巨噬细胞的吞噬作用实验报告

四川大学实验报告

题目：巨噬细胞吞噬作用的观察

实验目的

1. 通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非

特异性免疫中的功能。

2. 掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3. 学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

实验原理

1. 向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细

胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养” 。连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。

2. 台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。活细胞的细胞质膜对台

盼蓝有不透过性。巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。是一种溶酶体染色的方法。

3. 当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小

鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程

1/ 7

四川大学实验报告

．实验材料及设备

1. 实验材料：

a) 连续2~3 天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只

b) 鸡红细胞悬液

c) 生理盐水

2. 实验设备：

a) 普通光学显微镜

b) 载玻片、盖玻片若干

c) 注射器

d) 染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等

2/ 7

实验四 小鼠巨噬细胞吞噬的观察 一、实验目的： 实验目的： 通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验， 通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验， 了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。 了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。

二、实验原理： 实验原理： 高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞，具有吞噬的功能。它们广泛分布在组织和血液中，在机体 的非特异免疫功能中起着重要的作用。当病原微生物或其 他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又具有 趋化性，它通过产生活跃的变形运动，主动向病原体和异 物移行聚集，首先把异物吸附在细胞表面，随之，吸附区 域的细胞膜向内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质， 形成吞噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合， 形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。

三、实验仪器、材料和试剂 实验仪器、 (1)仪器、用具：显微镜、、解剖盘、注 )仪器、用具：显微镜、、解剖盘、 、、解剖盘 射器、吸管、载玻片、盖玻片。 射器、吸管、载玻片、盖玻片。 (2)材料：小鼠(体重 左右),鸡血。 )材料：小鼠(体重20g左右),鸡

安徽农学通报， An h u i A . S c i . B u l 1 . 2 0 1 3, 1 9 ( 2 3 )

1 7

“小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验"方法的改进与研究顾曙余梁鲁晓雪 李莲张雪茜李静曹祥荣(南京师范大学生命科学学院，江苏南京 2 1 0 0 2 3 )

摘

要：连续3 d给小鼠腹腔注射淀粉液，诱导并激活巨噬细胞，使用鱼红细胞为吞噬物，替代细胞实验教材所用的

鸡红细胞、羊红细胞，探索和改进实验方法，以便更清晰、有效地观察， J、鼠腹腔巨噬细胞对外来异物的吞噬作用。取鼠腹腔液制备涂片并固定，用G i e ms a染色法进行染色，显微观察巨噬细胞对鱼红细胞的吞噬作用。结果显示，采

用鱼红细胞作为吞噬物，细胞染色清晰，吞噬结果明显，可清晰显示大量吞噬鱼红细胞的巨噬细胞，吞噬百分率高， 便于实验观察和计数，有助于学生对巨噬细胞吞噬作用的理解和掌握。关键词：巨噬细胞；鱼红细胞；实验方法；吞噬

中图分类号

G 6 4 2 . 0

文献标识码

A

文章编号

1 0 0 7— 7 7 3 1 ( 2 0 1 3 ) 2 3 - 1 7 - 0 2

Ex pe r i me n t I m pr o v e me nt f o r t he Pha

细胞培养实验报告

细胞培养主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存三个过程。

一、实验仪器及用品

（一）超净台：

1. 枪头：10 mL、5 mL、1 mL、200 μL、10 μL； 2. 移液枪：同上，及相应的支架；

3. 离心管：50 mL、15 mL、1.5 mL，及相应支架与盛皿； 4. 记号笔； 5. PBS缓冲液； 6. 酒精棉；

7. 废液杯×2：一个装枪头，一个装废液； 8. 封口膜； 9. 排枪卡槽； （二）细胞间：

1. 离心机：中型、小型；

2. 培养瓶：透气的用于培养，密封的用于运输，培养皿； 3. 灭菌离心管、枪头、冻存管等备用；

4. 毛巾、手套、口罩、酒精喷壶、灭菌超纯水、除菌滤膜； 5. 100 μL排枪； 6. 血球计数板、载玻片； 7. 水浴锅； （三）冰箱： 1. 双抗、环丙沙星；

2. 4℃：DMEM、1640、PBS、已配培养基； 3. -20℃：MTT、MTS、DMSO、血清、胰酶； （四）缓冲间： 1. CO2罐、液氮罐； （五）换衣间

1. 实验服、拖鞋、手套、口罩、酒精喷壶；

二、实验前准备

（一）实验前将需要带入的物品洗净、高温灭菌、喷酒精，放入传送窗，将传送窗与细胞间紫外开启杀菌半小时；

细 胞 生 物 学

实 验 论 文

年级：2012级师范2班 姓名：田金梅

学号：222012317011114 指

导

老

师

魏

玲

：

人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析

（西南大学生命科学学院 重庆400715）

摘要：细胞培养是现代生物科学中发展十分迅速的一种实验技术，掌握细胞培养技术有利于我们掌握一种非常重要的实验技术方法。本次实验通过用人体外周血淋巴细胞为材料，进行PHA处理然后再37℃下培养72小时，并在离培养终止3~4小时添加秋水仙素处理，然后经过低渗离心固定的反复操作，将细胞收集以及处理成合适的装片，然后通过冰片滴片的方式，再由Gemesa染液染色，再镜检，找到含46条染色体合适的细胞，再用显微拍照技术拍照，得到的图片经过简单处理，剪切，并测量数据，最后得到核型分析图谱。 关键词：细胞培养；PHA；人体外周血淋巴细胞；染色体装片制备; 核型分析

