细胞色素P450氧化还原酶

细胞色素P450酶诱导模型

摘要

细胞色素氧化酶P450是人体内一类参与内源性和外源性化合物代谢的重要代谢酶，代谢活化许多药物，前致癌物，前毒物，和质变剂。大约有60%的药物主要依赖细胞色素氧化酶P450的代谢作用清除的。

本文主要建立了细胞色素P450酶的诱导模型，有望为研究新药提供参考。

建立化合物对细胞色素P450酶的诱导的模型时，我们选择了利福平,奥美拉挫和苯巴比妥分别作为1A2,3A4和2B6酶的诱导剂。此模型使用肝细胞来建立的，化合物加入到细胞培养液中，通过LC-MS来从测定代谢产物的变化。同时,我们进行了基因水平的检测,在基因水平上我们检测了化合物对细胞的诱导作用.通过此模型，我们可以直接从LC-MS测定的代谢产物的多少来确定未知的化合物是否对细胞色素CYP450是否有诱导作用。由实验得知，利福平,奥美拉挫和苯巴比妥对1A2,3A4和2B6的诱导能力很强，都超过20倍。

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前言

细胞色素P450(cytochrome,CYP450)是一类以还原态与CO结合后在450

细胞色素p450

摘要：细胞色素P450酶是广泛存在于生物界的含亚铁血红素单加氧酶, 参与不同生物中多种重要的生化反应，如甾类激素的合成、脂溶性维生素代谢、药物代谢等. 文章结合近期p450研究综述了细胞色素P450生物分布、结构特点、功能、降解及其部分应用。

关键字：p450 发现 分布 代谢

细胞色素p450是生物界中广泛存在的一种含高铁血红素的蛋白，作为细胞色素p450酶系的末端氧化酶，具有关键作用。其以铁原卟啉为辅基，属于单链b族细胞色素蛋白。因其还原态与CO结合后，在450nm处具有高光吸收峰而得名。由于细胞色素P450 酶在生物体内广泛参与甾类激素的合成、脂溶性维生素代谢、多不饱和脂肪酸转换为生物活性分子, 以及致癌作用和药物代谢，细胞色素p450被各大实验室广泛研究。

1、 P450的发现

细胞色素P450（CYPs）代表着一个很大的可自身氧化的亚铁血红素蛋白家族，属于

单氧酶的一类，因其在450纳米有特异吸收峰而得名 。1958年，这些细胞色素在肝脏细胞微粒体中被发现。这个细胞色素家族的成员在进化路途中（从细菌到人类）的所有生物体中都存在。在原核生物中，CYPs的功能具有可塑性，而真核生物中它们的功能是不同的，哺乳动物CY

细胞色素p450

摘要：细胞色素P450酶是广泛存在于生物界的含亚铁血红素单加氧酶, 参与不同生物中多种重要的生化反应，如甾类激素的合成、脂溶性维生素代谢、药物代谢等. 文章结合近期p450研究综述了细胞色素P450生物分布、结构特点、功能、降解及其部分应用。

关键字：p450 发现 分布 代谢

细胞色素p450是生物界中广泛存在的一种含高铁血红素的蛋白，作为细胞色素p450酶系的末端氧化酶，具有关键作用。其以铁原卟啉为辅基，属于单链b族细胞色素蛋白。因其还原态与CO结合后，在450nm处具有高光吸收峰而得名。由于细胞色素P450 酶在生物体内广泛参与甾类激素的合成、脂溶性维生素代谢、多不饱和脂肪酸转换为生物活性分子, 以及致癌作用和药物代谢，细胞色素p450被各大实验室广泛研究。

1、 P450的发现

细胞色素P450（CYPs）代表着一个很大的可自身氧化的亚铁血红素蛋白家族，属于

单氧酶的一类，因其在450纳米有特异吸收峰而得名 。1958年，这些细胞色素在肝脏细胞微粒体中被发现。这个细胞色素家族的成员在进化路途中（从细菌到人类）的所有生物体中都存在。在原核生物中，CYPs的功能具有可塑性，而真核生物中它们的功能是不同的，哺乳动物CY

