总糖和还原糖的测定实验数据

总糖和还原糖的测定

──3,5－二硝基水杨酸法

目的要求：

掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。

实验原理:

在NaOH和丙三醇存在下，3,5－二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。

OHNO2HOOCNO2(DNS)

OH NH2+ 还原糖 HOOCNO2（3－氨基－5－硝基水杨酸）? 黄色 桔红色

试剂和器材

一、试剂

3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml。

葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为2.0mg/ml。

6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。

碘－碘化钾溶液

实验一 还原糖和总糖含量的测定

（3,5-二硝基水杨酸比色法）

一．目的

1.掌握还原糖定量测定的基本原理； 2.学习比色定糖法的基本操作； 3.熟悉分光光度计的使用方法。 二．原理

在碱性的条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质）,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分别样品中还原糖和总糖的含量。

三．仪器.试剂和材料 1.仪器：

（1）25ml刻度试管 （2）玻璃漏斗 （3）三角瓶 （4）100ml容量瓶3个 （5）刻度吸管（1ml,2ml,3ml） （6）恒温水浴 （7）沸水浴 （8）电子天平 （9）分光光度计 2.试剂；

（1）1mg/ml葡萄糖标准液 （2）3,5-二硝基水杨酸试剂 （3）碘碘化钾溶液 （4）酚酞指示剂 （5）6ml/L HCI （6）6ml/L NaOH 3.材料：食用面粉 四．操作步骤

1.制作葡萄糖标准曲线：取7支25ml刻度试管，编号，按如下操作。 操作项目 葡萄糖标准液（ml） 蒸馏水（ml）

实验二 总糖和还原糖的测定（二）

──3,5－二硝基水杨酸法

目的要求：

掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。

实验原理:

在NaOH和丙三醇存在下，3,5－二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。

OHNO2HOOCNO2(DNS)

OH NH2+ 还原糖 HOOCNO2（3－氨基－5－硝基水杨酸）? 黄色 桔红色

试剂和器材

一、试剂

3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml。

葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为2.0mg/ml。

6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。

果蔬中总糖及还原糖含量的测定

一、实验目的

1、掌握总糖和还原糖含量的测定方法。 2、学习分光光度计的原理和操作方法。 3、了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理。 二、实验原理

总糖是指样品中的还原单糖及在本实验条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。

多糖为非还原糖，可用酸将没有还原性的多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖，再利用还原糖的性质进行测定，这样就可分别求出总糖和还原糖的含量。 糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。 三、实验器材 1、材料：梨

2、仪器：分光光度计、恒温水浴锅、电子分析天平、高速冷冻离心机、容量瓶（100mL×2）、玻璃漏斗、量筒、研钵、锥形瓶、试管、移液管、pH试纸 3、试剂：

蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于1000mL体积分数为80%的硫酸中，当日配制使用。 标准葡萄糖溶液（0.1mg/mL）：称取100mg葡萄糖，溶于蒸馏水并稀释至1000mL（可加几滴甲苯作防腐剂）。 6

果蔬中总糖及还原糖含量的测定

一、实验目的

1、掌握总糖和还原糖含量的测定方法。 2、学习分光光度计的原理和操作方法。 3、了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理。 二、实验原理

总糖是指样品中的还原单糖及在本实验条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。

多糖为非还原糖，可用酸将没有还原性的多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖，再利用还原糖的性质进行测定，这样就可分别求出总糖和还原糖的含量。 糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。 三、实验器材 1、材料：梨

2、仪器：分光光度计、恒温水浴锅、电子分析天平、高速冷冻离心机、容量瓶（100mL×2）、玻璃漏斗、量筒、研钵、锥形瓶、试管、移液管、pH试纸 3、试剂：

蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于1000mL体积分数为80%的硫酸中，当日配制使用。 标准葡萄糖溶液（0.1mg/mL）：称取100mg葡萄糖，溶于蒸馏水并稀释至1000mL（可加几滴甲苯作防腐剂）。 6

情境四 农产品中碳水化合物含量的测定

根据所给出的产品选择、设计合适的检测方法，并进行正确的检测操作；测定结果的精密度应达到相关标准规定要求。

工作任务一 明确检测任务，获取检测方法信息 项目1 熟悉硬糖中还原糖含量测定的意义

通过网络搜集、相关参考书的查阅等手段，了解我国各种糖类产品中还原糖含量的基本情况；硬糖产品中还原糖测定的意义；曾经发生过的与该检测项目相关的案例。依据上述内容撰写一份报告。请特别关注对最新情况的收集。（2000字）

