菌种驯化正常

工程的调试、运行与管理 第一节 菌种驯育与启动 一、厌氧培菌与启动 1．选取菌种（污泥）

用于厌氧发酵罐启动的厌氧活性污泥叫接种物。沼气发酵过程是多种类微生物共同作用的结果，要注意接种物的产甲烷活性，因为产酸菌繁殖快，而产甲烷菌繁殖很慢，如果接种物中产甲烷菌（活性污泥）数量太少，常常因为在启动过程中酸化与甲烷化速度的过分不平衡而导致启动的失败。

在确定系统运行温度后，要选择同类工程的活性污泥做接种物（菌种）。是否是相同的菌种，或富集菌种的多少，决定系统启动速度的快慢。由于各地具体条件差异，监测手段不同，启动时的操作方式也不会是一个模式，只能是类似。 条件具备的地方，处理同类废水，接种同类污泥，以保持厌氧微生物生态环境的一致。当地不具备这样的条件，需要在驯化上下工夫，启动的时间要长些，速度会慢些。厌氧发酵罐排出的活性污泥和污水沟底正在发泡的活性污泥，都可作为选取接种物的对象。接种量约占发酵容积的1/10~1/3，接种量越多，启动速度越快，在此基础上逐渐富集。 2．菌种的驯化与富集

菌种的驯化富集可在新建的发酵罐内进行，也可在其他的容器内进行。取来的厌氧活性污泥（菌种）越多越好，再加入适量的处理原料（数量小于菌种数量的10%份额）。菌种和原料的混

厌氧反应池B-107在正式投用前要进行厌氧菌的培养和驯化，

具体方法步骤如下：2 t$ _; s$ v1 [

1、将中活性污泥打入厌氧池中作为接种污泥。打入的污泥量以达到厌氧池正常操作水位的10%为宜。

2、启动气浮水提升泵P-101向厌氧池注入污水，注入量以达到正常操作水位的40%左右，即污水量加活性污泥量达到厌氧池正常操作水位的50%。

3、启动潜水搅拌器流以保持池内污水处于搅拌状态，不致使污泥沉在池底。* s8 i9 i, }: A0 s, p

然后即使池内厌氧菌自行生长繁殖。每2天启动一次气浮水提升泵P-101向厌氧池内注污水，每次注入5%液位10天后即达到正常操作液位。. s4 f+ B0 H# [4 |; \\. Z0 ] 4、在厌氧菌培养阶段每天分析一次池内污水中的CODcr、氨氮和总磷。保持CODcr在300 mg/L以上，氨氮在2.5 mg/L以上，总磷在0.5 mg/L以上。! o/ L# U$ J' B* i5 [ 如果CODcr低于300 mg/L则立即启动气浮水提升泵P-101向池内注污水，如果氨氮低于2.5 mg/L则向池内投加尿素以补充氮源，如果总磷低于0.5 mg

篇一：菌种鉴定

中国工业微生物菌种保藏管理中心

CICC是我国唯一的国家级工业微生物菌种保藏管理中心，有近三十年菌种分类鉴定的历史，拥有先进的生物科学仪器和从事分类鉴定的专业化人员队伍。CICC承担全国工业微生物菌种的委托鉴定工作，所提供的菌种鉴定与评价技术服务获得“国家工商总局（SCIC）经营许可”，为国内科研机构、大专院校和生产企业等提供微生物菌种鉴定服务，涉及细菌、酵母、放线菌和丝状真菌等多类微生物。菌种鉴定手段包括形态学观察、生理生化特性鉴定、 BIOLOG碳源自动分析鉴定、分子生物学鉴定、API细菌数值鉴定、功能性分析及功能基因、RAPD、SSCP、TLC薄层层析、全细胞脂肪酸分析鉴定、（G＋C）mol％测定、DNA/DNA同源性测定等。

鉴定项目

序号 服务项目 菌种类别

1 纯菌种鉴定（包含形态、理化、分子） 细菌、酵母、放线菌、丝状真菌 2 功能基因鉴定（pheS、gryA、atpD等） 乳杆菌、芽胞杆菌、双歧杆菌 3 产品微生物解析 ――

