海藻酸钠固定化原理

植物细胞固定化预实验

实验目的：熟悉海藻酸钠做固定剂下植物细胞固定化培养试验操作。

实验材料：悬浮培养的植物细胞种子、250ml三角瓶5个、培养皿、 移液枪、电子称、电磁搅拌器、滴管或注射器、烧杯、纱布、漏斗、铁架台。 实验步骤

1.实验准备：配制植物细胞液体培养基分装到4个250ml三角瓶中，每瓶70ml；配制一定量20g/LCaCl2溶液；配制40g/L的海藻酸钠溶液100ml并称量配制好的海藻酸钠溶液质量w1。 2.灭菌

3.制备凝胶球

3.1取种子液用两层无菌纱布过滤，收集滤液。

3.2静置滤液，用移液枪移去上层培养液至于事先准备好的无菌三角瓶中备用。获得植物细胞。

3.3取鲜重20g的细胞于配置好的无菌还在酸钠溶液中边加入边用电磁搅拌器搅拌。

3.4用滴管或注射器吸取海藻酸钠--细胞混合液滴入无菌CaCl2溶液中形成直径3--5mm的凝胶球，放置30--60min后倒出CaCl2溶液，用无菌水充分洗涤凝胶珠。 3.5称量胶球质量w=8*（20+w1）/20g加入到含70ml新鲜培养基+10ml原培养基的三角瓶中，制作两瓶。称量植物细胞鲜重8g加入到含70ml新鲜培养基+10ml原培养基中做对照。

4.在一

海藻酸钠固定化β-葡萄糖苷酶的制备及其性质研究

维普资讯

第3 0卷第 1 0期20 0 7年 1 0月

合肥工业大学学报 (自然科学版)J OURNAL 0F HEF EIUNI VERSI 0F TECHNOLOGY TY

Vo. 0 No 1 13 . 0Oc . 2 0 t 07

海藻酸钠固定化』葡萄糖苷酶的制备及其性质研究 3一潘利华，罗建平，查学强，王贵娟，李想 (合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽合肥 200) 3 0 9

摘

要：在活性炭、明胶等 8种固定化载体筛选的基础上研究了以海藻酸钠为载体，二醛为交联剂固定化戊

葡萄糖苷酶的条件，对固定化酶的酶学性质及其在催化制备大豆异黄酮活性苷元染料木素中的应用进行并了研究。B葡萄糖苷酶在 0 2戊二醛溶液中交联 2h后再与 2/ _ .0 0g L海藻酸钠混合，后逐滴加到 4g L然/ C C2 a1溶液中，固化 1h后过滤、 洗涤得固定化葡萄糖苷酶，固定化酶的酶活回收率为 8. 7。固定化酶的 3 6最适温度、热稳定性、 H值稳定性以及与底物的亲和力都有所提高，适 p值基本不变。该固定化酶重复 p最 H使用 6次后其活力仍保持 9 . 4, o 9 染料木苷转化率达

利用甲壳胺和海藻酸钠处理染整废水

第26卷第5期2005年10月纺　织　学　报JournalofTextileResearchVol.26,No.5Oct.,2005

利用甲壳胺和海藻酸钠处理染整废水

秦益民

(嘉兴学院生化材料研发中心,浙江嘉兴　314001)

摘　要　介绍了联合使用甲壳胺和海藻酸钠处理染整废水的处理方法。在含酸性铬蓝K染料的废水中分别加入甲壳胺和海藻酸钠的水溶液后,把二种溶液混合。由于带正电的甲壳胺和带负电的海藻酸钠相互沉淀而使染料与废水分离。实验结果表明,甲壳胺和海藻酸钠的添加量、添加比例、处理温度、pH值、处理时间等因素对废水脱色均有影响。

关键词　甲壳胺;海藻酸钠;染整废水

中图分类号:X791　　　文献标识码:A　　　文章编号:02532(2Dyeingandfinishingandsodiumalginate

(TheCenter,JiaxingUniversity,Jiaxing,Zhejiang　314001,China)Abstract　Useofandsodiumalginateintreatingeffluentfromdyeingandfinishingprocesswasstudied.Chitosanandsod

固定化酶在食品中的运用

摘要:固定化酶有许多优点，尤其是稳定性和可重复使用性使其在许多领域得到广泛应用。固定化酶技术是一门交叉学科技术，目前已得到长足的发展。介绍了固定化酶制备的传统方法以及一些新方法，同时对酶在一些性能优良的载体上的固定进行了综述。 关键词：固定化酶；制备；载体

