吸光光度法和分光光度法

新疆医科大学

卫生化学教学大纲

（供预防医学类专业用）

编写者：哈及尼沙

药学院分析/药分教研室

2012年12月

1

I 前言

课程名称：卫生化学

英文名称：Sanitary Chemistry 课程类别：专业基础课（必修） 面向专业：预防医学专业（本科）

选用教材：《卫生化学》（第六版）， 郭爱民主编 出版单位：人民卫生出版社

学时：54学时（理论课36学时，实验课18学时）

卫生化学（Sanitary chemistry）是高等医学教育预防医学专业学生必修的专业基础课。是探讨和研究预防医学中所需要的检验方法、理论和新分析技术的一门学科。其主要任务是为学生讲授专业课和生产实习所必需的分析课学基础理论、基本知识及基本技能。在医学教育中，卫生化学与分析化学、仪器分析和统计学等前期基础课程有着密切联系，并为环境卫生学、营养与食品卫生学、劳动卫生学及流行病学等后期专业课程提供基础理论和相关知识。

本大纲适用于预防医学类专业五年制汉、民族本科学生使用。现将大纲使用中有关问题说明如下：

1、为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容

紫外可见分光光度法

一．选择题

1．.在紫外-可见分光光度计中, 强度大且光谱区域广的光源是 ( ) (1) 钨灯 (2) 氢灯 (3) 氙灯 (4) 汞灯

2．紫外-可见吸收光谱曲线呈高斯分布的是 ( ) (1)多普勒变宽 (2)自吸现象 (3)分子吸收特征 (4)原子吸收特征 3．.某化合物的浓度为1.0 ×10-5mol/L,在?max=380nm时, 有透射比为50%, 用1.0cm吸收池, 则在该波长处的摩尔吸收系数?max /[L/(mol?cm)]为 ( ) (1) 5.0 ×104 (2) 2.5 ×104 (3) 1.5 ×104 (4) 3.0 ×104

4．下列结构中哪一种能产生分子荧光？ ( )

(1)OH(2)NO2(3)COOH(4)I

5．按一般光度法用空白溶液作参比溶液，测得某试液的透射比

红外分光光度法

一、填空题

1. 红外光谱是介于 与 之间的电磁波，其波长范围是 。

2. 化合物的红外吸收曲线可由 来描述。 3. 不同分子在红外谱图中出现的吸收峰位，是由 所决定的。

-1

4.乙醛CH3CHO的vc=0为1731cm，若醛上氢被一氯原子所取代形成CH3—C—Cl后，则vc=0向 移动。

-1

5. 丙酮的vc=0为l715cm，若其中一个甲基被一苯基所取代形成苯乙酮后，则vc=0向 移动。

6. 化合物的vc=0为l663cm，若8位上氢被甲基取代后则vc=0由于 因而频率 。

7. 红外光谱中所说的特征频率区是指 的区间，其特点是 。

-1-1

8. 苯甲醛的红外光谱中出现了2780cm和 2700cm两个吸收峰，是由 而产生的。

9. 分子内形成氢键与分子间形成氢键一样会使基团的振动频率向低波数移动。但是分子间氢键 而分子内氢键

新疆医科大学

卫生化学教学大纲

（供预防医学类专业用）

编写者：哈及尼沙

药学院分析/药分教研室

2012年12月

1

I 前言

课程名称：卫生化学

英文名称：Sanitary Chemistry 课程类别：专业基础课（必修） 面向专业：预防医学专业（本科）

选用教材：《卫生化学》（第六版）， 郭爱民主编 出版单位：人民卫生出版社

学时：54学时（理论课36学时，实验课18学时）

卫生化学（Sanitary chemistry）是高等医学教育预防医学专业学生必修的专业基础课。是探讨和研究预防医学中所需要的检验方法、理论和新分析技术的一门学科。其主要任务是为学生讲授专业课和生产实习所必需的分析课学基础理论、基本知识及基本技能。在医学教育中，卫生化学与分析化学、仪器分析和统计学等前期基础课程有着密切联系，并为环境卫生学、营养与食品卫生学、劳动卫生学及流行病学等后期专业课程提供基础理论和相关知识。

本大纲适用于预防医学类专业五年制汉、民族本科学生使用。现将大纲使用中有关问题说明如下：

1、为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容

第六节 分光光度法

(一)基础知识 分类号：W6-0 一、填空题

1．分光光度法测定样品的基本原理是利用朗伯—比尔定律，根据不同浓度样品溶液对光信号具有不同的 ，对待测组分进行定量测定。 答案：吸光度(或吸光性，或吸收)

2．应用分光光度法测定样品时，校正波长是为了检验波长刻度与实际波长的 ，并通过适当方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的光度测定误差。 答案：符合程度

3．分光光度法测定样品时，比色皿表面不清洁是造成测量误差的常见原因之一，每当测定有色溶液后，一定要充分洗涤。可用 涮洗，或用 浸泡。注意浸泡时间不宜过长，以防比色皿脱胶损坏。 答案：相应的溶剂 (1+3)HNO3 二、判断题

1．分光光度计可根据使用的波长范围、光路的构造、单色器的结构、扫描的机构分为不同类型的光度计。( ) 答案：正确

2．应用分光光度法进行试样测定时，由于不同浓度下的测定误差不同，因此选择最适宜的测定浓度可减少测定误差。一般来说，透光度在20％～65％或吸光值在0.2～0.7之间时，测定误差相对较小。(