项目2 熟悉蜂蜜中还原糖含量测定的意义

通过网络搜集、相关参考书的查阅等手段，了解我国蜂蜜产品中还原糖含量的基本情况；我国蜂蜜造假的原因和基本手段；对蜂蜜产品中还原糖含量测定的意义；曾经发生过的与该检测项目相关的案例等。撰写一份报告，请特别关注对最新情况的收集。（2000字）

1.1测定酸类物质含量的重要意义： 碳水化合物在食品中的应用：

碳水化合物作为能量的主要来源，以及影响食品的物理性质和人类生理代谢的物质，在食品中占有很重要的地位。碳水化合物提供的热量占人类饮食摄入量的70%以上。碳水化合物赋予食品许多特性，包括容积﹑形状﹑粘度﹑乳化稳定性和起泡性、持水能力﹑冻-熔稳

还原糖测定

实验六 饮料中国还原糖含量的测定—直接滴定法 （GB/T5009.7—2003第一法） 教学目的要求： 基本知识点

1、掌握直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 重点：

1、熟练称量、定容、滴定等基本操技术

2、直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。 难点：

直接滴定测定还原糖的原理和控制要点 课时教学方案： 复习与提问：

1、检查实验准备情况， （1）实验内容；

（2）实验仪器与试剂有哪些？ （3）直接滴定测定还原糖的步骤。

2、直接滴定测定还原糖的注意事项和控制要点 【引入新课】 一、目的要求

1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点； 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 二、实验原理

试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。反应方程式如下： CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4

还原糖测定

实验六 饮料中国还原糖含量的测定—直接滴定法 （GB/T5009.7—2003第一法） 教学目的要求： 基本知识点

1、掌握直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 重点：

1、熟练称量、定容、滴定等基本操技术

2、直接滴定测定还原糖的原理、基本过程和操作关键。 难点：

直接滴定测定还原糖的原理和控制要点 课时教学方案： 复习与提问：

1、检查实验准备情况， （1）实验内容；

（2）实验仪器与试剂有哪些？ （3）直接滴定测定还原糖的步骤。

2、直接滴定测定还原糖的注意事项和控制要点 【引入新课】 一、目的要求

1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点； 2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。 二、实验原理

试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色，表示终点到达。根据试样溶液消耗体积，计算还原糖量。反应方程式如下： CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2↓+Na2SO4

情境四 农产品中碳水化合物含量的测定

根据所给出的产品选择、设计合适的检测方法，并进行正确的检测操作；测定结果的精密度应达到相关标准规定要求。

工作任务一 明确检测任务，获取检测方法信息 项目1 熟悉硬糖中还原糖含量测定的意义

通过网络搜集、相关参考书的查阅等手段，了解我国各种糖类产品中还原糖含量的基本情况；硬糖产品中还原糖测定的意义；曾经发生过的与该检测项目相关的案例。依据上述内容撰写一份报告。请特别关注对最新情况的收集。（2000字）

项目2 熟悉蜂蜜中还原糖含量测定的意义

通过网络搜集、相关参考书的查阅等手段，了解我国蜂蜜产品中还原糖含量的基本情况；我国蜂蜜造假的原因和基本手段；对蜂蜜产品中还原糖含量测定的意义；曾经发生过的与该检测项目相关的案例等。撰写一份报告，请特别关注对最新情况的收集。（2000字）

1.1测定酸类物质含量的重要意义： 碳水化合物在食品中的应用：

碳水化合物作为能量的主要来源，以及影响食品的物理性质和人类生理代谢的物质，在食品中占有很重要的地位。碳水化合物提供的热量占人类饮食摄入量的70%以上。碳水化合物赋予食品许多特性，包括容积﹑形状﹑粘度﹑乳化稳定性和起泡性、持水能力﹑冻-熔稳

详细介绍DNS法测定还原糖的量。

还原糖和总糖的测定

(3,5-二硝基水杨酸比色法)

一、实验目的

1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理

2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用

二、实验原理

还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类。单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,例如乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用各种糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来。对非还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成还原性单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(常以葡萄糖含量计)。

还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物,而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。

三、实验材料和试剂

1、实验材料 面粉 2、实验试剂

① 1mg/ml葡萄糖标准液

详细介绍DNS法测定还原糖的量。

准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