生产环境微生物检测方法

环境中微生物的检测

微生物体积小、重量轻，因此可以到处传播以致达到“无孔不入”的地步。微生物种类繁多，对外界环境的适应能力又很强，只要生活条件合适，它们就可以迅速繁殖起来。因此，它们是自然界分布最广的一群生物。无论是南极、北极、高山、海洋、陆地、淡水，还是土壤、空气、动植物体内外，几乎到处都有它们的踪迹。

空气、水是维持人类生命不可或缺的物质。它们直接进入人体或与人接触。如果带有病原微生物，将成为传染疾病的媒介。通过空气和水中微生物的检验，对环境质量进行控制。

1.1 土壤中的微生物

1.1.1 土壤是微生物生活的良好环境

在自然界，土壤是微生物生活的良好环境。因为土壤具有微生物生长繁殖所必需的各种环境条件。 1.1.1.1 营养

土壤中有大量动植物残体、植物根系的分泌物、人和动物的排泄物，这些有机物为微生物提供了良好的碳源、氮源和能源；土壤中丰富的矿质元素可以满足微生物对矿质营养的要求。 1.1.1.2 水分和渗透压

土壤中具有一定的持水性，可为微生物提供水分；土壤的渗透压对微生物是等渗或低渗环境，有利于微生物摄取营养。 1.1.1.3 空气

土壤团粒结构中的小孔隙充满空气，土壤中氧的含量比大气少，平均为土壤空气体积的7%-8%。通气良好的

《环境微生物检测——采样方法》场景剧本

题目：环境微生物检测——采样方法

主题曲、插曲 待定 影片主要角色：

男1号 梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号 小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号 小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女）

男3号 ** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号： 小王，19岁，某学校的顶岗实习生

第一场：

场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水）

时间：上午

人物：前台靓女、客户，前台靓女 以及同事两三个。

从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。

客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？

客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。

前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。

前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。

客户：对水质都监测什么呀？

前台靓女：《建筑给水排水及采暖

1、如何从粪便污染的水体中将大肠杆菌群中的四种菌逐一鉴别出来？

答：使用鉴别培养基，大肠埃希氏菌，枸橼酸盐杆菌，产气杆菌，副大肠杆菌均能在远藤氏培养基上生长，但它们对乳糖的分解能力不同：前三者能分解乳糖，但分解能力有强有弱，大肠埃希氏菌分解能力最强，菌落呈紫红色带金属光泽；枸橼酸盐杆菌次之，菌落呈紫红或深红色；产气杆菌第三，菌落呈淡红色，副大肠杆菌不能分解乳糖，菌落无色透明。这样，这四种菌被鉴别出来了。

2、专性厌氧微生物为什么不需要氧？氧对专性厌氧微生物有什么不良影响？

答：因为专性厌氧微生物一遇到氧就会死亡。在氧气存在时，专性厌氧微生物代谢产生的NADP2和O2反应生成H2O2和NAD，而专性厌氧微生物没有过氧化氢酶，它将被生成的过氧化氢杀死。O2还可以产生游离O-2，由于专性厌氧微生物没有破坏O-2的超氧化物歧化酶而被O-2杀死。耐氧的厌氧微生物虽具有超氧化物歧化酶，能耐O2然而它们缺乏氧化氢酶，仍会被氧化氢杀死。

3、蓝细菌与其他光合细菌的代谢特征和特点有什么不同？各自在富营养池塘中的可能作用是什么？

答：（1）蓝细菌是一类含有叶绿素a、类胡萝卜素及藻胆蛋白等光合色素，进行光合作用并产生氧的原核微生物。光合细菌是又一类含有光合色素，进

1. 化妆品微生物检测样品的处理（摘至GB7918） 样品的采集

1.1

所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样时可适当增加样品包装数量。

1.2 供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不

得打开，防止样品被污染。

1.3 接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不

能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。

1.4 若只有一个样品而同时需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取

出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。

1.5 在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污

染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在符合生物安全要求的实验室中进行。

供检样品的制备

2.1 液体样品

2.1.1 水溶性的液体样品，可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，混匀后，

制成1：10检液。

2.1.2 油性液体样品，取样品10g，先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL 灭

菌的吐温80，在40℃～44℃水浴中振荡混合10

第一篇 微生物学基础

第一章 非细胞结构的超微生物——病毒

1 病毒是一类什么样的微生物？它有什么特点？

答：病毒没有合成蛋白质的机构——核糖体，也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统，不具独立的代谢能力，必须专性寄宿在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体。其特点是：病毒在活的敏感宿主细胞内是具有生命的超微生物，然而，在宿主体外却呈现不具生命特征的大分子物质，但仍保留感染宿主的潜在能力，一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征，重新感染新宿主。

2病毒的分类依据是什么？分为哪几类病毒？

答：依据是：病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、核酸的类型、病毒粒子的大小、病毒的结构、有或无被膜等进行分类的。根据转性宿主分类：有动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒（噬放线菌体）、藻类病毒（噬藻体）、真菌病毒（噬真菌体）。按核酸分类：有DNA病毒和RNA病毒。

3病毒具有什么样的化学组成和结构？

答：病毒的化学组成有蛋白质和核酸。还含有脂质和多糖。整个病毒体分两部分：蛋白质衣壳和核酸内芯，两者构成核衣壳。蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳。核酸内芯有两种：核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（

