试剂盒抽提质粒rna如何去除

质粒抽提试剂盒基本原理

碱裂解法从大肠杆菌中制备质粒，是每个分子生物学实验室都要用到的常规技术，但是大家对碱法抽提质粒的原理知之甚少。

一、碱法抽提质粒用到的三种溶液及硅酸纤维膜（超滤柱）

溶液I：50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0； 溶液II：0.2 N NaOH / 1% SDS；

溶液III：3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸/75%酒精。

二、溶液I中各成分的作用 葡萄糖是使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底

部，因此有些试剂厂商的溶液I没有葡萄糖成分；EDTA是Ca和Mg等二价金属离子的螯合剂，其主要目的是为了螯合二价金属离子从而达到抑制DNase的活性。

2+

2+

三、溶液II中各成分的作用 NaOH主要是为了溶解细胞，释放DNA，因为在强碱性

的情况下，细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微囊）结构的变化；但NaOH易和空气中的CO2发生反应，形成碳酸钠，降低了NaOH的碱性，所以必须用新鲜的NaOH。SDS与NaOH联用，其目的是为了增强NaOH的强碱性，同时SDS能很好地结合蛋白，产生沉淀。这一步要记住两点：第一，时间不能过长，因为在这样的

质粒抽提试剂盒基本原理

碱裂解法从大肠杆菌中制备质粒，是每个分子生物学实验室都要用到的常规技术，但是大家对碱法抽提质粒的原理知之甚少。

一、碱法抽提质粒用到的三种溶液及硅酸纤维膜（超滤柱）

溶液I：50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0； 溶液II：0.2 N NaOH / 1% SDS；

溶液III：3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸/75%酒精。

二、溶液I中各成分的作用 葡萄糖是使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底

部，因此有些试剂厂商的溶液I没有葡萄糖成分；EDTA是Ca和Mg等二价金属离子的螯合剂，其主要目的是为了螯合二价金属离子从而达到抑制DNase的活性。

2+

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三、溶液II中各成分的作用 NaOH主要是为了溶解细胞，释放DNA，因为在强碱性

的情况下，细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微囊）结构的变化；但NaOH易和空气中的CO2发生反应，形成碳酸钠，降低了NaOH的碱性，所以必须用新鲜的NaOH。SDS与NaOH联用，其目的是为了增强NaOH的强碱性，同时SDS能很好地结合蛋白，产生沉淀。这一步要记住两点：第一，时间不能过长，因为在这样的

产品简介

本试剂盒对传统的碱裂解法进行了优化，可以在8 min内获得高质量质粒DNA。优化的裂解液可以使得离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA。以下操作步骤适用于提取1-4 ml过夜培养的大肠杆菌，质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件，细胞的裂解，质粒拷贝数，质粒的稳定性，抗生素等因素有关。

使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。

提取得率

质粒类型 菌液量 得率 质粒

pBR322, pACYC及其衍生载体

低拷贝 1-4 ml 3-10 μg pSC101及其衍生载体，

SuperCos, pWE15 高拷贝

1-4 ml

6-24 μg

pTZ, pUC, pBS, pGM-T

注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

1． 溶液P1在使用前先加入RNase A和TIANRed（将试剂盒中提供的RNase A和TIANRed全

部加入），混匀，置于2-8℃保存。

2． 使用前请先检查溶液P2和P5是否出现浑浊，如有混浊现象，可在

微生物检测试剂盒

核

酸 产品编

项目

种号 类

产品名称

方 法

规 格 价 格

SA-6131 沙门氏菌(Spp)核酸检测试剂盒

沙门氏菌 DNA

SA-6132 沙门氏菌(Spp)核酸检测试剂盒 副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂

SA-7051

副溶血性盒

DNA

弧菌 副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂

SA-7052

盒 SA-7061 霍乱弧菌(VC)核酸检测试剂盒

霍乱弧菌 DNA

SA-7062 霍乱弧菌(VC)核酸检测试剂盒 大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂

SA-7071

盒

大肠杆菌 DNA

大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂

SA-7072

盒

单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂

SA-7081

单增李斯盒

DNA

特菌 单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂

SA-7082

盒

金黄色葡萄球菌(MRSA)核酸检测

SA-7091

金黄色葡试剂盒

DNA

萄球菌 金黄色葡萄球菌(MRSA)核酸检测

SA-7092

试剂盒

口腔变形链球菌(SM)核酸检测试

SA-7111

口腔变形剂盒

DNA

链球菌 口腔变形链球菌(SM)核酸检测试

SA-7112

剂盒

幽门螺旋杆菌(HP)核酸检测试剂

SA-7121

幽门螺旋盒

DNA

杆菌 幽

质粒提取实验步骤

摇菌：（先倒入锥形瓶再消毒）

1 将配好的LB培养液高温消毒后，放入40C冰箱，冷却；

2 在酒精灯旁操作，向锥形瓶中加入100mlLB，加入150ul氨苄（看抗性）； 3 再向锥形瓶中挑入少量菌（液体：60~80ul；固体：绿豆大小）； 4 放入摇床，摇一夜。