4 产品污染菌种鉴定 ――

5 菌群分析及纯种分离 ――

6 细胞壁化学组分分析（氨基酸） 细菌、放线菌

7 细胞壁化学组分分析（糖） 细菌、放线菌

8 DNA（G+C ）mol％含量 细菌、放线菌

9 DNA

菌种鉴定实验过程

一、仪器与试剂 1、仪器 仪器名称 测序仪 DNA电泳槽 稳压电泳仪 电热恒温水槽 凝胶成像仪 恒温培养箱 恒温摇床 PCR仪 冷冻高速离心机 Surf系列精密单道可调移液器 1. 试剂 试剂名称 Ezup柱式细菌基因组DNA抽提试剂盒 Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒 Ezup柱式酵母基因组DNA抽提试剂盒 DreamTaq-TM DNA Polymerase 仪器来源 Applied Biosystems 北京六一仪器厂 北京六一仪器厂 上海一恒科学仪器有限公司 上海复日科技仪器有限公司 太仓市科教器材厂 太仓市实验设备厂 Applied Biosystems BBI 生工 试剂来源 生工 生工 生工 MBI 生工 BBI 生工 生工 生工 生工 Takara 生工 型号 3730XL DYCP-31DN DYY-5 DK-8D FR980 DHP-9162 TH2-C 2720 thermal cycler HC-2518R SP10-1000 cat. No. SK8255 SK8259 SK8257 EP0702 D0056 AB0014 SK8131 SM0337 合成部合成 铸塑部生产 D101A SK

菌种活化步骤

日期：2007-6-26 18:31:28 点击次数 2519 发布单位：EM 录入：李清

一、安瓿瓶装微生物菌种开封

1-1、用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿瓶。 1-2、用火焰将安瓿瓶口加热灭菌。 1-3、用镊子将铝封口撕开。

二、菌株恢复培养

2-1、用无菌吸管，吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振 荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。

2-2、取约0.2ml菌体悬浮液，移植于指定的琼脂斜面培养基上，剩余的菌液，注入指定的液体培养基内（3-4ml），然后在建议的温度下培养。

三、注意事项

3-1、菌种活化前，请将安瓿瓶保存在5-10℃的环境下。

3-2、厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充 填，以保持厌氧状态。

3-3、某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能 正常生长。

四、制作ＥＭ菌液

4-1、菌种活化:用ＥＭ菌种10克、红糖0.1公斤（红糖先用热水溶化），加入1公斤的水。注：（先把水加热到100°C后加入红塘或白糖，而后继续加热5分钟。冷却到40°C时加入ＥＭ菌种），密闭发酵(35°C-40°C温度)下活化3天，打

化 工 进 展

2009年第28卷增刊 CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS

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厌氧发酵产氢污泥的驯化技术

刘晓烨1,2，庄蓓岚1，宋倩雯2，杨 睿2，韩 伟1，李永峰2

（1 东北林业大学林学院，哈尔滨 150040；2 上海工程技术大学化学化工学院，上海 201620）

摘 要：以糖蜜废水为发酵底物，以污水处理厂剩余污泥为反应器启动污泥，污泥采用曝气氧化预处理方法，从而达到厌氧发酵产氢目的并提高其发酵产氢能力。试验表明，经曝气氧化预处理后的污泥可作为厌氧发酵生物制氢的接种污泥，且具有较高的产氢能力，在实验条件下，反应器稳定运行时产气量为3 L，发酵产气中氢气浓度为75.77%，液相末端发酵产物主要为乙醇、乙酸。 关键词：氢气；发酵；厌氧污泥

已在氢气作为一种无污染可再生的理想燃料[1]，

城市污水处理厂剩余污世界范围内得到广泛重视[2]。

泥或其它生物质能制取氢气，反应条件温和，具有开发新能源、节省能量消耗及净化环境的重要意

－

义[34]。利用污水厂预处理剩余污泥厌氧发酵产氢是一个非常有意义并具有广阔发展前景的新的研究方向[5]。大量研究表明

车站接发车正常（非正常）演练程序

一、演练有关要求

演练人员按规定着装，稍息、立正、齐步走、进入演练室，立定、向左（右）转、向右看齐、向前看、敬礼、礼毕。

作业人员用语：××站值班员XXX，助理值班员XXX，准备参加接发车演练，请领导指示。

值班干部用语：正常接发（正接非发、非接正发、非接非发）XX次，按标准化作业，上岗。

作业人员用语：向左（向右，向后）转，上岗

二、正常接发车模拟作业参照程序

㈠1500.4接车

1、值班员：听取发车站请求闭塞 2、邻站：XX次闭塞 3、值班员：根据闭塞表示灯，行车日志及各种行车表示牌，确认区间空闲：“区间空闲”。

4、按列车运行计划核对车次时刻命令指示

5、同意闭塞：同意XX次闭塞。一听铃响、二看黄灯、三按闭塞按钮、四确认绿色灯光，口呼：X（次）闭塞好（了） 助理值班员：应答：X（次）闭塞好（了）

6、填写行车日志

7、必要时与列车调度员核对车次，了解列车停通会作业时间等。8、值班员：“XX站接X次”。

9、调度员：“XX次正常接”。

10、值班员：确定接车线，X次接X道 11、通知助理值班员：“X次X道停车”

