红掌的组织培养

红掌

红 掌 组 织 培 养 与 快 速 繁 殖

蔡维藩

广东 汕头 515041

红掌叶片在新代培养基上的分化能力与品种和叶片部位有关

佳诱导培养基为改良Nitsch (NH4NO3 200mg/L) + 6-BA 1.0mg/L + 2,4-D 0.1mg/L

生根培养基为Nitsch (NH4NO3 720mg/L)

红掌

中图分类号

快速繁殖

A 文章编号

最

Anthurium scherzerianumÔ-²úµØÖк£Ò»´ø

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脱分化 外植体 继代培养 植物细胞全能型 种质 褐变 人工种子 器官培养 .胚胎培养 植物组织培养． 灭菌： 驯化

愈伤组织培养： 玻璃化现象 无病毒苗． 胚状体． 愈伤组织． 消毒

植物生长调节物质 接种 细胞悬浮培养 脱毒苗

褐化． 再分化．

1 植物组培对象分为 ， ， ,细胞培养，原生质体培养几种类型。 2 培养基中有机态氮素营养主要是 和 MS

3 种质保存的方式有 ， ， 。 4在组织培养中，不耐热对的用 法灭菌，耐热的培养基用 法灭菌 5幼胚培养的三种常见方式是 ， ， 。

6 去除植物病毒的主要方法是 ， ， 。 7 愈伤组织的形成大志经历 ， ， 三个时期 8植物组培过程中，最常用的培养基是

专题三 课题1 菊花的组织培养 一、基础训练：

1.下列实例中能体现细胞全能性的是( )

①用培养基培养的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株 ②植物用种子进行繁殖 ③用烟草组织培养的单个组织培育出了可育的完整植株 ④．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 ⑤．紫色糯性玉米种子培育出植株 ⑥．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 ⑦．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株

A．①②⑥⑦ B．①③⑤ C．②③ D．①②③④⑤ 2.植物组织培养过程中的脱分化是指( )

A．植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程

C．植物的器官、组织或细胞通过离体培养产生愈伤组织的过程 D．取植物的枝芽培育成一株新植物的过程

3.用菊花的茎尖植物组织培养可培育出试管苗。下面关于这一过程的说法正确的是( ) A.进行培养时，一次性加足营养物质以防止污染 B.整个培养过程应在光下进行，有利于长叶

C.要根据培养过程的实际情况，更换培养基 D.整个培养过程都应在密闭条件下进行，以免杂菌的污染

4.污染是植

脱分化 外植体 继代培养 植物细胞全能型 种质 褐变 人工种子 器官培养 .胚胎培养 植物组织培养． 灭菌： 驯化

愈伤组织培养： 玻璃化现象 无病毒苗． 胚状体． 愈伤组织． 消毒

植物生长调节物质 接种 细胞悬浮培养 脱毒苗

褐化． 再分化．

1 植物组培对象分为 ， ， ,细胞培养，原生质体培养几种类型。 2 培养基中有机态氮素营养主要是 和 MS

3 种质保存的方式有 ， ， 。 4在组织培养中，不耐热对的用 法灭菌，耐热的培养基用 法灭菌 5幼胚培养的三种常见方式是 ， ， 。

6 去除植物病毒的主要方法是 ， ， 。 7 愈伤组织的形成大志经历 ， ， 三个时期 8植物组培过程中，最常用的培养基是

- 1 - 菊花花瓣组织培养

摘要：菊花在花卉生产中占有重要地位，而花瓣组织培养，可以缩短植物生长周期，

还可使再生植株特性的变异更加丰富多彩，在菊花育种研究中涉及的细胞杂交和基因转移等生物技术的应用中具有重要意义。本实验是利用黄色菊花花瓣为外植体。在诱导培养中，控制6-BA的浓度1.0 mg/l ，NAA的浓度0.3mg/l，将已分化的细胞脱去分化状态，使其恢复到未分化的分生状态，然后进行再分化，最终形成完整的植株。 关键词：菊花 激素诱导 愈伤组织 分化 1．前言

1．1实验背景

植物组织培养（tissue culture）是二十世纪初兴起的一项高新生物技术，至今已经有一百多年的历史。和植物组织培养的历史相比，中国的在这方面的研究起步算是比较早的，在二十世纪四十年代在这方面就有所研究，但是大范围的发展起来还是始于二十世纪七十年代的花药培养。

利用组织培养可以快速繁殖保存某些稀有植物或有较大经济价值的植物，挽救濒于灭绝的动植物，还可以为细胞杂交和基因转移等生物技术在育种研究中的应用提供帮助。随着人们生活质量的提高，人们甚至利用组织培养的花卉等发展装饰产业，作为一项实验技术，植物

专题三 课题1 菊花的组织培养 一、基础训练：

1.下列实例中能体现细胞全能性的是( )