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细胞色素P450在肿瘤治疗中的研究进

展

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

【关键词】 细胞色素P450;肿瘤;治疗

细胞色素P450(CYP450)是一组含亚铁血红素蛋白的超家族，因它与一氧化碳的结合物在450 nm附近有特征吸收而得名。它分布于人体内各种组织、器官，参与许多内源性物质的代谢转化以及外源性化合物的活化与降解。肿瘤的发生是一个多基因多阶段发展的复杂过程，不同基因代谢不同的致癌化合物，与不同种族人群不同类型肿瘤的易感性有关〔1〕。近年来对CYP450基因型和表型相关性的研究越来越受到重视，人们企图寻找CYP450基因多态性与肿瘤易感性的关系。从临床合理用药方面来说，人们希望利用基因型来了解个体药物代谢酶的活性，期望在提高药物治疗水平的同时，降低不良反应的发生。

1 CYP450基因多态性与肿瘤易感性

1.1 CYP450基因多态性 目前，科学家已确定了人类57个CYP450基因和33个假基因，共分为18个家族、42个亚家族。现

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已证实CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1、

细胞色素P450亚酶CYP2D6（AMMC）活性荧光定量检测试剂盒产品说明书

（中文版）

主要用途

细胞色素P450亚酶CYP2D6（AMMC）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过AMMC去甲基化酶反应系统中AMMC转化为AMHC后荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品（动物、人体）或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶2D6的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶：CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物（xenobiotics），包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢，即单加氧化作用（monooxygenation）和羟化作用（hydroxylation）。AMMC羟基化酶（AMMC 7-hydroxylase）的活性是细胞色素P450亚酶2D6的诊断标记，其基于AMMC羟基化酶选择性催化细胞色素P450亚酶2D6的活性。人体细胞色素P450亚酶2D6（CYP2D6；EC1.14.14.1），主要表达在肝、肾、胎盘、脑

一、实验目的和要求

掌握体内法测定植物组织中的硝酸还原酶原理和方法，明确诱导酶含义。 二、实验内容和原理

硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，与作物吸收和利用氮肥有关。它催化植物体内的硝酸盐

还原为亚硝酸盐：

--

产生的NO2可以从组织内渗透到外界溶液中，并积累在溶液中，测定NO2含量的增加，即表示该酶活性的大小。

装 NO2含量的测定用磺胺比色法。在酸性溶液中产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺酰

-

订线

胺）反应产生重氮，再与α–萘胺（或萘基乙烯二胺）偶联形成紫红色的偶氮化合物。生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定，利用标准曲线确定溶液中NO2-含量。 三、主要仪器设备

1、实验仪器 分光光度计，真空泵，温箱，天平，2个烧杯，移液管若干，试管3支，剪刀。 2、实验试剂 0.1mol/L pH7.5的磷酸缓冲液，对-氨基苯磺酸溶液，α-萘胺溶液，亚硝酸钠标准液

3、实验材料 在15-25℃ 蒸馏水培养一周的大麦苗两组，一组加KNO3，一组加NH4Cl，在白天置光照下处理。

四、操作方法和实验步骤

1、剪取新鲜的叶片两组，一组是处理苗0.

世界科学技术—中医药现代化★专题讨论之一：中药资源可持续利用的技术研究

细胞色素Ｐ４５０在人参皂苷生物合成途径中的研究进展＊

□牛云云

罗红梅

黄林芳

陈士林＊＊

北京

100193）

中国医学科学院（药用植物研究所/濒危药材繁育国家工程实验室北京协和医学院

何顺志

摘

（贵阳中医学院药学院贵阳550002）

要：细胞色素P450（CYP450）是一类超基因家族编码的单加氧酶，参与萜类、生物碱和甾醇

类等多种次生代谢产物的合成与代谢。CYP450对人参皂苷三萜碳环骨架进行羟基化和氧化等一系

列复杂修饰作用，是人参皂苷生物合成途径中的关键酶。近年来利用新一代测序技术及生物信息学分析等方法，从CYP450家族中筛选出参与人参皂苷生物合成的相关CYP450s，并对候选基因

