乙肝表面抗原定量分析的临床意义

乙肝表面抗原的ELISA法定量分析

姓名 Z P

学号 0925400072

班级 09

指导老师

方法学验证

级医学检验本科二班 沈 富 兵

二〇一三年四月

乙肝表面抗原定量测定的方法学验证

作者：ZP（成都医学院检验医学院09级医学检验本科二班，610500）

【摘要】 目的 用福州蓝图生物工程有限公司出品的乙肝表面抗原ELISA法定量分析试剂盒对乙肝表面抗原定量测定的方法进行验证，以判断是否能用于教学以及临床分析。方法 运用ELLISA法定量测定乙肝表面抗原，应用试剂盒HBsAg标准从浓度为8ng/ml的2倍稀释的6个浓度梯度，根据OD值绘制标准曲线再计算相对回收率和板内和板间精密度，通过资料数据综合分析。结果 HBsAg线性较好，其准确度、精密度、LOD值均在正常范内。结论 ELISA法定量检测HBsAg能较准确、快速地反映体内乙肝病毒复制情况，可以用于教学以及临床分析。

【关键词】 乙肝表面抗原 方法学验证 标准曲线 精密度 EL

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中国现代药物应用2012年4月第6卷第8期ChinJModDrugAppl，Apr2012，Vol．6，No．8

Spearman等级相关分析表表达一致率为56.45%（35/62），明二者之间表达呈正相关（P＜0.05）。

OPN表达与结直肠癌各临床病理因素之间的关系表1MK、

因素浸润深度

T1+T2T3+T4淋巴结转移

无有Dukes分期A+BC+D

25372240

1534

11.627

1237

0.002

1135

N3527

MK阳性数

2425

7.397

0.009

1531

13.367

0.001

χ2值10.103

P值0.003

2224

7.417

0.008

OPN阳性数

χ2值9.411

P值0.006

3

讨论

MK特异性表达于多种肿瘤组织中，通过促肿瘤血管新分期有关。的浸润深度，淋巴结转移及Dukes’

MK与OPN在结直肠癌组织中的表本研究结果还显示，达密切相关（P＜0.05）。MK表达阳性率高的结直肠癌组织

OPN表达阳性率也增高，切片中，并且表达的部位基本一致，OPN在结直肠癌的形成、表明二者具有协同性。MK，生长、

侵袭和转移中起重要作用。

参考文献

［1］RudlandPS，Platt-HigginsA，EI-TananiM，etal．

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中国现代药物应用2012年4月第6卷第8期ChinJModDrugAppl，Apr2012，Vol．6，No．8

Spearman等级相关分析表表达一致率为56.45%（35/62），明二者之间表达呈正相关（P＜0.05）。

OPN表达与结直肠癌各临床病理因素之间的关系表1MK、

因素浸润深度

T1+T2T3+T4淋巴结转移

无有Dukes分期A+BC+D

25372240

1534

11.627

1237

0.002

1135

N3527

MK阳性数

2425

7.397

0.009

1531

13.367

0.001

χ2值10.103

P值0.003

2224

7.417

0.008

OPN阳性数

χ2值9.411

P值0.006

3

讨论

MK特异性表达于多种肿瘤组织中，通过促肿瘤血管新分期有关。的浸润深度，淋巴结转移及Dukes’

MK与OPN在结直肠癌组织中的表本研究结果还显示，达密切相关（P＜0.05）。MK表达阳性率高的结直肠癌组织

OPN表达阳性率也增高，切片中，并且表达的部位基本一致，OPN在结直肠癌的形成、表明二者具有协同性。MK，生长、

侵袭和转移中起重要作用。

参考文献

［1］RudlandPS，Platt-HigginsA，EI-TananiM，etal．

乙肝两对半定量检测的临床意义

血清乙肝标志物（两对半）定性测定始于80年代中期，对乙肝的疾病诊断、病程监测、疗效观察起到了一定的作用。随着临床医学的迅速发展，定性检测已远远不能满足临床及患者的要求。由于受检测抗原抗体定性结果不是“阳性”就是“阴性”，无法动态观察病情和疗效的变化，所以，为临床所能提供的信息有限。随着检验医学的发展，\两对半\定量测定成为可行，大大弥补了酶标（ELISA）定性检测的不足。同时，两对半的定量检测可与血清HBV－DNA荧光定量PCR测定相互补充，综合评价患者病情与药物疗效。 一、两对半定量检测极大的提高了检测的灵敏度。