原子吸收分光光度法 1原子吸收分光光度法基本原理：原子吸收光谱分析是利用分析处于基态的待测原子蒸汽对特征辐射的吸收来测定样品中该元素含量的一种办法。

2共振吸收线：原子从基态激发到能量最低的激发态，产生的谱线称为共振吸收线。由于元素的原子结构和外层电子排布不同，吸收的能量不同，共振吸收线各具有特征性，这种共振线称为元素的特征谱线，是元素所有谱线中最灵敏的谱线。

3原子吸收谱线轮廓和谱线宽度：谱线轮廓是指谱线具有一定频率范围和形状。吸收线轮廓常用吸收系数Kv随频率（或波长）的变化曲线来描述，而原子吸收线的特点是用谱线中心频率（由各原子能级分布特征所决定）、半宽度（最大吸收系数一半处峰的频率差）和强度来表征。

4原子吸收分光光度计：主要部件：瑞线光源、原子化器、单色器、检测器。 ①光源：作用是发射待测元素的特征曲线，发射辐射波长的半宽度要明显小于吸收线的宽度，辐射强度大，稳定且背景信号小。常用空心阴极灯。②原子化器：将试样中的待测元素转变成原子蒸气。主要有火焰原子化器和无火焰原子化器两类。③单色器：衍射光栅是常用的分光元件。单色器的作用是将所需的共振吸收线与邻近干扰线分离。④检测系统：作用

第十章 吸光光度法

一、单项选择题（共25题）

10.1.1 在光度分析中，以1cm的比色皿测量透光率为T，若比色皿的厚度增加一倍，透过率为（ ）

A、T/2 B、T2 C、2T D、T 10.1.2 相同质量Fe3+和Cd2+（Mr（Fe）=55.85，Mr（Cd）=112.4），各用一种显色剂在同样体积溶液中显色，用分光光度法测定，前者用2cm比色皿，后者用1cm比色皿，测得吸光度相同，则两种有色络合物的摩尔吸光系数ε为（ ） A、基本相同 B、Fe3+为Cd2+两倍 C、Cd2+为Fe3+两倍 D、Cd2+为Fe3+四倍 10.1.3 以下说法错误的是（ ）

A、摩尔吸光系数ε随浓度增大而增大 B、吸光度A随浓度增大而增大 C、透过率T随浓度增大而增大 D、透过率T随比色皿加厚而减小 10.1.4 Ni（NH3）42+络离子为绿色溶液，其吸收最大的光的颜色为（ ） A、绿色 B、红色 C、紫色 D、黄色 10.1.5 以下说法

第20章 吸光光度法

思 考 题

1. 什么叫单色光？复色光？哪一种光适用于朗伯－比耳定律？

答：仅具有单一波长的光叫单色光。由不同波长的光所组成光称为复合光。朗伯--比耳定律应适用于单色光。

2. 什么叫互补色？与物质的颜色有何关系？

答：如果两种适当的单色光按一定的强度比例混合后形成白光，这两种光称为互补色光。当混合光照射物质分子时，分子选择性地吸收一定波长的光，而其它波长的光则透过，物质呈现透过光的颜色，透过光与吸收光就是互补色光。

3. 何谓透光率和吸光度？ 两者有何关系？

答：透光率是指透射光强和入射光强之比，用T表示 T=

It I0吸光度是吸光物质对入射光的吸收程度，用A表示，A?εbc，其两者的关系 A??lgT

4. 朗伯-比耳定律的物理意义是什么？ 什么叫吸收曲线？ 什么叫标准曲线？

答：朗伯--比耳定律是吸光光度法定量分析的理论依据，即吸光物质溶液对光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。数学表达式为 A??lgT?εbc

吸收曲线是描述某一吸光物质对不同波长光的吸收能力的曲线，即在不同波长处测得吸光度，波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图即可得到吸收曲线。

标准曲线是

一、选择题

1 物质的紫外 – 可见吸收光谱的产生是由于 ( B )

A. 原子核内层电子的跃迁 B. 原子核外层电子的跃迁 C. 分子的振动 D. 分子的转动 2 紫外–可见吸收光谱主要决定于 ( C )

A. 原子核外层电子能级间的跃迁 B. 分子的振动、转动能级的跃迁 C. 分子的电子结构 D. 原子的电子结构

3 分子运动包括有电子相对原子核的运动（E电子）、核间相对位移的振动（E振动）和转动（E转动）这三种运动的能量大小顺序为 （ A ）

A. E电子>E振动>E转动 B. E电子>E转动>E振动 C. E转动>E电子>E振动 D. E振动>E转动>E电子

4 符合朗伯-比尔定律的一有色溶液，当有色物质的浓度增加时，最大吸收波长和吸光度分别是 ( C )

A. 增加、不变 B. 减少、不变 C. 不变、增加

第六章吸光光度法

化学分析与仪器分析方法比较化学分析：常量组分(>1%), Er 0.1%~0.2%准确度高

依据化学反应, 使用玻璃仪器

仪器分析：微量组分(<1%), Er 1%~5% 灵敏度高 依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器

6.1 吸光光度法的基本原理吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有 选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。

特点 :– 灵敏度高：测定下限可达10-5~10-6mol/L, 10-4 %~10-5 % – 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2~5% (精密光度计为1~2%) – 操作简便快速 – 应用广泛 3

研究物质在 紫外(200-400nm)、可见光区 (400-800nm) 的分子吸收光谱 的分析方法称为 紫外-可见分光光度法。 这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道 上的电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和 有机物质的定性和定量测定。

光学光谱区远紫外(真空紫外)

近紫外 可见

近红外

中红外

远红外

10nm~200nm 200nm ~380nm

380nm 780 nm ~ 780nm ~ 2.5 m

2.5 m ~ 50 m

50 m ~300 m

分子吸收光谱的产生分子内部运动的方