临床微生物学检验技术

药品微生物学检验技术

第十二章 药品微生物检验方法验证的意及要求

第一节 药品微生物检验结果的影响因素

微生物的生长受很多因素的影响，特别是药品中污染的微生物尤为如此。药品微生物检验是检测药品中具有繁殖能力的活细胞，这些活的微生物在药品中处于不稳定的状态，它的检出与否受很多因素的影响，主要影响因素有如下几点： 一、供试品组分

由于供试品本身的特性，可能含有具有抑菌作用的组分成分，如抗生素中药中的黄莲、牛黄、冰片等。另外，很多供试品中加入的抑菌剂或防腐剂用于防止供试品中的微生物再污染和再生殖，以及增溶剂、乳化剂、抗氧剂等其他辅料，这些组分在一定浓度下对 微生物具有抑制作用，并可能对 药品中污染的微生物造成不同程度的损伤。供试品中污染的微生物在这些物质的影响下有可能检不出，这时，它们虽然被 抑制甚至受到损伤，但并未死亡，在一定条件在塔门还可以稳定地存活一段时间，当微生物生存环境改变时，如抑菌成分消除或浓度降低时，这些微生物便可以复苏并繁殖，患者使用后同样可危及人体健康。对于这些药品，如按常规方法进行微生物检验，往往显示假阴性结果。

除此之外，在药品微生物检验中，由于原料来源不同，特别是中药制剂，或者生产工艺的差别，使用的辅料不同等原因，使不

1．葡萄糖代谢类型鉴别试验（O/F或Hugh－Leifson，HL）

下层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

葡萄糖 0.2克 水 100毫升 1.6%溴甲酚紫(Bromo cresol purple)乙醇溶液0.1-0.2mL

PH=7.6 注意: 调完pH值后再加葡萄糖.

(1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）试验，可用于区别细菌的代谢类型。

(2)方法：挑取少许纯培养物（不要从选择性平板中挑取）接种2支HL培养管中，在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气（作为密封管），另一管不加（作为开放管）。置30℃孵箱孵育48h以上。

(3)结果：两管培养基均不产酸（颜色不变）为产碱型；两管都产酸（变黄）为发酵型；加液体石蜡管不产酸，不加液体石蜡管产酸为氧化型。

(4)应用：主要用于肠杆菌科

《微生物学检验》期末考试题-A

一. 名词解释(每题3分 共24分)

1. 菌落2.病毒3.SPA4.溶源性细菌5.非发酵菌6.菌群失调7.选择性培养基8.MIC 二. 单项选择题 (将答案填入表中相应位置，每题1分,共20分) 1.细菌蛋白质合成的场所是

A．中介体 B.质粒 C.核蛋白体 D.线粒体内膜 E.性菌毛 2.细菌细胞壁特有的化学结构是( )

A脂蛋白 B.胆固醇 C.脂多糖 D.肽聚糖 E.磷壁酸 3.细菌内毒素的化学成分是 C

A. 磷壁酸 B.脂蛋白 C.脂多糖 D.细菌素 E.荚膜多糖 4.在下列病原菌中能够产生自溶酶，胆汁溶菌试验阳性的细菌是 C

A. 淋球菌 B.白喉杆菌 C.肺炎链球菌 D.溶血性链球菌 E.结核杆菌 5.BCG是结核分枝杆菌的变异株，它属于

A. 形态变异 B.菌落变异 C.结构变异 D.毒力变异 E.耐药变异 6.用TCBS平板分离培养病原菌是 A

A. 霍乱弧菌 B.结核杆菌 C.痢疾杆菌 D.嗜盐性弧菌 E.非发酵菌 7.用溴麝香草酚蓝作为指示剂的培养基是

A. 尿素培养基 B.MIU培养基 C.O/F培养基 D.糖发

临床微生物学与检验习题集

本习题集由三部分构成，第一部分为基础题，主要测试学生对每一章节内容的掌握程度；第二部分为综合题，侧重考查学生综合分析问题的能力及对本门课程掌握的程度；第三部分为病例分析题，考查学生利用所学知识解决实际问题的能力。

第一部分基础题

绪论

一、名词解释：

1．微生物(microorganism)

2．微生物学(microbiology)

3．医学微生物学(medical microbiology)

