菌种的衰退

很全面

第八节 菌种的衰退、复壮和保藏

很全面

性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本 要求，否则生产或科研都无法正常进行。

影响微生物菌种稳定性的因素：a)变异； b)污染；

c)死亡.

很全面

一、菌种的衰退(degenration)1. 衰退的表现1)原有形态形状变得不典型； 2)生长速度变慢； 3)代谢产物生产能力下降； 4)致病菌对宿主侵袭力下降； 5)对外界不良环境的抵抗力下降。

很全面

2. 衰退的原因1)根本原因在于基因自发突变； 2)传代次数的影响，使负突变株的比例逐渐占 了优势； 3)与培养条件有关。

衰退是发生在微生物细胞群体中的一 个由量变到质变的逐步演变的过程。

很全面

二、衰退的防止与复壮(一)防止衰退的措施1. 减少传代次数； 2. 创造良好的培养条件；

p228

3. 利用不易衰退的细胞传代

4. 采用有效的菌种保藏方法；

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(二)菌种的复壮(rejuvenation)1. 从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有 原有典型性状的菌种(狭义复壮，消极措施)。 a)纯种分离;

b)通过寄主体进行复壮； 2. 有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种 维护工作中不断筛选“正变”个体(广义复壮，积极措施) 。

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纯种的分

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第八节 菌种的衰退、复壮和保藏

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性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本 要求，否则生产或科研都无法正常进行。

影响微生物菌种稳定性的因素：a)变异； b)污染；

c)死亡.

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一、菌种的衰退(degenration)1. 衰退的表现1)原有形态形状变得不典型； 2)生长速度变慢； 3)代谢产物生产能力下降； 4)致病菌对宿主侵袭力下降； 5)对外界不良环境的抵抗力下降。

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2. 衰退的原因1)根本原因在于基因自发突变； 2)传代次数的影响，使负突变株的比例逐渐占 了优势； 3)与培养条件有关。

衰退是发生在微生物细胞群体中的一 个由量变到质变的逐步演变的过程。

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二、衰退的防止与复壮(一)防止衰退的措施1. 减少传代次数； 2. 创造良好的培养条件；

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3. 利用不易衰退的细胞传代

4. 采用有效的菌种保藏方法；

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(二)菌种的复壮(rejuvenation)1. 从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有 原有典型性状的菌种(狭义复壮，消极措施)。 a)纯种分离;

b)通过寄主体进行复壮； 2. 有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种 维护工作中不断筛选“正变”个体(广义复壮，积极措施) 。

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民主因何而衰退：国外民主衰退成因研究的新进展

作者介绍 倪春纳，南京大学马克思主义学院助理研究员，南京大学马克思主义学院博士后流动站研究人员。 正文近年来，“民主的衰退”成为国际政治的一个显著趋势。2016年，经济学人智库(Economist Intelligence Unit)公布的“民主指数”报告指出，全球“民主”进入了“令人焦虑的时代”。无独有偶，其他几个重要的民主评估机构也得出了相同的结论。如德国贝塔斯曼基金会发布的2016年“贝塔斯曼转型指数”(Bertelsmann Transformation Index)显示，在过去的两年间，全球国家中民主质量显著下降的比例超过了五分之一，而显著提升的国家数量则不足十分之一。①“自由之家”(Freedom House)披露的最新数据也表明，2015年，全球多达72个国家的“自由程度”在下降，而上升的国家仅有43个。更重要的是，全球“自由程度”已经连续十年处于下降之中，因此“自由之家”将过去的十年称为民主“衰退的十年”。②长期致力于民主衰退研究的斯坦福大学著名学者拉里·戴蒙德(Larry Diamond)指出，波澜壮阔的“第三波”在2006年前后进入拐点，全球民主在此之后陷入了一个漫长

篇一：菌种鉴定

中国工业微生物菌种保藏管理中心

CICC是我国唯一的国家级工业微生物菌种保藏管理中心，有近三十年菌种分类鉴定的历史，拥有先进的生物科学仪器和从事分类鉴定的专业化人员队伍。CICC承担全国工业微生物菌种的委托鉴定工作，所提供的菌种鉴定与评价技术服务获得“国家工商总局（SCIC）经营许可”，为国内科研机构、大专院校和生产企业等提供微生物菌种鉴定服务，涉及细菌、酵母、放线菌和丝状真菌等多类微生物。菌种鉴定手段包括形态学观察、生理生化特性鉴定、 BIOLOG碳源自动分析鉴定、分子生物学鉴定、API细菌数值鉴定、功能性分析及功能基因、RAPD、SSCP、TLC薄层层析、全细胞脂肪酸分析鉴定、（G＋C）mol％测定、DNA/DNA同源性测定等。

