简述土壤样品的制备方法及其注意要点

第一节 概述

由于电子束的穿透能力比较低（散射能力强），因此用于TEM分析的样品厚度要非常薄，根据样品的原子序数大小不同，一般在5～500nm之间。要制备这样薄的样品必须通过一些特殊的方法。

第二节 复型技术

衬度：眼睛能观察到的或者其它媒介能记录到的光强度或感光度的差异； ? 质厚衬度就是样品中不同部位由于原子序数不同或者密度不同、样品厚度不同，入射电子被散射后能通过物镜光阑参与成像的电子数量不同，从而在图像上体现出的强度的差别。

?

2.1 影响质厚衬度的因素：

与原子序数的关系：物质的原子序数越大，散射电子的能力越强，在明场像（物镜光阑只允许散射角小的电子通过）中参与成像的电子越少，图像上相应位置越暗。

? 与试样厚度的关系：设试样上相邻两点的物质种类和结构完全相同，只是电子穿越的厚度不同，则在明场像中，暗的部位对应的试样厚，亮的部位对应的试样薄。

? 与物质密度的关系：试样中不同的物质或者不同的聚集状态，其密度一般不同，也可形成图像的反差，但这种反差一般比较弱。

?

2.2 复型技术

复型就是表面形貌的复制（其原理与侦破案件时用的石膏复制罪犯鞋底花纹相似）。通过复型制备出来的样品是真实样品表面形貌组织结构细节的薄

作业指导书

土壤样品制备作业指导书

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1 目的

采用最经济有效的方法，将样品粉碎、缩分，制成具有代表性的分析试样； 制备的均匀并达到规定要求粒度的试样，保证整体原始样品的物质组分及其含量不变和便于前处理。

根据不同监测目的、不同项目和不同测试要求，采取不同的制样方法，确保试样制备的质量。 2 适用范围

适用于实验室土壤样品风干样品及新鲜样品的制备管理过程。 3 样品的制备

3.1新鲜样品的制备

某些土壤成分如挥发性和半挥发性有机污染物、氰化物、挥发酚、铵态氮、硝态氮、低价铁、酸碱度和速效养分等在风干过程中会发生显著变化，需用新鲜样品（原土）分析。为了能真实反映土壤在自然状态下的某些理化性状，新鲜样品再采集要及时送回实验室进行分析，分析前只需用玻璃或瓷炎钵棒将样品迅速弄碎混匀或多点取样称量，对含水较高的泥状土样可迅速搅匀后称样。称样时应注意不得将土壤以外的侵入体和新生体称取。新鲜样品若不能及时测定，必

Ⅰ-土壤分析样品的采集和处理方法

配方施肥是一种以最少的肥料投入得到农作物最高产量的农业新技术，这一技术的基础是测出土壤中已有的养分含量，然后根据种植作物的品种、目标产量决定该施什么肥、施多少肥。

土壤样品采集是决定分析结果是否准确的重要环节，因此请严格按下列方法采集土样。

对作物根系较浅的种植地只需取耕层20厘米深的土壤，对作物根系较深的种植地如小麦应适当增加深度，果园土壤样品在耕层40厘米深处采集，采样点的多少可根据试验区耕地面积大小和地形而定，地块面积较小的要采5个点以上，地块面积较大的应采20个点以上。取样点的分布最好采用S型采样法或十字交叉法。（见图一）

采来的样品数量太多可用四分法弃去一部分保留1斤土样即可（见图二）。其方法

1

是：把采来的土样倒在干净的木板或塑料布上，用手将土块捏碎，用镊子夹去土样中的作物根系、昆虫、石块等杂物，放于室内阴凉通风处风干，注意不能在阳光下曝晒及火烤，以免发生氧化反应。把风干后的土样用木棍或玻璃瓶碾碎（不可用金属制品），然后用1—2毫米筛子筛一遍。把筛过的土样平铺成四方形，如数量仍然很多，可再用四分法处理，直至所需数量为止，一般用50克土样即可，完成土样处理后，请填写土壤登记表。

注：如一户有几个土样

一、选择题。（每题4分，共16分）

1. 测试项目需要新鲜土壤样品时，采集后用可密封的聚乙烯或玻璃瓶容器盛装，并且保存。（）

A.室温避光

B.在20℃以下

C.在4℃以下

2. 土壤误差可分为采样误差（SE）、制样误差（PE）和分析误差（AE）三类，通常情况下。 ( )

A.SE＞PE＜AE

B. SE＜PE＞AE

C. SE＞PE＞AE

D.以上都不是

3. 分析土壤中挥发性和半挥发性有机污染物时，采集的样品应储存在，且样品要样品瓶。( )

A.透明玻璃瓶，装满

B.棕色玻璃瓶，不装满

C. 透明玻璃瓶，不装满

D. 棕色玻璃瓶，装满

4. 土壤样品可采用样品烘干机烘干，温度控制在( )

A.35℃±5℃

B. 30℃±5℃

C. 35℃±2℃

D. 25℃±5℃

二、判断题。（每题3分，共24分）

1. 土壤样品风干室应具备如下条件：朝南（以方便阳光直射土壤样品），通风良好，整洁，无尘，无易挥发性化学物质。( )

