小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能检测实验

安徽农学通报， An h u i A . S c i . B u l 1 . 2 0 1 3, 1 9 ( 2 3 )

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“小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验"方法的改进与研究顾曙余梁鲁晓雪 李莲张雪茜李静曹祥荣(南京师范大学生命科学学院，江苏南京 2 1 0 0 2 3 )

摘

要：连续3 d给小鼠腹腔注射淀粉液，诱导并激活巨噬细胞，使用鱼红细胞为吞噬物，替代细胞实验教材所用的

鸡红细胞、羊红细胞，探索和改进实验方法，以便更清晰、有效地观察， J、鼠腹腔巨噬细胞对外来异物的吞噬作用。取鼠腹腔液制备涂片并固定，用G i e ms a染色法进行染色，显微观察巨噬细胞对鱼红细胞的吞噬作用。结果显示，采

用鱼红细胞作为吞噬物，细胞染色清晰，吞噬结果明显，可清晰显示大量吞噬鱼红细胞的巨噬细胞，吞噬百分率高， 便于实验观察和计数，有助于学生对巨噬细胞吞噬作用的理解和掌握。关键词：巨噬细胞；鱼红细胞；实验方法；吞噬

中图分类号

G 6 4 2 . 0

文献标识码

A

文章编号

1 0 0 7— 7 7 3 1 ( 2 0 1 3 ) 2 3 - 1 7 - 0 2

Ex pe r i me n t I m pr o v e me nt f o r t he Pha

实验四 小鼠巨噬细胞吞噬的观察 一、实验目的： 实验目的： 通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验， 通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验， 了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。 了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。 了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。

二、实验原理： 实验原理： 高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞，具有吞噬的功能。它们广泛分布在组织和血液中，在机体 的非特异免疫功能中起着重要的作用。当病原微生物或其 他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又具有 趋化性，它通过产生活跃的变形运动，主动向病原体和异 物移行聚集，首先把异物吸附在细胞表面，随之，吸附区 域的细胞膜向内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质， 形成吞噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合， 形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。

三、实验仪器、材料和试剂 实验仪器、 (1)仪器、用具：显微镜、、解剖盘、注 )仪器、用具：显微镜、、解剖盘、 、、解剖盘 射器、吸管、载玻片、盖玻片。 射器、吸管、载玻片、盖玻片。 (2)材料：小鼠(体重 左右),鸡血。 )材料：小鼠(体重20g左右),鸡

四川大学实验报告

题目：巨噬细胞吞噬作用的观察

实验目的

1. 通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非

特异性免疫中的功能。

2. 掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3. 学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

实验原理

1. 向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细

胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养” 。连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。

2. 台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。活细胞的细胞质膜对台

盼蓝有不透过性。巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。是一种溶酶体染色的方法。

3. 当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小

鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程

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四川大学实验报告

．实验材料及设备

1. 实验材料：

a) 连续2~3 天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只

b) 鸡红细胞悬液

c) 生理盐水

2. 实验设备：

a) 普通光学显微镜

b) 载玻片、盖玻片若干

c) 注射器

d) 染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等

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IgA肾病尿巨噬细胞检测的临床意义

朱国贞;王曙曼;李荣山;朱镭;齐悦;王利华;于为民;黄晓光;黄轶嵘

【摘要】目的:研究尿巨噬细胞含量与IgA肾病(IgAN)患者临床表现、肾脏病理损伤程度的关系.方法:用流式细胞仪(FCM)测定38例IgAN患者尿巨噬细胞含量,并与临床表现、肾活检Katafuchi积分进行对照.结果:38例IgAN患者尿巨噬细胞含量与蛋白尿程度及小管间质积分呈正相关,相关系数分别为0.45(P＜0.05);0.52(P＜0.05);而与血尿、肾小球积分、血管积分无明显相关性.结论:流式细胞仪检测尿巨噬细胞含量可间接反映IgAN肾小管间质病变程度,协助判断疾病的预后.

【期刊名称】《中国临床医学》

【年(卷),期】2007(014)004

【总页数】2页(P549-550)

【关键词】巨噬细胞;流式细胞仪;IgA肾病

【作者】朱国贞;王曙曼;李荣山;朱镭;齐悦;王利华;于为民;黄晓光;黄轶嵘

【作者单位】山西医科大学第二医院肾内科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院肾内科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院肾内科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院血液科,山西太原,030001;山西医科大学第二医院肾内科,山西

广 州 大 学

综合设计性实验报告

学 院 生 命 科 学 学 院

课 程 细 胞 生 物 学 实 验 实验项目 细胞培养 实验题目 小鼠肝细胞的原代培养 专 业 生物技术 年级、班别 生技142 姓 名 徐嘉宽 学 号 1414300030 任课教师 陈鲲