酶是由活细胞产生的一类特殊的蛋白质催化剂(核酶除外)，具有催化效率高、底物高度专一、反应条件温和、反应容易控制等特点。酶的最大缺点是其不稳定性，在酸、碱、热及有机溶剂中易发生变性，活性降低或丧失；而且酶反应后，会在溶液中残留，造成酶反应难以连续化、自动化，同时也不利于终产品的分离提纯，这些都大大阻碍了酶工业的发展，所以有必要采取酶工程技术改善这些缺点。酶工程技术措施较多，其中酶的固定化技术是重要举措之一。酶的固定化是用人工方法把从生物体内提取出来的酶固定在特定的载体上或使酶与酶相交联，酶被限定在一定区域内，但仍保持原有高效、专一、条件温和的催化功能。通常酶是游离的，而经过固定化以后，酶被束缚在一定区域内，因而这样的酶被称为固定化酶。固定化酶在生物、医药、农业、食品、化工、能源开发、环境保护等方面得到了广泛应用。本文介绍了固定化酶的制备方法和优缺点，对其在食品行业中的

海藻糖——“生命之糖”

我们都知道，水是生命的源泉。在各种生物体内，都含有不等量的水。以植物为例，水生植物的含水量可高达98％，而有些沙漠植物的含水量却只有16％。如果低于这个百分比，这些植物细胞中的原生质就会遭受破坏而死去。

可是，有这么一种植物，即便含水量降低到5％以下，几乎成为“干草”了，仍然可以保持生命。有人把这种植物全株做成干制标本，放在植物分类标本橱中，几年后，这株干草无意中落到了水池中，待第二天被人发现时，它竟舒展开全部枝叶，又变得生机勃勃了。

南美洲的沙漠中，也有一种小植物，当水分不充足的时候，它就会自己把根从土壤里拔出来，让整个身体缩卷成一个圆球状。由于体轻，只要稍有一点儿风，它就会在地面上滚动，一旦滚到水分充足的地方，圆球就会迅速地打开，根重新钻到土壤里，暂时安居下来。当水分又一次不足，它住得不称心如意时，就会继续游走寻找充足的水源。

这两种植物，都属卷柏科植物，别名有“一把抓、老虎爪、长生草、万年松，九死还魂草，风滚草”等，因为它的不死神奇，引发了一场研究热潮。人们给这类植物取了一个新的名词“隐生生物(crypohidden life)”。后来科学家们发现，隐生生物其实广泛存在于生物界，这类生物在干燥时脱水，以极低

酶的固定化的方案

一、材料和方法 1.实验材料及试剂

酶，25%戊二醛溶液，带氨基的载体，考马斯亮蓝，牛血清白蛋白。 2. 主要实验仪器

紫外可见光分光光度计Uv-1800，THZ一C恒温振荡器，MD200一3型电子天平PHS一3C酸度计

3.酶的固定化方法 1）载体的活化

a 对所得的载体表面带有大量的氨基，对其进行活化处理可用于酶蛋白的共价结合。采用戊二醛为活化试剂，使凝胶表面连接上游离的醛基。具体方法为:将lg带氨基的载体颗粒臵于3ml、10%的戊二醛溶液中振荡24h，然后真空过滤。所得固体用去离子水洗涤多次，干燥后即为戊二醛活化的树脂颗粒。 b大孔树脂预处理方法：称取10g树脂于锥形瓶中，用95%的乙醇浸泡24h，真空抽滤，用1L蒸馏水冲洗。树脂依次用25mL的5%HCl和5%NaOH溶液浸泡4h后抽滤，用蒸馏水洗至中性。抽滤后臵于4℃冰箱中干燥4h，室温保存备用。

举例：称取适量经预处理的大孔树脂于50mL锥形瓶中，加入适量磷酸缓冲液（pH7.5，0.05mol/L）和适量的酶，臵于恒温水浴振荡器中吸附一定时间后（37℃，150r/min）真空抽滤，并用100mL缓冲液冲洗载体，抽干后臵于4℃冰箱中干燥4h，并于4℃冰箱中密封保存

海藻糖——“生命之糖”

我们都知道，水是生命的源泉。在各种生物体内，都含有不等量的水。以植物为例，水生植物的含水量可高达98％，而有些沙漠植物的含水量却只有16％。如果低于这个百分比，这些植物细胞中的原生质就会遭受破坏而死去。

可是，有这么一种植物，即便含水量降低到5％以下，几乎成为“干草”了，仍然可以保持生命。有人把这种植物全株做成干制标本，放在植物分类标本橱中，几年后，这株干草无意中落到了水池中，待第二天被人发现时，它竟舒展开全部枝叶，又变得生机勃勃了。