LB培养液的配方

1）胰化蛋白胨（） 10g/L(tryptone) 2）酵母提取物 5g/L（yeast extract） 3）Nacl 10g/L

4）去离子水（双蒸水）950ml 终体积为1000ml 5）配好后，需高温消毒（纱布或报纸包）

质粒提取：QIAGEN plasmid Midi kit（25）试剂盒

准备2个50mlEP管，提2个质粒一共要6个50mlEP管。 使用前注意事项：

1）P1在使用前要加入RNAase，终浓度为100ug/ml，P1一直放40C。 2）事先溶解P2（天冷时P2会出现沉淀，应放37 0C水浴溶解）。 3）预冷至P1、P3（P2作用为裂解细胞）至4 0C。

4）提质粒前一天消毒50ml，20ml管子及2mlEP管及LB，干燥待用。

5）摇菌和保菌都要开酒精灯，尽量保持

产品详细说明书

小鼠IL-2定量分析酶联免疫检测试剂盒

本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-2浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的帮助。

如您有其它需求，请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。

IL-2简介：

IL-2是一种主要由T淋巴细胞产生的多效性的细胞因子，成熟的鼠IL-2是149个氨基酸的糖蛋白，由169个氨基酸的前体蛋白通过剪切而成为成熟的蛋白。

IL-2在抗体刺激引起的不同反应阶段的T细胞，自然杀伤细胞和B细胞的细胞增殖方面起重要的作用，此外，IL-2还可调节γ干扰素、主要组织相容性抗原的表达，刺激活化的B细胞的增殖和分化，提高自然杀伤细胞的活性和抑制粒细胞/巨噬细胞的的增殖。IL-2还可诱导少胶突细胞的增殖和分化。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-2的浓度。小鼠IL-2捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的小鼠IL-2会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-2抗体后，抗小鼠IL-2抗体与小鼠IL-2接合，形成夹心的免

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TRIpure Reagent LS 液体样本总RNA提取试剂

目录号：RN02 ?

试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成

TRIpure LS（4℃避光）

(RN0201)

50 ml

(RN0202)

100 ml

? 储存事项：

TRIpure LS在室温下能稳定保存12个月。尽管如此，为达到最佳效果，我们建议保存在2~8°C的环境下。

? 重要提示：

本品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。

? 1.

注意事项：

样品用TRIpure LS匀浆后，如果不即刻加入氯仿之前，，置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。

2. 若下游实验对DNA非常敏感，建议用 RNase free

一、试剂盒打开后需要准备的工作

1、Proteinase K（蛋白酶K）的溶解

①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解

②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管，每管100ul～200ul

③将分装好的Proteinase K放入-20℃冰箱中保存，使用期限为12个月 2、组织抑制剂（Inhibitor Removal buffer）的调配

加入20ml无水乙醇（absolute ethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩 3、洗液（wash buffer）的调配

加入80ml无水乙醇（absolute ethanol）颠倒混匀并在空白方框处打钩

二、组织DNA提取（试剂盒）

1、组织样品处理与消化

①将采集来的样品剪碎（≤0.1cm）洗净保存液。

②加入组织破解液Tissue-lysis 200ul 蛋白酶K 40ul然后放入55℃水浴锅内3

个小时使其充分消化。

2、DNA提取

①在消化好的组织样品中加入结合液binding buffer 200ul 然后放入70°水浴

锅中10分钟。

②再加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中，然后离心8000g一分钟。 ③倒掉底液，加500ul组织抑制剂Inhibitor

基因结构和功能系列

CAT#:131039-100 低温运输，-20℃保存 即用型EMSA试剂盒 Electrophoretic Mobility Shift Assay Kit

使用手册V1.0

产品及特点 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay），也称gel shift，是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通过EMSA可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况，从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。其原理如下： 本产品具有下列特点： 1. 一站式，使用方便，本试剂盒提供了进行EMSA实验的探针标记、蛋白和DNA结合以及EMSA上样液等主要试剂，使EMSA实验变得简单方便。 2. 非特异性结合低，EMSA结合缓冲液中含有poly(dI-dC)等有效成分，其中poly(dI-dC)的浓度经过优化，可以很好的消除蛋白和标记探针

产品详细说明书

小鼠IL-2定量分析酶联免疫检测试剂盒

本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-2浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的帮助。

如您有其它需求，请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。

IL-2简介：

IL-2是一种主要由T淋巴细胞产生的多效性的细胞因子，成熟的鼠IL-2是149个氨基酸的糖蛋白，由169个氨基酸的前体蛋白通过剪切而成为成熟的蛋白。

IL-2在抗体刺激引起的不同反应阶段的T细胞，自然杀伤细胞和B细胞的细胞增殖方面起重要的作用，此外，IL-2还可调节γ干扰素、主要组织相容性抗原的表达，刺激活化的B细胞的增殖和分化，提高自然杀伤细胞的活性和抑制粒细胞/巨噬细胞的的增殖。IL-2还可诱导少胶突细胞的增殖和分化。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-2的浓度。小鼠IL-2捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的小鼠IL-2会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-2抗体后，抗小鼠IL-2抗体与小鼠IL-2接合，形成夹心的免