磁珠分离法纯化mrna原理

磁珠法分离纯化DNA原理及其步骤

日期：2012-05-22 来源：互联网 标签： 核酸纯化 核酸分离 磁珠法 纯化DNA

摘要 : 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。

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磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。

磁珠法纯化DNA原理

磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料，来吸附核酸，其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE，COOH)等，从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就

萃取分离法习题

1、目前常用的萃取方法有哪几种？各有何特点？

2、衡量萃取完全的指标是什么？其影响因素有哪些？ 3、衡量萃取速度的指标是什么？其影响因素有哪些？

4、衡量萃取分离效率的指标是什么？它在评价一个萃取分离方法中的作用是什么？ 5、试述萃取剂的选择原则。 6、试述萃取溶剂的选择原则。

7、说明分配系数、分配比和分离因数三者的物理意义

8、在形成螯合物的萃取体系中PH1/2表示了什么？它的大小由什么因素决定的？对于PH1/2相差较大的离子，应如何使它们分离？对于PH1/2相差较小的离子又如何使它们分离？分别举例加以说明。

9、什么是盐析剂？为什么盐析剂作用可以提高萃取效率？

10、当HgI2溶液中有I-存在时，形成HgI3-和HgI42-。试推导用有机溶剂萃取HgI2时，HgI2的分配比与[I-]间的关系。

11、A和B化合物的分配比分别为9和2，通过多次萃取可以将它们分开吗？为什么？ 12、试计算：当所用提取溶剂与被萃液的相比（R）分别为0.5，1，2时的萃取率E（假设萃取体系的分配比D为1）。 由上述计算，可说明什么问题。

13、 当三氟乙酰丙酮分配在CHCl3和水中时得到如下的结果：当溶液的PH值为1.16时，分

萃取分离法习题

1、目前常用的萃取方法有哪几种？各有何特点？

2、衡量萃取完全的指标是什么？其影响因素有哪些？ 3、衡量萃取速度的指标是什么？其影响因素有哪些？

4、衡量萃取分离效率的指标是什么？它在评价一个萃取分离方法中的作用是什么？ 5、试述萃取剂的选择原则。 6、试述萃取溶剂的选择原则。

7、说明分配系数、分配比和分离因数三者的物理意义

8、在形成螯合物的萃取体系中PH1/2表示了什么？它的大小由什么因素决定的？对于PH1/2相差较大的离子，应如何使它们分离？对于PH1/2相差较小的离子又如何使它们分离？分别举例加以说明。

9、什么是盐析剂？为什么盐析剂作用可以提高萃取效率？

10、当HgI2溶液中有I-存在时，形成HgI3-和HgI42-。试推导用有机溶剂萃取HgI2时，HgI2的分配比与[I-]间的关系。

11、A和B化合物的分配比分别为9和2，通过多次萃取可以将它们分开吗？为什么？ 12、试计算：当所用提取溶剂与被萃液的相比（R）分别为0.5，1，2时的萃取率E（假设萃取体系的分配比D为1）。 由上述计算，可说明什么问题。

13、 当三氟乙酰丙酮分配在CHCl3和水中时得到如下的结果：当溶液的PH值为1.16时，分

“液膜分离法处理废水实验”

学生姓名：班 级：学 号：实验组号：同组姓名：实验时间：老 师：

实验报告

xxxxxxxx 2010级工艺3班 1043084xxx 三班第3组 xxxxxxxxxxxxxx 2013 年 11月 6日 党 亚 固

撰写实验报告时间:2013年11月7日

四川大学化工学院

液膜分离法处理废水实验

1 实验目的

[1]掌握液膜分离技术的操作过程 [2]了解两种不同的液膜传质机理 [3]用液膜分离法脱除废水中的污染物

2 实验原理

[1]液膜分离技术集萃取与反萃过程为一体，适用于分离溶液中的低浓度物质。此技术已在湿法冶金、石油化工、生物制品、三废处理等领域得到应用。是利用一种膜状液体将组成不同而又完全互溶的原料液和接受液隔开，原料液中的欲分离组分通过液膜渗透到接受液，从而与原料液分离。

[2]由于欲处理的是醋酸废水溶液(外相)，所以可选用与之不互溶的油性物质作为膜相，并选用NaOH水溶液作为内相。实验时

平板分离法

一、目的要求

掌握倒平板的方法和几种分离纯化微生物的基本操作技术。 二、基本原理

在海水、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，当我们希望获得某一种微生物时，就必须从混杂的微生物类群中分离它，以得到只含有这一种微生物的纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。

为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物，直至得到纯菌株。

海水是微生物生活的大本营，在这里生活的微生物无论是数量和种类都是极其多样的，因此，海水是我们开发利用微生物资源的重要基地，可以从其中分离、纯化到许多有用的菌株。 三、器材

高氏1号琼脂培养基，肉膏蛋白胨琼脂培养基，马丁氏琼脂培养基，盛9ml无菌水的试管，盛90ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶，无菌玻璃涂棒，无菌吸管，接种环，10％酚，无菌培养皿，链霉素，土样等。 四、操作步骤 平板划线分离法

（1）按稀释涂布平板法倒平板，并用

平板分离法

一、目的要求

掌握倒平板的方法和几种分离纯化微生物的基本操作技术。 二、基本原理

在海水、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，当我们希望获得某一种微生物时，就必须从混杂的微生物类群中分离它，以得到只含有这一种微生物的纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。

为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或平板划线分离法等分离、纯化该微生物，直至得到纯菌株。

海水是微生物生活的大本营，在这里生活的微生物无论是数量和种类都是极其多样的，因此，海水是我们开发利用微生物资源的重要基地，可以从其中分离、纯化到许多有用的菌株。 三、器材