南美洲的沙漠中，也有一种小植物，当水分不充足的时候，它就会自己把根从土壤里拔出来，让整个身体缩卷成一个圆球状。由于体轻，只要稍有一点儿风，它就会在地面上滚动，一旦滚到水分充足的地方，圆球就会迅速地打开，根重新钻到土壤里，暂时安居下来。当水分又一次不足，它住得不称心如意时，就会继续游走寻找充足的水源。

这两种植物，都属卷柏科植物，别名有“一把抓、老虎爪、长生草、万年松，九死还魂草，风滚草”等，因为它的不死神奇，引发了一场研究热潮。人们给这类植物取了一个新的名词“隐生生物(crypohidden life)”。后来科学家们发现，隐生生物其实广泛存在于生物界，这类生物在干燥时脱水，以极低

酶和细胞的固定化

Chapter 5 Immobilized Enzyme and Cell

固定化酶和细胞

酶和细胞的固定化

Contents of chapter 51、什么是固定化技术和固定化酶 2、固定化酶的研究历史 3、酶的固定化技术(重点) 4、固定化酶的特点(重点) 5、固定化酶的应用 6、细胞、原生质体的固定化

酶和细胞的固定化

什么是固定化酶？ 5.1 什么是固定化酶？水溶性酶 水不溶性载体

水不溶性酶 水不溶性酶 (固定化酶) 固定化酶)

酶和细胞的固定化

什么是固定化酶？ 5.1 什么是固定化酶？酶的固定化技术和固定化酶 酶 可溶 间歇 吸附 包埋 间歇 交联 化学偶联 连续 固定化

酶和细胞的固定化

什么是固定化酶？ 5.1 什么是固定化酶？来源固定化酶： 固定化酶：经提取和分离纯化后的酶 固定化菌体(死细胞 死细胞): 固定化菌体(死细胞):含酶菌体或菌体 碎片

酶和细胞的固定化

什么是固定化酶？ 5.1 什么是固定化酶？特点优点——不溶于水，易于与产物分离； 不溶于水，易于与产物分离； 优点 不溶于水 可反复使用； 可反复使用； 可连续化生产； 可连续化生产； 稳定性好。 稳定性好。 缺点——固定化过程中往往会引起酶的失活。 固定化过程中往

性质介绍 蔗糖的物理性质

蔗糖极易溶于水，其溶解度随温度的升高而增大。蔗糖还易溶于苯胺、氮苯、乙酸乙酯、乙酸戊酯、熔化的酚、液态氨、酒精与水的混合物及丙酮与水的混合物，但不能溶于汽油、石油、无水酒精、三氯甲烷、四氯化碳、二硫化碳和松节油等有机溶剂。蔗糖属结晶性物质。纯蔗糖晶体的比重为1.5879，蔗糖溶液的比重依浓度和温度的不同而异。 蔗糖的化学性质

蔗糖及蔗糖溶液在热、酸、碱、酵母等的作用下，会产生各种不同的化学反应。反应的结果不仅直接造成蔗糖的损失，而且还会生成一些对制糖有害的物质。

蔗糖分子结构

1、热分解作用

结晶蔗糖加热至160℃，便熔化成为浓稠透明的液体，冷却时又重新结晶。加热时间延长，蔗糖即分解为葡萄糖及脱水果糖。在190—220℃的较高温度下，蔗糖便脱水缩合成为焦糖。焦糖进一步加热则生成二氧化碳、一氧化碳、醋酸及丙酮等产物。在潮湿的条件下，蔗糖于100℃时分解，释出水分，色泽变黑。

蔗糖溶液在常压下经长时间加热沸腾，溶解的蔗糖会缓慢分解为等量的葡萄糖及果糖，即发生转化作用。蔗糖溶液若加热至108℃以上，则水解迅速，糖溶液浓度愈大，水解作用愈显著。煮沸容器所用的金属材料，对蔗糖转化速率也有影响。例如：蔗糖

课题3

酵母细胞的固定化

温故知新：1、洗衣粉中添加________,可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_____________四类。 2、影响酶活性的因素有_______、________

和_________。

在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多优点，你能举

出一些例子吗？催化效率高、低能耗、低污染等。 酶制剂的使用有缺点吗？ 你能举出一些例子吗？

酶制剂存在的缺陷：1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条 件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，

提高了生产成本；3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。

如果你是工程技术人员，你如何解决 这个问题？

一、固定化酶的应用实例阅读P49-50,并思考：

1、解决酶应用中存在问题的方法是？2、这种方法的优点是什么？ 3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 4、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这 种酶有何特点？

5、了解高果糖浆生产过程。

1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的

技术(如固定在不溶于水的载体上)。 2、固定化酶技术的优点：(1)使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；

(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。

3、高果糖浆是果糖含量为42%左