透析袋的处理方法及注意事项

生 物 化 学 实 验 指 导

第一部分 常用生物化学实验技术及原理

第一章 透 析(Dialysis)

透析是利用小分子能通过,而大分子不能通过半透膜的原理把它们分开的一种重要手段。通常的做法是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋里并沉没在大量的水中。袋内的小分子就不断通过膜进入外部溶剂中待达到平衡为止。如果对流水透析或不断更换透析袋的溶剂可以做到袋内的混合物几乎不含小分子。透析的速度受一些因素的影响。下面就粗略地讨论这些因素。 一、膜

1、材料 火棉胶是最常用的透析袋材料。各种规格的火棉胶袋已做成商品出售。也可用玻璃纸代替火棉胶。

2、制备 先将一适当大小和长度的透析管放在碱性EDTA溶液中沸腾30分钟以避免待透析的分子损失活性。然后，用蒸馏水洗涤透析管。结扎管的一端并将所研究的材料充满透析管（袋），然后结扎顶部。透析最好在新制备的管中进行，因为湿的透析袋非常容易受微生物感染。如果必须保存透析袋，则应有溶液中加入痕量的苯甲酸。

3、通透性 透析袋的通透性因袋的大小和预处理的方法不同而异。但透析过夜时，半透膜大体可以允许相对分子质量（Mr）30000以下的化合物通过。实际上没有严格的界限，透析时间延长时稍大的分子也透过膜

生 物 化 学 实 验 指 导

第一部分 常用生物化学实验技术及原理

第一章 透 析(Dialysis)

透析是利用小分子能通过,而大分子不能通过半透膜的原理把它们分开的一种重要手段。通常的做法是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋里并沉没在大量的水中。袋内的小分子就不断通过膜进入外部溶剂中待达到平衡为止。如果对流水透析或不断更换透析袋的溶剂可以做到袋内的混合物几乎不含小分子。透析的速度受一些因素的影响。下面就粗略地讨论这些因素。 一、膜

1、材料 火棉胶是最常用的透析袋材料。各种规格的火棉胶袋已做成商品出售。也可用玻璃纸代替火棉胶。

2、制备 先将一适当大小和长度的透析管放在碱性EDTA溶液中沸腾30分钟以避免待透析的分子损失活性。然后，用蒸馏水洗涤透析管。结扎管的一端并将所研究的材料充满透析管（袋），然后结扎顶部。透析最好在新制备的管中进行，因为湿的透析袋非常容易受微生物感染。如果必须保存透析袋，则应有溶液中加入痕量的苯甲酸。

3、通透性 透析袋的通透性因袋的大小和预处理的方法不同而异。但透析过夜时，半透膜大体可以允许相对分子质量（Mr）30000以下的化合物通过。实际上没有严格的界限，透析时间延长时稍大的分子也透过膜

电脑使用维护小常识

为了在您日常使用电脑的过程中让您的爱机能够更好地为您服务, 请留意做到如下几点:

新组装/修理好的电脑,请不要急于不常用的各类应用软件,以便出现问题时检测故障出处，建议：电脑稳定运行壹周左右之后，再随意安装其它软件。 ? 正确配置优质的电源接线板，避免在此电源接线板上同时接入其它大功率的电器减，尽量做到电脑“专用”，这样可减弱因电流电压不稳定时对主要部件造成的伤害，从而延长整机的使用寿命。

? 电脑摆放要正确：避免阳光直射，远离火炉、空调等大功率设备，显示器一米内杜绝磁性物体（如：磁铁），环境越好，电脑运行越稳定。冬季室内温度不宜过低,否则易因机箱过冷造成无法开机的现象。

? 防止灰尘危害：灰尘长期积累会产生静电，损坏电脑和影响内部散热，易导致死机和运行速度慢不稳定。

? 如遇强雷雨天气时，最稳妥的方式是：拔下电源接线板的总插头，以避免雷击或引发火灾。

? 注意防潮：比较潮湿的地区，如长时间不用，会导致电脑受潮，引起电性能故障最好每月至少开机两次，并且正常运行十分钟以上。 ?

? ? ?

应用类

请勿随便阅读陌生人的邮件,勿打开或下载附件,建议直接删除。浏览他人使用过的U盘、光盘、移动硬盘等设备前请先对之进行全面查毒杀

第一节 概述

由于电子束的穿透能力比较低（散射能力强），因此用于TEM分析的样品厚度要非常薄，根据样品的原子序数大小不同，一般在5～500nm之间。要制备这样薄的样品必须通过一些特殊的方法。

第二节 复型技术

衬度：眼睛能观察到的或者其它媒介能记录到的光强度或感光度的差异； ? 质厚衬度就是样品中不同部位由于原子序数不同或者密度不同、样品厚度不同，入射电子被散射后能通过物镜光阑参与成像的电子数量不同，从而在图像上体现出的强度的差别。

?