进行了生物功能验证，进一步阐明了人参皂苷合成途径。本文对人参皂苷生物合成途径（CYP716A47）

做简要介绍，并对近年来CYP450在人参皂苷生物合成途径中的研究进行综述，为阐明人参皂苷合成

途径及通过基因工程手段合成人参皂苷提供理论依据。

关键词：细胞色素P450氧化酶

人参皂苷

生物合成途径

doi:10.3969/j.issn.1674-3849.2012.01.007

细胞色素P450（CytochromeP45

昆虫学报ActaEntomologicaSinica,March2009,52(3):301-311

ISSN0454-6296

昆虫细胞色素P450基因的多样性、

进化及表达调控

郭亭亭,姜 辉,高希武

1

2

1,*

(1.中国农业大学农学昆虫学系,北京 100193;2.农业部农药检定所,北京 100024)

摘要:细胞色素P450单加氧酶(cytochromeP450monooxygenases,P450s)是由多个功能相关的亚铁血红素-硫醇盐蛋

白基因组成的一个基因超家族,在各种内源和外源物质的代谢中起着主要作用。目前GenBank中注册的昆虫P450基因序列已超过1000个,其中双翅目占序列总数的74%,鳞翅目占序列总数的16%。而昆虫P450基因序列已克隆的全长序列中大部分属于CYP4和CYP6家族,两个家族成员分别占总数的20%和45%。利用GenBank中现已注册的昆虫P450基因的cDNA全长序列进行比对并绘制进化树,揭示不同种类昆虫P450的亲缘关系。结果显示基于P450基因的昆虫部分目的进化关系与大部分先前依据其他分子数据或形态分类学得到的昆虫系统进化关系基本吻合。现有研究表明,细胞色素P450基因的表达可能受顺式作用元件(cis-act

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基于蛋白质组学的细胞色素P450和葡萄糖醛酸转移酶亚型绝对定量分析

作者：邹汉法等

来源：《分析化学》2014年第01期

摘要：利用蛋白质组学方法，将大鼠肝微粒体样品进行胰蛋白酶水解；再利用液相色谱串联质谱法（LCMS/MS），采用多反应监测模式（MRM），通过测定蛋白质水解后产生的特征酶切肽段，实现同时对大鼠肝微粒体内药物代谢酶P450和UGT的绝对定量。本实验首先建立标准工作曲线，对肝微粒体样品中P450和UGT进行定量，在线性范围内，相关系数r>0.995，线性关系良好，定量限≤10 nmol/L；以合成的稳定同位素标记特征肽段作为内标，对UGT1A1进行定量分析。结果表明，同位素标记特征肽段与未标记肽段色谱行为与质谱响应一致，在基质溶液中同位素标记肽段线性关系良好，利用标准曲线法和稳定同位素稀释法测得UGT1A1含量分别为17.30和18.23 nmol/g，两种方法所得结果基本一致，但稳定同位素稀释法操作简便，更适用于复杂样品的高通量测定。

关键词：葡萄糖醛酸转移酶； 多反应监测； 肝微粒体； 细胞色素P450； 气相色谱串联质谱

HMG-CoA还原酶抑制剂的合成(上)

维普资讯 http://www.77cn.com.cn

中国医药工业杂志 C iee o ra o h r c uias 0 4 3 1 hn s un l f ama et l 2 0,5(0 J P c ,,,,,,,,,,,,,j J f

综述与专论；‘‘‘‘‘‘‘‘‘‘‘‘‘ -

H—o MG C A还原酶抑制剂的合成 ( 上)蔡正艳，宁奇，周伟澄∞(上海医药工业研究院，上海 2 0 3 ) 0 4 7

摘要：本文综述了近年来上市的全合成 H MG— A还原酶抑制剂药物的合成方法，主要叙述了含醛基、炔基、磺酰基、 Co 膦酸酯基或氨基官能团的侧链的制备以及这些侧链通过Wii— o r O l— oink O e nu n tgH moS ui K cesi lf a o等反应与芳杂环的缩合。 t￣ Y a i 关键词：HMG— A还原酶抑制剂：合成：综述 Co

中图分类号：R 7 . 92 6

文献标识码：A

文章编号：10—2 5 2 0 ) 00 2—6 0 18 5 (0 4 1—6 10

随着首个 HMG. o C A还原酶抑制剂洛伐他汀 ( v sa n ) 1 att,1的上市，他汀类降血脂药