二、选择题

1．下列描述的微生物中，不是所有微生物共同特征的是

A个体微小 B 分布广泛

C 种类繁多

D 只能在活细胞内生长繁殖

E 结构简单

2．不属于原核细胞型微生物的是

A细菌 B 真菌

C 支原体

D 衣原体

E 立克次体

3．属于真核细胞型微生物的是

A螺旋体 B 放线菌

C 真菌

D 细菌

E 立克次体

4．下列那种微生物属于非细胞型微生物

A细菌 B 衣原体

C 支原体

D 病毒

E 立克次体

三、填空题

1．微生物按其细胞结构可分为、、三大类。、、、、、、、八种。

细菌的形态与结构

一、名词解释：

1. 肽聚糖（peptidoglycan）

2. 脂多糖(LPS)

3. 质粒（plasmid）

4. 异染颗粒（metachromatic gramule）

5. 革兰

微生物学试题十二套

微生物学试题（一）

一、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释 1.Gram positive bacteria 2.parasporal crystal 3 ,colony 4, life cycle 5,capsule 6,endospore 二、简答题

1，试述微生物与当代人类实践的重要关系？ 2，简述革兰氏染色的机制？

3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 三、填空(每空1分,共15分)

1.真核微生物核糖体类型为 _______ 。

2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为_____ 。

3.研究细菌遗传、代谢性能常采用 _____ 时期的细胞。4.酵母菌细胞壁的主要成份_____和_______。

5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 ________ 。 6.微生物细胞的主要组成元素是______，_____，_______和_______。 7.食用菌是由 ______和 ____ 组成。

8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称 ______ 。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为______。 10.根瘤菌可与 _________共

1958年某城市炼钢工人不慎大面积烧伤，并造成细菌性感染，经检测为铜绿 假单胞菌(绿脓杆菌)，使用了当时仅有的几种抗生素治疗，未取得明显疗效，后经某医学院分离出此菌，并找到该菌对应的特异性噬菌体，经该噬菌体治疗后取得明显疗效。

思考题：噬菌体治疗后获得明显疗效的相关机制及其此案例给予的启示。

王小姐前段时间嘴角边长了一个小疖，红肿间可见一小脓点，自觉不好看，就对着镜子将小、肿疖挤了。可第二天起来发觉面部红肿，并恶寒、发热、头痛、全身不适，到医院后出现意识模糊，经医生检查，诊断为颅内化脓性感染。

思考题：患者面部疖肿为何导致颅内化脓性感染?

患者，男，72岁。 因反复咳嗽、咳痰20余年，加重5天就诊，临床诊断为慢性支气管炎急性发作。该患者曾用过的抗菌药物主要包括复方新诺明、氨苄西林、左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、头孢氨苄等，痰标本微生物学检查发现肺炎克雷伯菌，药物敏感试验结果显示该病原菌对复方新诺明、氨苄西林、左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、头孢氨苄均为耐药。

思考题：

1．该患者曾用过的抗菌药物分别属于哪些种类?

2．该细菌对这些不同种类抗菌药物形成耐药性的机制是什么?

3．在患者的后续治疗中应当

绪论

选择题

A 型题 （ 只选一个最佳答案 ）

1.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据 C俄国的伊凡诺夫斯基 D 中国的汤飞凡 E 荷兰的列文胡克 1.最早观察到细菌

2.创用固体培养基分离细菌 A 单细胞，结构简单

B 原始核，细胞器不完善 C 二分裂方式繁殖 D 有细胞壁 E 对抗生素敏感 2.属于非细胞型微生物

A 细菌 B 病毒 C 衣原体 D 真菌 E 立克次体 3．第一架观察微生物的显微镜放大的倍数A 200倍 B 266倍 C 500倍 D 366倍 E 1000倍

4．不属于原核细胞型微生物的是 A 螺旋体 B 衣原体 C 支原体 D 真菌 E 放线菌

5．首次使用固体培养基的科学家是 A 琴纳(Edward Jenner) B 巴斯德 (Louis Pasteur) C 伊凡诺夫斯基(Iwanovsky) D 列文胡克(Leewenhoek) E 郭霍(Robert Koch) 6．微生物特点描述哪项错误 A 形体小，结构简单 B