鉴定项目

序号 服务项目 菌种类别

1 纯菌种鉴定（包含形态、理化、分子） 细菌、酵母、放线菌、丝状真菌 2 功能基因鉴定（pheS、gryA、atpD等） 乳杆菌、芽胞杆菌、双歧杆菌 3 产品微生物解析 ――

4 产品污染菌种鉴定 ――

5 菌群分析及纯种分离 ――

6 细胞壁化学组分分析（氨基酸） 细菌、放线菌

7 细胞壁化学组分分析（糖） 细菌、放线菌

8 DNA（G+C ）mol％含量 细菌、放线菌

9 DNA

全面衰退量表(Global Deterioration Scale, GDS)

这是由Reisberg等人创立发展起来一组分期方法。GDS是三个量表中最基本的量表，也最为常用。从正常（无认知下降）到非常严重的认知下降分为7期，内容涉及以下几个方面：记忆（即刻记忆，近期记忆和远期记忆）（1-7期），操作性日常生活能力(IADL)（3、4期），人格和情绪化（3、6期），日常生活能力(ADL)（5-7期），定向力（4-6期）。该量表通过对患者和护理者进行访谈，进行评分分期，为非客观量表。

全面衰退量表(GDS) 第一级：无认无主观叙述记忆不好，临床检查无记忆缺陷的证据 知功能减退 第二级：非常自己抱怨记忆不好，通常表现为以下几个方面：①忘记熟悉的轻微的认知功东西放在什么地方；②忘记熟人的名字，但临床检查无记忆缺能减退 陷的客观证据。就业和社交场合无客观的功能缺陷，对症状的关心恰当。 第三级：轻度最早而明确的认知缺陷。存在下述两项或两项以上的表现：①认知功能减退 病人到不熟悉的地方迷路；②同事注意到病人的工作能力相对减退；③家人发现病人回忆词汇的名字困难；④阅读一篇文章或一本书后记住的东西甚少；⑤记忆新认识的人名能力减退；⑥可能遗失贵重物品或放错地

工程的调试、运行与管理 第一节 菌种驯育与启动 一、厌氧培菌与启动 1．选取菌种（污泥）

用于厌氧发酵罐启动的厌氧活性污泥叫接种物。沼气发酵过程是多种类微生物共同作用的结果，要注意接种物的产甲烷活性，因为产酸菌繁殖快，而产甲烷菌繁殖很慢，如果接种物中产甲烷菌（活性污泥）数量太少，常常因为在启动过程中酸化与甲烷化速度的过分不平衡而导致启动的失败。

在确定系统运行温度后，要选择同类工程的活性污泥做接种物（菌种）。是否是相同的菌种，或富集菌种的多少，决定系统启动速度的快慢。由于各地具体条件差异，监测手段不同，启动时的操作方式也不会是一个模式，只能是类似。 条件具备的地方，处理同类废水，接种同类污泥，以保持厌氧微生物生态环境的一致。当地不具备这样的条件，需要在驯化上下工夫，启动的时间要长些，速度会慢些。厌氧发酵罐排出的活性污泥和污水沟底正在发泡的活性污泥，都可作为选取接种物的对象。接种量约占发酵容积的1/10~1/3，接种量越多，启动速度越快，在此基础上逐渐富集。 2．菌种的驯化与富集

菌种的驯化富集可在新建的发酵罐内进行，也可在其他的容器内进行。取来的厌氧活性污泥（菌种）越多越好，再加入适量的处理原料（数量小于菌种数量的10%份额）。菌种和原料的混

企业衰败前的五大特征 特征一：只开会不决策

有激情的企业家都有一个共同的特征，就是决策力。这个决策是既快又准。而要达到这个能力的核心是要抓住事物的本质和重点。我看到无数没有激情的企业家天天主持会议，天天研究的同样的问题，而天天都没有结论。更有甚者，还有企业家在中层会议上给下属读报纸浪费时间。

如果你整深陷在文山会海中，那你就一定是进入了一个正在衰败的企业。如果你是企业家，天天在开会，那你就一定是在给企业的衰败注入基因。

特征二：无大将可用

“千军易得，一将难求。”这是中国俗语，也是一个颠扑不破的真理。如果你的企业做大了，10个亿、20亿，甚至上百亿或几百亿，如果你找不到大将可用，那你就距离失败的时间不短了。