2.1 影响质厚衬度的因素：

与原子序数的关系：物质的原子序数越大，散射电子的能力越强，在明场像（物镜光阑只允许散射角小的电子通过）中参与成像的电子越少，图像上相应位置越暗。

? 与试样厚度的关系：设试样上相邻两点的物质种类和结构完全相同，只是电子穿越的厚度不同，则在明场像中，暗的部位对应的试样厚，亮的部位对应的试样薄。

? 与物质密度的关系：试样中不同的物质或者不同的聚集状态，其密度一般不同，也可形成图像的反差，但这种反差一般比较弱。

?

2.2 复型技术

复型就是表面形貌的复制（其原理与侦破案件时用的石膏复制罪犯鞋底花纹相似）。通过复型制备出来的样品是真实样品表面形貌组织结构细节的薄

电脑使用维护小常识

为了在您日常使用电脑的过程中让您的爱机能够更好地为您服务, 请留意做到如下几点:

新组装/修理好的电脑,请不要急于不常用的各类应用软件,以便出现问题时检测故障出处，建议：电脑稳定运行壹周左右之后，再随意安装其它软件。 ? 正确配置优质的电源接线板，避免在此电源接线板上同时接入其它大功率的电器减，尽量做到电脑“专用”，这样可减弱因电流电压不稳定时对主要部件造成的伤害，从而延长整机的使用寿命。

? 电脑摆放要正确：避免阳光直射，远离火炉、空调等大功率设备，显示器一米内杜绝磁性物体（如：磁铁），环境越好，电脑运行越稳定。冬季室内温度不宜过低,否则易因机箱过冷造成无法开机的现象。

? 防止灰尘危害：灰尘长期积累会产生静电，损坏电脑和影响内部散热，易导致死机和运行速度慢不稳定。

? 如遇强雷雨天气时，最稳妥的方式是：拔下电源接线板的总插头，以避免雷击或引发火灾。

? 注意防潮：比较潮湿的地区，如长时间不用，会导致电脑受潮，引起电性能故障最好每月至少开机两次，并且正常运行十分钟以上。 ?

? ? ?

应用类

请勿随便阅读陌生人的邮件,勿打开或下载附件,建议直接删除。浏览他人使用过的U盘、光盘、移动硬盘等设备前请先对之进行全面查毒杀

D S C的操作方法及注意

事项

Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT

DSC的操作方法及注意事项

一、样品制备

制样：取3-10mg样品，将样品剪成尺寸较小的块状或其他形状，备用。打开工具盒，用镊子取一个坩埚（切记不要用手触摸），用天平称量坩埚的质量，清除坩埚质量（清零）后取出。再将样品放入坩埚中，再次称量，记录样品的质量。将其放在制样器的托盘上，再用镊子取出坩埚盖，顶部置于绿色橡胶垫上，用细针在顶部打一个孔，盖在坩埚上（盖与坩埚要很好吻合），放入DSC制样器制样，压样2次。用镊子夹起DSC样品池的炉盖，将制好的样品用镊子放入左侧样品池的环形区域内（铝锅底部的小点）卡住，用镊子将炉盖盖好。

二、操作步骤

1、首先观察高压表，为0，打开氮气瓶钢瓶开关，使高压表指针大于0；若初始高压表并不为0，钢瓶瓶阀能轻松转动，说明钢瓶开关已打开，若不能轻松转动，需拧开钢瓶开关（朝标记开/Open的方向转动）。后转动低压表的压力调节螺杆，使低压表读数大于（如下图(c)所示）、打开DSC背部主机电源（DSC主机显示灯为红灯闪烁）、调节DSC通N2流量计示数在50mL/min（如下图(d)所示）、打开电脑（密码在主机的标签

血液透析病人日常各项注意事项

患有尿毒症的人，因为肾脏功能的减退或丧失，而无法将自身体内代谢产生的废物、水分排出体外，为了维持人体正常的新陈代谢活动需要，所以我们就要靠血液透析来将尿中毒素、水分排出体外，以减轻症状，提高生活质量。一般每周做血液透析2～3次，每次4～6小时。如能坚持合理透析，不少患者能过较正常的生活，有的存活20年以上,更有甚者如果选择了合适的治疗方法慢慢的摆脱了透析。