第一章 细菌的形态与结构

1. 患者，男，42岁。三年前右足跟烫伤，伤口不愈，并逐渐向深部软组织发展，有脓性分泌物。半年前，全身发热，右足红肿，到某医院应用青霉素静脉输液20d，创面间断换药，并从中取出一小块死骨，住院2个月后出院，伤口未愈，有脓性分泌物，多家医院治疗效果均欠佳。现以右踝骨骨髓炎收住院治疗。取脓液分别接种于普通血平板和L型培养基，仅L型培养基中有金黄色葡萄球菌生长。 思考题：

（1）细菌L型的形成条件是什么？

当细菌细胞壁的肽聚糖受到理化或生物因素影响被破坏或合成障碍时，在高渗环境中仍可存活的细菌，形成细菌L型。

（2）细菌L型有何特点？

呈高度多形性，大小不一，革兰染色多为阴性；需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长，生长繁殖缓慢，形成荷包蛋样细小菌落；某些L型细菌仍有致病力，常引起慢性感染，如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等。

2．男性，23岁，高烧、咳嗽3天急诊入院。3天前因淋雨后出现寒战，体温高达40℃。咳嗽，咳痰，痰呈铁锈色，WBC18.5×109/L，X线胸片发现右肺中叶有大片阴影。 （1）试问其诊断依据有哪些？

1

诊断依据： 青壮年男性，高烧、咳嗽3天急诊入院；3天前因淋雨后出现寒战，体温高达40℃；咳嗽，咳

第一章 细菌的形态与结构

1. 患者，男，42岁。三年前右足跟烫伤，伤口不愈，并逐渐向深部软组织发展，有脓性分泌物。半年前，全身发热，右足红肿，到某医院应用青霉素静脉输液20d，创面间断换药，并从中取出一小块死骨，住院2个月后出院，伤口未愈，有脓性分泌物，多家医院治疗效果均欠佳。现以右踝骨骨髓炎收住院治疗。取脓液分别接种于普通血平板和L型培养基，仅L型培养基中有金黄色葡萄球菌生长。 思考题：

（1）细菌L型的形成条件是什么？

当细菌细胞壁的肽聚糖受到理化或生物因素影响被破坏或合成障碍时，在高渗环境中仍可存活的细菌，形成细菌L型。

（2）细菌L型有何特点？

呈高度多形性，大小不一，革兰染色多为阴性；需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长，生长繁殖缓慢，形成荷包蛋样细小菌落；某些L型细菌仍有致病力，常引起慢性感染，如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等。

2．男性，23岁，高烧、咳嗽3天急诊入院。3天前因淋雨后出现寒战，体温高达40℃。咳嗽，咳痰，痰呈铁锈色，WBC18.5×109/L，X线胸片发现右肺中叶有大片阴影。 （1）试问其诊断依据有哪些？

1

诊断依据： 青壮年男性，高烧、咳嗽3天急诊入院；3天前因淋雨后出现寒战，体温高达40℃；咳嗽，咳

第一章 细菌的形态与结构

1. 患者，男，42岁。三年前右足跟烫伤，伤口不愈，并逐渐向深部软组织发展，有脓性分泌物。半年前，全身发热，右足红肿，到某医院应用青霉素静脉输液20d，创面间断换药，并从中取出一小块死骨，住院2个月后出院，伤口未愈，有脓性分泌物，多家医院治疗效果均欠佳。现以右踝骨骨髓炎收住院治疗。取脓液分别接种于普通血平板和L型培养基，仅L型培养基中有金黄色葡萄球菌生长。 思考题：

（1）细菌L型的形成条件是什么？

当细菌细胞壁的肽聚糖受到理化或生物因素影响被破坏或合成障碍时，在高渗环境中仍可存活的细菌，形成细菌L型。

（2）细菌L型有何特点？

呈高度多形性，大小不一，革兰染色多为阴性；需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长，生长繁殖缓慢，形成荷包蛋样细小菌落；某些L型细菌仍有致病力，常引起慢性感染，如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等。

2．男性，23岁，高烧、咳嗽3天急诊入院。3天前因淋雨后出现寒战，体温高达40℃。咳嗽，咳痰，痰呈铁锈色，WBC18.5×109/L，X线胸片发现右肺中叶有大片阴影。 （1）试问其诊断依据有哪些？

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诊断依据： 青壮年男性，高烧、咳嗽3天急诊入院；3天前因淋雨后出现寒战，体温高达40℃；咳嗽，咳