细胞培养

——小鼠细胞的原代培养

摘要 目的 探讨体外分离和培养小鼠肾、脑、心肌细胞的方法。方法 采用脱臼法处死新生小鼠，结合 酶消化法和组织块法对新生小鼠肾、脑、心肌细胞进行了体外分离、培养。（用

研究动脉硬化了解细胞,实验前参考

维普资讯

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笪堂星M, li J N u a n S e a A i nci e e rsi h i Ken, e m n,t I dp e t _ o“gn pes ni i i - e。 sn b

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研究动脉硬化了解细胞,实验前参考

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项目十八 B淋巴细胞功能检测

一、溶血空斑试验 (Plaque forming cell assay)

【实验原理】

将SRBC免疫动物，隔一定时间取其脾脏制成细胞悬液，当与SRBC混合孵育时，其中抗体形成细胞释放的抗体会与周围SRBC特异性结合，在补体作用下，使这些致敏的SRBC溶解，从而在琼脂凝胶中的每个抗体形成细胞周围形成一个肉眼可见的溶血空斑。测定与补体结合力强的IgM形成细胞采用直接方法；测定与补体结合力弱的IgG或IgA形成细胞采用间接法，即实验中需加入抗免疫动物Ig的抗体(二抗)，才能促进溶血空斑形成。 此处只介绍小鼠琼脂直接溶血空斑技术。 【试剂和器材】

1．小白鼠 体重18~22 g。 2．补体 豚鼠混合新鲜血清。

3．SRBC悬液 用Gey液将SRBC洗3次，分别配成2.5×108个细胞/ml和5×108个细胞/ml浓度的红细胞悬液。 4．Gey液、琼脂糖。

5．注射器、剪刀、镊子、不锈钢网、小平皿、试管、吸管、显微镜、温箱、水浴箱。 【步骤和方法】

1．免疫小鼠 取1ml 2.5×108个细胞/ml 浓度的SRBC悬液注入小鼠腹腔，或取0.2 ml SRBC悬液经小鼠尾静脉注入

山东大学实验报告 2014/11/4

姓名：XX 系年级：2013级XX班 学号：201300XXXXXXX 实验题目: 动物细胞培养 同组者: XXXXX 动物细胞培养技术

【实验目的】

1.学习掌握细胞培养的基本原理以及具体方法，并对小鼠脾细胞进行原代培养； 2.掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用； 3.学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法；

4.学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数，计算细胞存活率；

【实验原理】

（一）. 动物细胞培养技术

动物细胞培养技术是指从动物体内取出组织或细胞，在体外模拟动物体内的生理坏境，在无菌，适当温度和一定的营养条件下，使之生存，生长和繁殖，并维持其结构和功能的方法。

细胞培养的意义:⑴.具有其他生物技术无可比拟的优点；⑵.培养条件易改变和控制，便于单因子分析；⑶.便于人们直接对细胞内结构、细胞生长及发育等过程的观察；⑷.在生物学的各个领域（如分子生物学、细胞生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学及病毒学等）已被广泛应用

细胞培养的局限性：（1）.在脱离机体复杂环境下，细胞培养条件与躯体环境有一定距离；(2).观察到的结果有时难以正确

中药王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞功能的影响

中药王不留行主要成分对小鼠乳腺上皮细胞

功能的影响

秦君，高学军*

东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨（150030）

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摘 要：传统中药王不留行具有行血通经，催生下乳，消肿敛疮等功效，广泛应用于我国奶牛业饲料添加剂中。其主要成分为多种皂甙类、黄酮甙类、香豆素类、生物碱类等成分。 本文采用溶剂萃取法与酸碱法对王不留行三类主要成分（皂甙类、黄酮甙类及香豆素类）进行提取，并用化学方法及薄层层析方法予以鉴定。将三种成分分别以不同浓度添加入细胞培养液，采用MTT法检测这三类成分对体外培养的小白鼠乳腺上皮细胞增殖的作用，运用荧光定量RT-PCR方法对细胞中β-酪蛋白的表达进行检测，并对其机理进行了初步研究，用激光共聚焦显微技术对细胞周期蛋白cyclin D1和细胞信号通路中磷酸化stat5因子的表达进行检测，最后通过动物实验进一步验证了其有效成分的作用。

实验结果表明：（1）王不留行皂甙类成分对小鼠乳腺上皮细胞的增殖有明显的抑制作用（P＜0.05），此类成分对小鼠乳腺上皮细胞β-酪蛋白的表达无明显作用（2）王不留行香豆素类成分对小鼠乳腺上皮细胞的增殖和β-酪蛋白的表达均无明显作用（3）