①用培养基培养的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株 ②植物用种子进行繁殖 ③用烟草组织培养的单个组织培育出了可育的完整植株 ④．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 ⑤．紫色糯性玉米种子培育出植株 ⑥．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 ⑦．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株

A．①②⑥⑦ B．①③⑤ C．②③ D．①②③④⑤ 2.植物组织培养过程中的脱分化是指( )

A．植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程

C．植物的器官、组织或细胞通过离体培养产生愈伤组织的过程 D．取植物的枝芽培育成一株新植物的过程

3.用菊花的茎尖植物组织培养可培育出试管苗。下面关于这一过程的说法正确的是( ) A.进行培养时，一次性加足营养物质以防止污染 B.整个培养过程应在光下进行，有利于长叶

C.要根据培养过程的实际情况，更换培养基 D.整个培养过程都应在密闭条件下进行，以免杂菌的污染

4.污染是植

组织培养 复习资料

绪论：

1、植物组织培养的概念：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。又称植物离体培养。

2、简史（重要人物的学说及其重大贡献）

2-1探索阶段：⑴德国植物生理学家-Haberlandt是植物组培的先驱；

2-2奠基阶段：

2-3迅速发展和逐步实用化阶段：

3、组培的应用（主要是与农业的关系）：a 快速繁殖优良苗木；b培养无性植株；

第一章第二章

1、组织培养实验室的结构与功能、设备

1）组培实验室结构：包括化学实验室或准备室、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。 c、育种上应用；d、工厂化育苗

2）功能及设备

（1）准备室：用于培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。

设备：冰箱、天平、高压灭菌锅、pH计、干燥箱、实验台、水槽、凉干架、药品柜、离心机、水浴锅、微波炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、移液器、各种玻璃器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）及培养基分装用品等。

专题三 课题1菊花的组织培养学案

班级 姓名 小组

一株菊花的一段嫩茎插入土中,不久就会生根发芽,长成完整的植株,开出绚丽的花朵.自然界中多数植物都有这样的分身法.科学家利用植物这一特点,通过实验室培养技术,能使优良植株快速繁殖,并保持其优良性状.怎样使菊花一年四季连续开花呢?

学习任务:

一、阅读课本基础知识部分回答

1.阅读课题背景,找出细胞表现出全能性应具备哪些条件?植物组织培养的理论基础是什么?并回忆细胞全能性的概念。

阅读（一）植物组织培养的基本过程回答 2.写出细胞分化的概念及回忆细胞分化的实质。

3.观察课本P32页图，总结植物组织培养的基本过程;愈伤组织的概念及特点;脱分化与再分化的概念。

阅读（二）影响植物组织培养的因素回答

4.不同植物组织的培养，培养难易程度如何?同一植物组织的不同部分培养呢？举例说明。

5.离体的植物组织和细胞，对_____________等条件的要求相对特殊，需要适宜的培养基。常用的一种培养基是 培养基。简述此培养基的主要成分并尝试说出以上培养基各营养物质的作用

植物组织培养试题

一、名词解释

1. 外植体

2. 愈伤组织培养

3. 单倍体育种

4. 液体悬浮培养

5. 玻璃化现象

1、外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子

等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。

2、热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。

3、平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。

4、消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。

5、玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。

1、脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。

2、灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。

3、褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响材料的培养。 4、纸桥培养：将培

拟南芥组织培养

一、种子消毒：

方法一：将拟南芥种子置于1 .5 ml eppendorf 管(微量离心管)中，加入1 ml 蒸馏水，4C春化3 d，70 %（v／v ）乙醇1mi n、7 %（v／v ）次氯酸钠10 mi n 浸泡消毒，并用无菌水冲洗5 次。

方法二：在超净工作台内，用无菌蒸馏水浸泡1 min，然后用80％乙醇消毒90s，最后用无菌蒸馏水冲洗3～5次备用。

消毒完毕的种子可以用200ul的tips吸去洗涤液，然后在超净工作台上挥发掉残余水分、洗涤液。

方法三、取野生型拟南芥种子放人离心管内，75％乙醇清洗后，无菌蒸馏水清洗1—2次，转入无菌离心管；5％次氯酸钠溶液浸泡5—6 min，用无菌蒸馏水清洗3～4次，加入1 ml无菌水，用移液枪接种。 二、选用的培养基

选用1/2MS培养基对种子进行培养。（MS和1/2MS都可以，1/2MS就是大量元素减半，其他东西和ms培养基是一样的量。糖可以加，会长得比较好，但是也很容易污染。如果在平板上要生长时间比较长，需要做一些实验的，比如根的发育，最好不要加。）也可以用MS+30 g／L蔗糖的固体培养基。（我想两种培养基都接种上，比作对比确定好坏）。

MS培养基