综述：细胞培养是现代生物科学中发展十分迅速的一种实验技术，也是当前细

胞生物学乃至整个生命科学研究与生物工程中最基本的实

肌糖元的酵解作用

学号：200900140157 班级：09生科3班 姓名：俞华军 时间：2011/03/27

一．实验目的

1.学习鉴定糖酵解作用的原理和方法。

2.了解酵解作用在糖代谢过程中的地位及生理意义。 3.了解有关组织代谢实验应注意的一些问题。

二．实验原理

在动物、植物、微生物等许多生物机体内，糖的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行。本实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。肌糖元的酵解作用，即肌糖元在缺氧的条件下，经过一系列的酶促反应，最后转变成乳酸的过程。肌肉组织中的肌糖元首先磷酸化，经过己糖磷酸酯、丙糖磷酸酯、甘油磷酸酯、丙酮酸等一系列中间产物，最后生成乳酸。该过程可综合成下列反应式： （1/n）(C6H10O5)n+H2O 2CH3CHOHCOOH

肌糖元的酵解作用是糖类供给能量的一种方式。当机体突然需要大量的能量，而又供氧不足（如剧烈运动时），则糖元的酵解作用可暂时满足能量消耗的需要。在有氧条件下，组织内糖元的酵解作用受到抑制，而有氧氧化则为糖代谢的主要途径。

糖元酵解作用的实验，一般使用肌肉糜或肌肉提取液。在用肌肉糜时，必须在无氧条件下进行；而用肌肉提取液，则可在有氧条件下进行。因为催化酵

肌糖元的酵解作用

学号：200900140157 班级：09生科3班 姓名：俞华军 时间：2011/03/27

一．实验目的

1.学习鉴定糖酵解作用的原理和方法。

2.了解酵解作用在糖代谢过程中的地位及生理意义。 3.了解有关组织代谢实验应注意的一些问题。

二．实验原理

在动物、植物、微生物等许多生物机体内，糖的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行。本实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。肌糖元的酵解作用，即肌糖元在缺氧的条件下，经过一系列的酶促反应，最后转变成乳酸的过程。肌肉组织中的肌糖元首先磷酸化，经过己糖磷酸酯、丙糖磷酸酯、甘油磷酸酯、丙酮酸等一系列中间产物，最后生成乳酸。该过程可综合成下列反应式： （1/n）(C6H10O5)n+H2O 2CH3CHOHCOOH

肌糖元的酵解作用是糖类供给能量的一种方式。当机体突然需要大量的能量，而又供氧不足（如剧烈运动时），则糖元的酵解作用可暂时满足能量消耗的需要。在有氧条件下，组织内糖元的酵解作用受到抑制，而有氧氧化则为糖代谢的主要途径。

糖元酵解作用的实验，一般使用肌肉糜或肌肉提取液。在用肌肉糜时，必须在无氧条件下进行；而用肌肉提取液，则可在有氧条件下进行。因为催化酵

细胞膜的渗透性实验报告

一、

实验目的：

1． 了解细胞膜的渗透性

2 ．了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度 二、

实验原理：

1. 细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。脂溶性越高通透性越大，水溶性越高通透性越小；非极性分子比极性容易透过，小分子比大分子容易透过。水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层，不带电荷的极性小分子，如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层，尽管速度较慢，分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过，而膜对带电荷的物质如：H+、Na+、K+、Cl–、HCO3 –是高度不通透的。

2.hemolysis（溶血现象）：渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压，使水进入细胞，引起细胞吸水胀破；即红细胞膜破裂，血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。

3.isotonic solution（等渗溶液）：渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗 溶液。

4.Hypertonic solution（高渗溶液）：渗透压高于血浆渗透压的溶液称为高渗溶液。

5.Hypotonic solution（低渗溶液）：渗透压低于血浆渗透压的溶液称为低渗溶液。

实验一：细胞的形态观察及其大小测量

一、实验目的：

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构； 2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

二、实验材料和仪器：

小白鼠肝细胞切片；鸡血红细胞；蚕豆叶片横切片；

普通光学显微镜；目镜测微尺；镜台测微尺；载玻片；盖玻片。

三、实验步骤：

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。

（2）鸡血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。 （二）细胞的大小和测量

1、卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜

的上透镜。

2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。

3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。

4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：

镜台测微尺的格数

实验一 细胞的形态观察及其大小测量

【实验目的】

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构； 2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

【实验用品】

普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片等。

【实验材料】

小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;洋葱。

【实验内容和方法】

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。注意肝细胞之间的界限、细胞的形状、细胞核的形状和数量、核仁的形状和数量、细胞质的形态构造以及细胞质和细胞核染色的区别。

（2）鸡血细胞涂片的观察：注意观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。

（2）洋葱表皮细胞的形态观察：用镊子撕取洋葱表皮，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片。在显微镜下观察的形态和结构。

（二）细胞的大小和测量

1、测微尺的使用

目镜测微尺是一块圆形玻片，中心刻有一尺，长5～10mm，分成50～100格。每格的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。镜台测微尺是在一块载玻片中央，用树胶封固一圆形的