高氏1号琼脂培养基，肉膏蛋白胨琼脂培养基，马丁氏琼脂培养基，盛9ml无菌水的试管，盛90ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶，无菌玻璃涂棒，无菌吸管，接种环，10％酚，无菌培养皿，链霉素，土样等。 四、操作步骤 平板划线分离法

（1）按稀释涂布平板法倒平板，并用

2013级生物技术专业课程论文

学校代码：11059 学 号：1302021034

Hefei University

下游处理技术（综述）

论文题目： 学位类别： 学科专业： 作者姓名： 导师姓名： 完成时间：

蛋白质的泡沫分离法 本科 生物技术 Dxc 于宙 2016.4.23

1

2013级生物技术专业课程论文

蛋白质的泡沫分离法

摘要：泡沫分离技术是近十几年发展起来的新型分离技术之一。其是根据吸附的原

理，向含表面活性物质的液体中鼓入气泡，使液体内的表面活性物质在气泡表面上聚集，由此将泡沫层和液相主体分开，从而达到浓缩表面活性物质和净化液相主体的目的。随着工业的发展，特别是对环境保护的普通重视和资源综合利用的要求，泡沫分离的研究工作将不断扩大范围，其工业应用将越来越多。目前，泡沫分离技术主要工业应用于污水处理，矿物浮选，金属特别是稀有金属的回收检测等方面，生物学领域应用为分离细胞、蛋白质体系分离富集、分离皂苷等。其发展迅速，规模易于放大，因此特别适用于大量稀溶液的固液分离。

关键词：泡沫分离；蛋白质；混合体系；固液分离

1. 沿革

泡沫分离主要应用的是表面吸附的原理，其基本操作为利用通气鼓泡在液相中形

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

凝胶层析法分离纯化蛋白质

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

【目的】掌握凝胶层析的基本原理 学习利用凝胶层析法分离纯化蛋白质的实验 技能

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

【原理】 凝胶层析也称分子筛层析、排阻层析。 是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用， 根据被分离物质的分子大小不同来进行分 离的技术。

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

凝胶过滤层析凝胶层析是按照蛋

白质分子量大小进行分离的技术，又称之凝胶 过滤、分子筛层析或排 阻层析。

单个凝胶珠本身象“筛子”。不同类型凝 胶的筛孔的大小不同。

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

带网孔的 葡聚糖珠小分子进入 葡聚糖珠内

大分子不 能进入珠 内，经珠 之间缝隙 流出

凝胶过滤层析过程示意图

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

凝胶 珠

凝胶基质

小分子 大分子

凝胶过滤层析过程示意图

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

总结：相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔被完全排 阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间向下流动，因此流程 较短，移动速度快；所以首先流出。 相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔，可完全 渗透进入凝胶颗粒的网孔，在向下移动过程中，因此流程 较长，移动速率慢；所以最后流出。 中等大小的分子，它们在凝胶颗粒

食用菌母种的制作 ——组织分离法实验报告

实验目的：

学习和掌握食用菌的组织分离法； 一、 实验原理：

食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。 二、 实验器材：

1. 食用菌：香菇、平菇。2. 培养基：PDA培养基斜面。3. 仪器或其他用具： 75%酒精棉球、接种针记号笔等。 三、 实验方法：

1. 选择种菇：选择肥壮菇体作种菇；

2. 种菇消毒：取1张菇片，用 70%的酒精轻擦表面进行消毒； 3. 菇肉接种：将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇柄与菌盖的交界处取一米粒大小的菇肉组织接于PDA试管斜面上； 4. 培养：将试管斜面置于15～30℃下培养； 五、注意事项

1. 在整个操作过程中都要注意无菌操作，一切用具都要消毒。 2. 要等刀片冷却后再切取组织块。 六、实验结果与记录

第一次实验：10月16日上午进行接种，两试管都以肥壮的双孢菇为种菇，10月13日观察培养基

结果分析：本次实验全班只有一人成功，大部分都被杂菌污染，最有可能的原因就是制作的PDA培养

杂菌

没有菌落产生

基本身受到污染，但是又有培养基根

酶的分离纯化

摘要：本文概述了在实验中由于酶浓度、饱和度等不同条件下对酶进行分离纯化的适用方法。酶的分离纯化有很多种方法，在纯化的工艺上有很大的不同，不同来源的酶在分离纯化中表现出不同的洗脱特性。现有酶的分离纯化方法都是依据酶和杂蛋白在性质上的差异而建立的。

关键词：酶；分离；纯化；方法

前言：酶的分离纯化工作，是酶学研究的基础。酶的纯化过程在目前来说仍是一门实验科学。一个特定酶的提纯往往需要经过多个实验的探索才能总结出一般经验规律。酶的分离纯化又与其他蛋白质的纯化过程存在很大的差异，酶的分离纯化有其自己独有的特点：一是特定酶在细胞中的含量少，二是酶通过测定活力的方法可以加以跟踪，前者给实验带来困难，后者为实验提供了捷径。 正文：

1. 酶的分离与纯化的概念[1]

酶的分离与纯化是指将酶从细胞或其他含酶材料中提取出来，再与杂质分开，从而获得符合使用目的、有一定纯度和浓度的酶制剂的过程。

酶分离纯化的一般原则： ①防止酶变性失活

1．）酶纯化一般在低温条件下进行（0~4℃）

2.）各种溶液应该用缓冲液，PH应调到使酶最稳定的PH 3.）各种溶液中还可以加入酶保护剂

②建立一个可靠和快速的测活方法 方法专一、灵敏、精确、简便、经