化学发光免疫技术检测HbsAg灵敏度可达0.1ng/ml，而酶标（ELISA）检测HBsAg的灵敏度达到2ng/ml酶标才会呈阳性。

1、急性乙肝早期：定量能及早检出HBsAg，确证HBV感染，几乎能与preS1同时检测，在病程观察中大大缩短了\窗口期\时间，而酶标检测在乙肝早期检测往往HBsAg呈阴性。 2、慢性乙肝：一些患者由于机体常缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和HbsAb均阴性的情况，而定量检测则可避免这些情况的出现,为正确判断病情提供依据。

乙肝病毒表面抗原诊断操作规程

一、操作步骤：

1、将试剂盒从冰箱中取出至室温中平衡30分钟后使用。

2、将标本对应微孔按顺序编号。

3、每孔加入待测标本50微升，设阴、阳性对照

各两孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各1滴，并设空白对照1孔。

4、每孔加入酶结合物1滴，（空白对照孔除外）

充分混匀，封板，置37度孵育30分钟。

5、手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，

静置5秒，甩干，重复5次后拍干。

洗板机洗板：选择洗涤5次程序后拍干。6、每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，

封板，置37度孵育15分钟。

7、每孔加终止液1滴，混匀。

8、用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双

波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。

二、结果判断：

样品OD值/阴性对照平均OD值大于等于2.1判断为阳性，否则为阴性。

阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。

三、注意事项：

1、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。

2、封片不能重复使用。

3、结果判断须在反映终止后10分钟内完成。

4、不同批号的试剂不可混用。

5、待测标本不可用NaN3防腐，如需稀释标本，请用小牛血清稀释。

6、试剂盒应视为有传染性物质，请按传染

第１章 定量分析概论

一、选择题

1. 试样用量为0.1 ~ 10 mg的分析称为 (A) 常量分析 (B) 半微量分析 (C) 微量分析 (D) 痕量分析

2. 试液体积在1 ~ 10 mL的分析称为 (A) 常量分析 (B) 半微量分析 (C) 微量分析 (D) 痕量分析

3. 每100 mL人体血浆中,平均含K+18.0mg和Cl-365 mg。已知M(K+)= 39.1 g/mol, M(Cl-) = 35.5 g/mol。血浆的密度为1.0 g/mL。则血浆中K+和Cl-的浓度为 (A) 1.80 ×10-1和3.65 mol/L (B) 7.04×10-3和1.30×10-1 mol/L (C) 4.60×10-3和1.03×10-1 mol/L (D) 4.60×10-6和1.03×10-4 mol/L

4. 海水平均含 1.08×103 ?g/g Na+和 270 ?g/g SO42-, 海水平均密度为1.

乙肝

乙肝五项指标临床意义

乙肝两对半又称乙肝五项，其检查意义在于：检查是否感染乙肝及感染的具体情况，区分大三阳、小三阳。乙肝五项每项意义是什么呢？

乙肝表面抗原（HBsAg）是乙肝病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。它可存在于患者的血液、唾液、乳汁、汗液、泪水、鼻咽分泌物、精液及阴道分泌物中。在感染乙肝病毒后2～6个月，当丙氨酸氨基转移酶升高前2～8周时，可在血清中测到阳性结果。急性乙肝患者大部分可在病程早期转阴，慢性乙肝患者该指标可持续阳性。

乙肝表面抗体（抗-HBs）一般简称表面抗体。当乙肝病毒侵入人体后，刺激人的免疫系统产生免疫反应，人体免疫系统中的B淋巴细胞分泌出一种特异的免疫球蛋白G，就是表面抗体，它可以和表面抗原特异地结合，然后在体内与人体的其他免疫功能共同作用下，可以把病毒清除掉，保护人体不再受乙肝病毒的感染，故称表面抗体为保护性抗体。有了表面抗体，证明人已产生了免疫力。人自然感染后或注射乙肝疫苗后，均可产生乙肝表面抗体；