《微生物学检验》习题集

绪论部分

一、名词解释

微生物、病原微生物、原核细胞型微生物。 二、填空题

1.按照结构、化学组成不同将微生物分成 、 、 三型。

原核细胞型微生物包括 、 、 、 、 和 ； 属于非细胞性微生物。 2.发明显微镜的人是 。

3．微生物学的创始人是 和 。 三、选择题 A型题

1.非细胞型微生物是

A.支原体 B.放线菌 C.衣原体 D.细菌 E.以上都不是 2.原核细胞型微生物和真核细胞型微生物的不同主要是

A.单细胞 B.原始核，细胞器不完善 C.在人工培养基能上生长 D.有细胞壁 E.对抗生素敏感 B型题

A.Louis Pasteur B.Joseph

一、空气中微生物的检测方法------细菌总数

（营养琼脂，121℃高压灭菌20min，培养时间37℃,48h） 1.两种方法

（1）撞击法(二级或者六级微生物采样器) （2）自然沉降法（暴露5min）

采样：梅花布点，高度：1.2~1.5m；离墙：1m。 二、茶具微生物检验方法 （一）细菌总数

1、生理盐水的制法：将氯化钠（8.5g）溶解于蒸馏水（1000mL）中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。

2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈（1~1.5cm），用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。 3、检验程序：

检样→各1mL加入两块灭菌平皿（若污染严重，可十倍递增稀释）→37℃，48h培养→菌落计数→报告 4、单位：cfu/cm2。 （二）大肠菌群

1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液（双料的，每管10mL，115℃高压灭菌15min） 2、检测方法：发酵法（具体内容课本11页） 3、检样（测定细菌总数余下的样品）

4、革兰氏染色过程：（阳性菌显紫色，阴性菌显红色） （1）初染：1min，水洗； （2）碘染：1min，水洗； （3）脱色：30s，水洗；

合成氨工艺清洁生产

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　河南化工　　　　　　　　　　　2010年3月　第27卷　第3期(下)　　　　　　HENANCHEMICALINDUSTRY

11

航空燃油系统微生物污染检测方法研究

崔艳雨1,陈世2

(1.中国民航大学机场学院油气储运工程系;2.中国民航大学人事处)

3

【摘要】微生物污染对飞机燃油系统的危害主要包括腐蚀设备、阻塞过滤器、干扰仪器仪表等。对现有的微生物检测方法进行了分析和比较,提出了综合应用各种方法的建议,对于尽早发现微生物问题,保证航空安全,具有一定的意义。

【关键词】微生物污染;航空燃油;检测;理化指标【中图分类号】X172

【文献标识码】B

【文章编号】1003-3467(2010)06-0011-02

1概述

航空燃油的质量是飞行安全的重要环节,是飞机上的重

易受微生物污染。及时发现微生物过量繁殖造成的污染,尽快采取措施,对于降低损失,确保航空安全,具有重要意义。

2

要“部件”,一旦它出了问题,将会给飞行带来灾难性的后果。

现有研究更多关注的是燃油中的外来杂质,如金属屑和纤维等固体颗粒物,很少涉及到其中的微生物的影响。随着人们对飞机燃油系统污染状态研究监测的不断深入,发现其中的很多问题,均

空气中微生物检测

一、 实验目的

本实验用灭菌后的培养皿在空气中采样后并培养一段时间，测定空气中的微生物，其实验意义在于：

(1)了解空气中微生物的分布状况。

(2)比较普通实验室和无菌室空气中存在的微生物的数量和种类。 (3)验证无菌操作法在微生物学实验中的重要性。 二、 实验原理

空气是人类保持正常活动的物质条件，并与人类键康有着极为密切的关系，随着社会进入信息时代，空气微生物采样检测也得到了飞速发展，已研制出快速、敏感、特异，自动化程度高的各类仪器，为保持高质量的空气环境，应使用正确先进的空气监测方法。

在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。

空气中微生物的采集方法很多，主要有用空气微生物采样器采样监测和用自然沉降采样法进行采样。本文就各类采样方法的性能做了介绍，使能正确选用各类采样方法。空气微生物采样主要涉及采样器、采样介质、采样方法及检验程度 4 个方面。 空气微生物采样器主要有：撞击式采样器、过滤式空气采样器、离心式空气采样器、气旋式采样器、静电沉降采样器等等。

当空气中个体微小的微生

《环境微生物的检测与分析》实验指导

编者：吴方丽 李欧

浙江理工大学生命科学学院

二零一四年十二月 中国 浙江 杭州

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目 录

实验一 土壤微生物拮抗菌的分离与测数 ..................................... 3 实验二 拮抗菌的鉴定与保藏 .............................................. 14 实验三 变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析技术及其在微生物种群多样性研究中的应用 29 附录 各种培养基、试剂的配制 .............................................. 39

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实验一 土壤微生物拮抗菌的分离与测数

一、实验目的

1、熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。 2、初步掌握从土壤中分离微生物和测数的基本方法。 3、了解培养基的配制原理，掌握其配制过程和方法。 4、掌握实验室几种灭菌方法及技术。 5、掌握无菌操作技术。 6、了解平板菌落计数的原理。

7、识别土壤中几大类微生物的菌落特征。

8、学习拮抗作用的试验方法，观察微生物间的拮抗现象及抗生素的抗菌作用。

二、实验原理

自然条件