12、助理值班员：复诵“X次X道停车”并填写占线板。 13、值班员：听取发车站开车

动物和人类，谁驯化了谁——驯化史

如果没有科学，我们也许还生活在田园牧歌以及浪漫的原始宗教时代，我们确实离自然很近，但离自然的真相却很远。驯养（驯化）是指动物或植物族群逐渐受人类利用与掌控的过程。人类使动物驯养化的目的包括作为食物、衣物、运输、守卫或是观赏娱乐用途。常见的驯养生物包括了农作物、宠物或家畜等。

驯化的动物产生了不同于它们的野生祖先的演变，有以下几个方面。许多动物的形体大小改变了：牛、猪和绵羊在驯化中形体变小了，而豚鼠在驯化中则形体变大了。绵羊和羊驼因保留了毛绒并减少或失去了硬毛而得到选择，而母牛则因产奶量高得到选择。有几个驯养的动物同它们的野生祖先相比，脑袋较小，感觉器官也较不发达，因为它们不再需要它们的祖先赖以逃脱野外捕食者的那种比较大的脑袋和比较发达的感觉器官了。

皮堡斯-世界上最小的猫

六畜图-汪琨

迷你超萌小猪

小萌狗

各种牛

山羊

万马奔腾

公鸡和母鸡

最初驯化的年代和地区[编辑] 物种 年代 地区 狗 (Canis lupus familiaris) 公元前15000年 [1] 东亚和非洲 绵羊 (Ovis orientalis aries)

公元前9-11000年[2][3]

西南亚

山羊 (Capra aega

有效菌种名:枯草芽孢杆菌,地衣芽孢杆菌,花生根瘤菌,巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、固氮类芽孢杆菌,植物乳杆菌、东方伊萨酵母、甘蔗兰希氏菌、

枯草芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 花生根瘤菌 巨大芽孢杆菌 胶冻样芽孢杆菌 固氮类芽孢杆菌 植物乳杆菌 东方伊萨酵母 甘蔗兰希氏菌 酿酒酵母 侧孢短芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 沼泽红假单胞菌 球形红假单胞菌 酒红土褐链霉菌 乳酸乳球菌 泾阳链霉菌 嗜酸乳杆菌 绿色木霉 戊糖片球菌 粉状毕赤酵母 米根霉 黑曲霉 成团泛菌 弗氏链霉 光孢青霉 大豆根瘤菌 紫云英根瘤菌 解淀粉芽孢杆菌 荧光假单胞菌 绿色木霉 地衣芽孢杆菌 灰螺链霉菌 嗜热脂肪地芽孢杆菌 白色链霉菌、 天青链霉菌、地衣芽孢杆菌、细黄链霉菌、常现青霉、嗜酸乳杆菌 干酪乳杆菌、米曲霉、热带假丝酵母、嗜热毁丝霉、细黄链霉菌、 拟康氏木霉、不吸水链霉菌、淡紫拟青霉、蕈状芽孢杆菌、哈茨木霉、 娄彻氏链霉菌、黑曲霉、产朊假丝酵母

严格厌氧菌菌种保藏方法

发表人：吴小月，发布时间：10-01-11 以下为本实验严格厌氧细菌的保藏方法，如果是兼性厌氧菌可参照好氧菌保藏方法保藏。 一、厌氧细菌的甘油保藏方法：

1、 厌氧甘油的制备： 厌氧瓶或厌氧管中放置一定量的甘油，甘油的量根据需要加入，不

要多加，因为厌氧甘油制备好以后不能反复灭菌，反复灭菌甘油会变性而呈黄色，且有一股芳香味道。加入终浓度为0.04 %的 L-cysteine和 1 %的5 %的 N2S母液。往厌氧瓶中通N2，通气时间和配制培养基时时间相同。盖上塞子和盖子。121 ℃， 20 min 灭菌后备用。

2、 取新鲜菌液（对数期），在通N2 的情况下，用针筒和针头往有菌液的厌氧管中加入终

浓度为15-20 %的厌氧甘油，再通一会N2，目的是赶走在转移甘油过程中带进去的O2。盖上塞子和盖子，混匀，冻于-80 ℃。

3、 活化：用针头和针头吸取一定甘油保藏的菌液，加到培养基当中，加的量一般要多于1 %，

因为厌氧菌的生物量比较小，一般2到5 %左右。目测加完甘油菌液的培养基是否浑浊，并作记录。如果加入的菌液太多，造成一开始培养基就比较浑浊，会干扰我们对菌是否生长的判断，而且甘油太多也会抑制菌的生长。

二、厌氧细