乙肝e抗原（HBeAg），一般通称e抗原。它来源于乙肝病毒的核心，是核心抗原的亚成分，或是核心抗原裂解后的产物。e抗原是可溶性蛋白。当核心抗原裂解时，可溶性

离子色谱的定性定量分析

张海鸥

– – –

实验目的：了解离子交换色谱的原理以及离子色谱仪 的构造； 学习离子色谱仪的基本操作； 掌握利用离子色谱仪进行定量分析的方法。

离子色谱的相关介绍(五个方

面) 实验内容

一.离子色谱简介包括：定义、分析对象、分离方式、 检测方式

定义

利用色谱技术测定离子态物质的方法

色谱 : 用于分析的一种分离技术 气相色谱 (气-固分离，流动相为载气) 液相色谱 (液-固分离，流动相为液体) – HPLC (主要分离非极性的有机化合物) – IC (主要分离极性和部分弱极性的化合物) 离子态物质 : 在水溶液中电离，具有 + 或 – 电荷的 元素

阴离子 ： Cl-,NO2-,SO42-,CrO42- 阳离子 ： Na+,NH4+,Ca2+,Fe3+ 有机化合物：有机酸、有机碱等

离子色谱分析的对象物质离子类别无机阴离子 无机阳离子 有机阴离子 有机阳离子 天然有机物

主要离子种类卤素及简单阴离子、酸根阴离子、阳离子的配阴离子 碱金属、铵离子、碱土金属、过渡金属、稀土元素 有机酸、烷基硫酸、烷基磺酸、磷酸、多聚磷酸 胺、醇胺、铵盐、吡啶、生物碱、锍盐 糖、醇、酚、醛、维生素

生物物质

有机磷化合物、氨基酸、肽、核

信用评级方法及信贷风险管理

信用评级的定量分析方法

信用评级的定量分析方法主要是根据历史数据，通过经济分析指标，利用数量计算或建立数学模型，以分析资信状况好坏的方法，主要有以下五种方法：

1、比率分析法。是财务分析的主要方法，也是信用评级的主要方法。因为信用评级很多方面要采用财务分析中的比率指标。例如，总资产报酬率是利润总额对资产总额的比率，表示总资产的盈利能力；又如，流动比率是流动资产对流动负债的比率，反映了企业的短期偿债能力等等。通过这些比率计算，反映出企业财务指标相互之间的关系，可以判断企业对于资金的配置是否合理，可以使原来不可比的财务状况变成可比。例如企业利润总额，各厂之间无法比较，有的企业多，有的企业少，但是通过总资产报酬率这一比率指标，就可能衡量出企业总资产盈利能力的大小。评价资信状况同样如此，对单独一项数量指标，很难判断是好是坏，如果把它计算成为比率指标，就可能相互比较，作出正确的判断。

2、趋势分析法。是将同一单位连续几年的相同财务指标进行对比以观察其成长性的一种分析方法。通过趋势分析，可以了解企业在这一方面的发展趋势。例如销售收入增长率可以通过几年销售收入的对比求得，利润增长率可以通过几年利润总额的对比求得。通过销售收入增长率和利润

管理定量分析习题

1. 第一次作业 定量分析方法与公共管理 2. 定量分析的三个基本特征 3. 公共管理中的定量分析程序

4. 如何理解定量分析与定性分析的关系

系统与系统模型 5. 系统模型的定义

6. 为什么要使用系统模型 7. 系统模型的分类 8. 系统分析的定义 9. 系统分析的要素

第二次作业 数据与数据整理

10. 数据计量的三种尺度，以及具体的描述实例

11. 什么是定类数据、定序数据、定居数据、定比数据 12. 什么是数据整理，数据整理的原则 13. 数据整理的步骤

14. 如何进行数据分组，数据分组中的相关概念：频数、频率、组数、组距、组限、组中值、 15. 什么是等距分组、异距分组

16. 试设计一份统计表，并指出哪一部分是表头、列标题、行标题、主栏和宾栏

17. 对下表的数据完成整理，分出组数、确定组距、计算频率与累计频率，并绘制直方图 某车间50名工人日加工零件数分组表 零件数 (个) 107 108 110 112 113 114 115 117 118 频数 (人) 1 2 1 2 1 1 1 3 3 零件数 (个) 119 120 121 122 123 124 125 126 127 频数 (人) 1 2