 36 36 1 3.6 柠檬酸铁铵 6 6 1 0.6 柠檬酸 EDTA 1 1 1 0.1 Na 2CO 3 20 20 1 2 A5+Co

1

注：A5+Co 母液为H 3BO 3 2.86g/l ；MnCl 2﹒4H 20 1.81g/l ；ZnSO 4﹒7H 20 0.222g/l ；CuSO 4﹒5H 20 0.079g/l ；NaMoO 4﹒2H 20 0.390g/l ；Co(NO 3)2﹒6H 20 0.0494g/l

附件1

浙江省抗菌药物临床应用分级管理目录

(2015版)

分 类 非限制使用级 青霉素 青霉素V 普通青霉素类 苄星青霉素 普鲁卡因青霉素 阿莫西林 广谱青霉素类 氨苄西林 哌拉西林 阿洛西林 抗铜绿假单胞菌青霉素 对酶稳定的青霉素类 （4） 青霉素类复方制剂（β-内酰苯唑西林 氯唑西林 阿莫西林/克拉维酸 美西林 替莫西林 仑氨西林 美洛西林 磺苄西林 替卡西林 羧苄西林 阿帕西林 呋苄西林 氟氯西林 双氯西林 限制使用级 特殊使用级 哌拉西林/他唑巴坦哌拉西林/他唑巴坦（8:1复方配制） （非8:1复方配制） 胺酶抑制剂） 阿莫西林/双氯西林 哌拉西林/舒巴坦 氨苄西林/舒巴坦 阿莫西林/氟氯西林 替卡西林/克拉维酸 舒他西林 头孢丙烯 头孢替安 头孢他啶 头孢唑肟 头孢哌酮 头孢地嗪 头孢甲肟 头孢匹胺 头孢克肟 头孢地尼 头孢泊肟酯 氨苄西林/氯唑西林 阿莫西林/舒巴坦 美洛西林/舒巴坦 β-内酰胺酶 抑制剂 头孢氨苄 头孢唑林 第一代头孢菌素类 头孢拉定 头孢羟氨苄 头孢呋辛（酯） 第二代头孢菌素类 头孢克洛 头孢曲松 头孢噻肟 第三、四