血透患者在日常生活中需要注意以下几点：

水分摄入过多，易诱发或加重水肿、高血压，甚至心力衰竭，表现为气促、胸闷等。因此，对水分摄入应“量出为入”，透析者应控制每日体重增加不超过0.5～0.8公斤。若口渴，可含小冰块、薄荷糖或嚼口香糖，以促进唾液的分泌。禁用含酒精的饮料以免诱发痛风。而新鲜果汁则含钾量较高，一般软饮料常含一定的钠盐，故建议选用纯水或矿泉水。

为了防止水肿和高血压，患者需要不同程度地限制钠的摄入。大多数透析患者每天钠摄入应限制在4～6克以内，严重的高血压患者更需要严格限制钠的摄入。但长期的低盐饮食会影响患者的食欲，产生疲倦，注意根据患者的饮食习惯，提供多样化及色、香、味俱全的饮食。如果患者饮食中钠得到很好控制，水的摄入也就容易控制。尿毒症时肾排钾能力明显降

ptotocol是这样的，请看哪里不妥： 蛋白银染步骤 步骤 溶液 时间 固定 甲醇 100ml 冰醋酸 25ml

加双蒸水至250ml 30min 冲洗 双蒸水 3次 敏化 甲醇 75ml

戊二醛（25%w/） 1.25ml 硫代硫酸钠(5%w/) 10ml 醋酸钠（17g）

加双蒸水至250ml 30min 冲洗 双蒸水 3次

银反应 硝酸银溶液(2.5%w/) 25ml 甲醛(37%w/) 0.1ml

加双蒸水至250ml 20min 冲洗 双蒸水 2次 显色 碳酸钠(6.25g) 甲醛(37%w/) 0.05ml 加双蒸水至250ml 2-5min

终止 EDTA-Na22H2O(3.65g) 加双蒸水至250ml 10min 冲洗 双蒸水 3次

建议使用silia的方法！！ 简单，快！

本人的银染方法：

1. 固定：100ml MeOH, 24ml H Ac, 56ml 0.04%HCHO, 20ml ddH2O,洗三次，每次>=20分钟； 2. 50％EtOH洗PAGE胶三次，每次20分钟； 3. 预处理：0.02％ Na2S2O3 处理一分钟； 4. 水洗：ddH2O漂洗三次，每次20秒；

5. 染色：0.8ml 20％

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加双蒸水至250ml 30min 冲洗 双蒸水 3次 敏化 甲醇 75ml

戊二醛（25%w/） 1.25ml 硫代硫酸钠(5%w/) 10ml 醋酸钠（17g）

加双蒸水至250ml 30min 冲洗 双蒸水 3次

银反应 硝酸银溶液(2.5%w/) 25ml 甲醛(37%w/) 0.1ml

加双蒸水至250ml 20min 冲洗 双蒸水 2次 显色 碳酸钠(6.25g) 甲醛(37%w/) 0.05ml 加双蒸水至250ml 2-5min

终止 EDTA-Na22H2O(3.65g) 加双蒸水至250ml 10min 冲洗 双蒸水 3次

建议使用silia的方法！！ 简单，快！

本人的银染方法：

1. 固定：100ml MeOH, 24ml H Ac, 56ml 0.04%HCHO, 20ml ddH2O,洗三次，每次>=20分钟； 2. 50％EtOH洗PAGE胶三次，每次20分钟； 3. 预处理：0.02％ Na2S2O3 处理一分钟； 4. 水洗：ddH2O漂洗三次，每次20秒；

5. 染色：0.8ml 20％

柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复法(强烈推荐)

1.适用范围：适合于大量中性福尔马林固定、石蜡包埋组织切片的抗原修复，其效果优于微波修复法和直接煮沸修复法,使得免疫组化结果更加可靠

2.仪器设备：市售不锈钢家用压力锅，大小尺寸可根据需要而定(内径18cm为好)；1000-1500W电炉一台；不锈钢或耐高温塑料切片架。 3.所需试剂：0.01M柠檬酸型缓冲液，pH=6.0±0.1 4.操作步骤：

(1)常规组织切片经二甲苯脱蜡、梯度酒精水化后，浸泡于蒸馏水中待用。 (2)取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液(800-1500ml)于压力锅中，大火加热直至沸腾；将脱蜡水化后的组织切片置于不锈钢或耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中。盖上锅盖，扣上压力阀，继续加热至喷汽，从喷汽开始计时，1-2分钟后，压力锅离开热源，冷却至室温(稍冷后，可在自来水笼头下加速冷却)，取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS(pH=7.2-7.4)冲洗两次，每次3分钟(2×3')。 (3)按有关试剂盒的操作步骤执行。 5.注意事项：

(1)加热时间长短的控制很重要，从组织切片放入缓冲液到高压锅离开火源的总时间控制在5-8分钟为好，时间过长可能会使染色背景加深。 (2)必