三国时候，“蜀中无大将、廖化做先锋”的故事正在中国很多10-50亿左右的中型企业中蔓延。当司马懿看到廖化做先锋的时候，就知道蜀国的命运到头了。很多老板还沾沾自喜说自己年轻能干，却不知道自己已经成了企业发展的最大障碍，因为这样的老板虽然能力很强，但是在没有大将的情况下，往往战略清晰，战术失误。更可怕的是，在这样的企业中，就像三国时候没有人怀疑诸葛孔明一样，老板的旨意成了企业的发展方向，最终会给企业造成失街亭的危险。

没有大将，企业就没有跨越发展的机会。

用酱糟混合发酵加色素。

,

既可提高质量

,

又可以增,

豆

、

以及成品日晒夜露等。

,

都能达封增加

色素的目的比苑

关于增加酱油色素的办法还有多种如小麦的焙炒,

方面标准

,

不过我们只要抓好以上几个就能做到在酱油质量上既要贯彻那颁,

使用部份杂粮

葫豆

、

,

又满足群众的习惯需要

。

谈谈菌种的退化和保藏魏建铭福建南平市苦油厂

要使酱油生产达到稳定目的

,

除有一条

上硷基的第六位碳原子上是氮基可简单写成二。

,

相对的另。

合理的工艺操作规程外

,

还必需有优良的菌

一条链上硷基的第六位碳原子一定是酮基…一二。

种

。

因此

,

经常性地对生产菌种进行选育和。

复壮是一重要手段氧核糖孩酸

一一一一数量一、

一

一,

一一

…………

微生物的主要遗传物质基础是

脱

二

。

一、

一一一。

它是以半保留的自我复制方式,

基因突变就是基因结构的改变昔酸种类突变就是录、

它表现在核

将自身性状传给子代

在遗传过程中由于外。

顺序的改变

基因的自发,

界条件和内在环境等因素将产生变异

变异

在自我复制过程中。

由于转,

有正向突变与负向突变异的菌株朝原养型发展退和生长势的下降。

。

正向突变为变异菌负向突变为变表现在性能上的衰

转译等错误造成硷基不能正常配对,

使

株的性能比原菌株更加优良,

核昔酸数目产生增减或改变劣时如高温,、

当外界条件恶。

幅射

、

振荡等引起基因结构

陕西汉王药业有限公司GMP管理文件

1 目 的：建立菌种的传代、贮存、接种操作规程。

2 适用范围：适用于检定菌的传代、贮存、接种。

3 责 任 者：微生物检验员、化验室主任。

4 内 容：

4.1来源：检定菌种由药检部门提供已接种好的菌种斜面。

4.2 贮存：

4.2.1 将购来的试管斜面菌种放入冰箱中冷藏（4-6℃）保存。

4.2.2 将传代并经过培养后的菌种放入冰箱中保存。

4.2.3每支保存菌种需标明菌名、统一编号、接种日期。

4.3 传代和接种：

4.3.1 试验用菌种一般每两月传代一次，在阳性菌检室内进行传代和接种。

4.3.2 先点燃酒精灯，在火焰旁的上部空间操作，烧灼接种环。

4.3.3 再将原有的菌种斜面培养基(简称菌种管)与待种的新鲜斜面培养基(简称接种管)，持在左手拇指、食指及中指之间，要注意能清楚地观察到斜面，菌种管在前，接种管在后。应斜持试管呈450角，使试管内斜面向上，两试管口平齐，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。

4.3.4 首先，以右手在火焰旁转动两管的棉塞，以便接种时易于拔取。再以右手持接种环的柄端，垂直或稍斜地把接种环在火焰上烧灼。顶端的环必须烧红，以彻底灭菌。环以上凡接种时可进入试管的部分，也应通

菌种鉴定实验过程

一、仪器与试剂 1、仪器 仪器名称 测序仪 DNA电泳槽 稳压电泳仪 电热恒温水槽 凝胶成像仪 恒温培养箱 恒温摇床 PCR仪 冷冻高速离心机 Surf系列精密单道可调移液器 1. 试剂 试剂名称 Ezup柱式细菌基因组DNA抽提试剂盒 Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒 Ezup柱式酵母基因组DNA抽提试剂盒 DreamTaq-TM DNA Polymerase 仪器来源 Applied Biosystems 北京六一仪器厂 北京六一仪器厂 上海一恒科学仪器有限公司 上海复日科技仪器有限公司 太仓市科教器材厂 太仓市实验设备厂 Applied Biosystems BBI 生工 试剂来源 生工 生工 生工 MBI 生工 BBI 生工 生工 生工 生工 Takara 生工 型号 3730XL DYCP-31DN DYY-5 DK-8D FR980 DHP-9162 TH2-C 2720 thermal cycler HC-2518R SP10-1000 cat. No. SK8255 SK8259 SK8257 EP0702 D0056 AB0014 SK8131 SM0337 合成部合成 铸塑部生产 D101A SK