2. 土壤样品的风干操作为：在风干室将土样放置于风干盘中，摊成2~cm的薄层，适时地压碎、反动，检出碎石、砂砾和植物残体。（）

3．采集土壤样品的质量一般不少于500g。（）

4．土壤样品加工过程中，不用挑除草

透射电镜细胞样品制备技术和观察方法

(一)原理

透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)是利用阴极发射的电子，通过阳极中央的微孔形成的电子束穿透样品获得样品的电子信号，经物镜、中间镜和投影镜等多级电子放大至数百至数千万倍，最后成像在荧光屏上便可即时观察，或是投射到照相底片感光片上作为永久记录。由于标本必须置于高真空中进行电镜观察，所以电镜观察的生物标本必须特殊制备，不能含水，离体的生物标本要迅速加以固定，以防产生结构改变。另外，电子的穿透力很弱，这就需要把样品制成50nm～100nm厚的超薄切片(一个细胞切成100～200片)。为了使柔软的生物组织能够制成这样薄的切片，并使切片耐受高真空和电子轰击，所以在切片前要进行包埋。超薄切片技术是透射电镜观察成功的关键。

超薄切片制作样品过程大体分为取材、固定、漂洗、脱水、渗透包埋与聚合、切片、染色等。细胞超薄切片技术中如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来是最大的难题。新的定型产品无菌聚苯乙烯塑料薄膜的使用解决了这个难题，把薄膜放在培养瓶皿中，让细胞直接长在塑料薄膜上，不仅细胞生长效果好，而且可与细胞一起包埋切片，省去了许多麻烦。

(二)超

土壤微生物研究规范——II. 土壤样品的运输和贮存

1. 土壤微生物样品的运输

土样从采集点到实验室往往需要经历一定时间的运输，土样运输过程中难免影响土壤的温度、水分、氧气等环境条件，所以要尽快置于黑暗、低温（4℃）的密闭环境，尽量维持土壤含水量稳定不变，黑暗环境是为了避免光照下藻类在土壤表明的生长，低温是为了减少细菌繁殖，维持微生物区系稳定。一般装于聚乙烯袋子，并松扎。另外，储存时尽可能避免物理压实，样品袋不要堆叠过多，以免破坏土壤原有的团粒结构，并导致底层样品处于厌氧环境。

微生物取样的土壤样品需要在0-4℃的条件下保存，所以土壤样品应及时保存在保温箱或冰箱中（设置0-4℃），并最好在一周内完成前期处理。

如果采集地有冰箱、熏蒸所需的真空干燥器和通风橱等设施，建议将微生物土壤样品熏蒸浸提后，以冷冻的浸提液保存在塑料小瓶中，以方便运送。

如果采集地没有通风橱等设施，建议将所取的土壤样品过筛后冷藏在保温箱中，以方便运送。具体的流程如下：

（1）提前准备好保温箱及冷冻好的冰板。冰板需要提前1-2 d冷冻，可以再用自封袋装一定量水分放平冷冻为规则的冰块备用。

（2）按照微生物取样规范进行取样，及时过筛去除根系、土壤动物等杂质，放置在0-4℃保鲜冰

第七章 灵芝的制剂及其制备方法

市售灵芝类产品种类繁多，包括生药材、药用制剂、保健品、饮品等，本章重点介绍灵芝的制剂及其制备方法。灵芝的子实体、菌丝体及孢子均可制成制剂供药用，灵芝深层发酵培养的菌丝体和发酵液亦要制成制剂使用。应用灵芝的药用制剂前，应注意产品是否经药政部门批准。通常，药政部门批准的灵芝制剂有药准字制剂或药健字制剂，前者可作为临床治疗用药，后者仅作为保健药使用。如作为辅助治疗药或扶正固本药时，二者皆可应用。此外，灵芝制剂的适应证有限，可按产品说明书及前文所叙的临床应用使用。作为治疗药用时，还应注意在医师指导下使用，切莫滥用。

目前常用的灵芝制剂有片剂、胶囊剂、冲剂、糖浆剂、酊剂、注射剂等，除单方外尚有与其他中药配伍组成的复方制剂。由于灵芝制剂多用于慢性疾病的治疗或用于久病体虚及老年保健，需长期服用，加之口服制剂服用方便，价格也相对低，故灵芝的口服制剂值得提倡，并受使用者的欢迎。灵芝的注射剂成本高，不如口服制剂用药方便，只限于特殊需注射给药的病人用。对需长期用药者，不提倡使用注射剂。

除应用灵芝制剂外，亦可自购灵芝子实体或子实体粗加工制成的灵芝饮片（生药材），自制酒剂、水煎剂服用。

以下简介灵芝制剂的提取和制备方法，供参

附件1

农用地土壤样品采集流转制备

和保存技术规定

1

目录

1 适用范围 ................................................................................................................... 1 2 土壤样品采集 ............................................................................................................ 1 2.1 制定采样计划 ............................................................................................................. 1 2.2 采样准备 ..................................................................................................................... 1 2

附件1

农用地土壤样品采集流转制备

和保存技术规定

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目录

1 适用范围 ................................................................................................................... 1 2 土壤样品采集 ............................................................................................................ 1 2.1 制定采样计划 ............................................................................................................. 1 2.2 采样准备 ..................................................................................................................... 1 2

附件1

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和保存技术规定

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1 适用范围 ................................................................................................................... 1 2 土壤样品采集 ............................................................................................................ 1 2.1 制定采样计划 ............................................................................................................. 1 2.2 采样准备 ..................................................................................................................... 1 2