土壤酶活性测定试剂盒

土壤酶活性测定方法

土壤脲酶的测定方法（苯酚钠—次氯酸钠比色法）

一、原理

脲酶存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶作用是极为专

性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和二氧化碳、水。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。

土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法以尿素为基质，根据酶促产物氨与苯酚-次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚，来分析脲酶活性。 二、试剂 1）甲苯

2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。

3）PH6.7柠檬酸盐缓冲液：184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾（KOH）溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释定容至1000ml。 4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5g苯酚溶于少量乙醇，加2ml甲醇和18.5ml丙酮，用乙醇稀释至100ml（A液），存于冰箱中；27gNaOH溶于100ml水（B液）。将A、B溶液保存在冰箱中。使用前将A液、B液各20ml混合，用蒸馏水稀释至

土壤酸性磷酸酶活性的测定

1．试剂配制

(1)0.115M p-硝基苯磷酸钠溶液

取10.67g p-硝基苯磷酸二钠（6H2O,分子量为371.1），溶于pH4.5通用缓冲液中并稀释至250ml.4摄氏度冰箱保存。

(2)通用缓冲液（pH4.5）（缓冲液久置会有沉淀）

原液由以下成分组成:

三羟甲基氨基甲烷12.1g 顺丁烯二酸11.6g 柠檬酸14g 硼酸6.3g

溶于500ml 1N NaOH（40g定容1L）中，加蒸馏水至1L。取原液200 ml，再加入0.1N HCL或浓HCL来调pH为4.5。最后稀释至1L，即得。 (3)甲苯

(4)0.5 mol/L Cacl2.2H2O溶液：

36.75g Cacl2.2H2O定容500ml. (无水CaCl2: 11.1g定容200ml) (5)0.5 mol/L NaOH溶液：20g NaOH定容1L. 2．测定步骤

取1g土壤，置于50ml三角瓶中，加4ml通用缓冲液（pH4.5）、0.25ml甲苯和1ml 0.115M p-硝基苯磷酸钠溶液,摇匀后，置于37℃恒温箱中1h。

培养结束后，加入1ml 0.5 mol/L氯化钙溶液和4ml 0.5 mol/L NaOH溶液，通过

土壤酶活性测定方法

土壤脲酶的测定方法（苯酚钠—次氯酸钠比色法）

一、原理

脲酶存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶作用是极为专

性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和二氧化碳、水。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。

土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法以尿素为基质，根据酶促产物氨与苯酚-次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚，来分析脲酶活性。 二、试剂 1）甲苯

2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。

3）PH6.7柠檬酸盐缓冲液：184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾（KOH）溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释定容至1000ml。 4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5g苯酚溶于少量乙醇，加2ml甲醇和18.5ml丙酮，用乙醇稀释至100ml（A液），存于冰箱中；27gNaOH溶于100ml水（B液）。将A、B溶液保存在冰箱中。使用前将A液、B液各20ml混合，用蒸馏水稀释至

土壤酸性磷酸酶活性的测定

1．试剂配制

(1)0.115M p-硝基苯磷酸钠溶液

取10.67g p-硝基苯磷酸二钠（6H2O,分子量为371.1），溶于pH4.5通用缓冲液中并稀释至250ml.4摄氏度冰箱保存。

(2)通用缓冲液（pH4.5）（缓冲液久置会有沉淀）

原液由以下成分组成:

三羟甲基氨基甲烷12.1g 顺丁烯二酸11.6g 柠檬酸14g 硼酸6.3g

溶于500ml 1N NaOH（40g定容1L）中，加蒸馏水至1L。取原液200 ml，再加入0.1N HCL或浓HCL来调pH为4.5。最后稀释至1L，即得。 (3)甲苯

(4)0.5 mol/L Cacl2.2H2O溶液：

36.75g Cacl2.2H2O定容500ml. (无水CaCl2: 11.1g定容200ml) (5)0.5 mol/L NaOH溶液：20g NaOH定容1L. 2．测定步骤

取1g土壤，置于50ml三角瓶中，加4ml通用缓冲液（pH4.5）、0.25ml甲苯和1ml 0.115M p-硝基苯磷酸钠溶液,摇匀后，置于37℃恒温箱中1h。

培养结束后，加入1ml 0.5 mol/L氯化钙溶液和4ml 0.5 mol/L NaOH溶液，通过

土壤酶的测定

1． 三角瓶用稀HNO3（3-5%）或用洗衣粉浸泡24h，后刷洗，然后再用蒸馏水润洗，晾干。 2． 土样研磨精细后分袋装好。土量需2g+2.5g+5g+5g=14.5g ，重复一次，14.5×2=29g。

一、过氧化氢酶（容量法）（关松荫P323）

1．试剂配制：

(1)0.3%过氧化氢溶液：

①（1：100 30%的H2O2和水） ②（0.5molH2O2+49.5ml蒸馏水） ③（1ml30% H2O2+99ml蒸馏水） (2)3N硫酸：（10ml硫酸+50ml水） (3)0.1N高锰酸钾溶液 ：（1.58gKMnO4+100ml蒸馏水）

2．操作步骤：

2g风干土置100三角烧瓶→注入40ml蒸馏水和5ml 0.3%过氧化氢（现配）→在往复式振荡机上振荡20min→加入5ml3N硫酸（以稳定未分解的H2O2）→用慢速型滤纸过滤，→吸取25ml滤液，用0.1N高锰酸钾的滴定至淡粉红色

3．结果计算

过氧化氢酶的活性（M），以20min后1g土壤的0.1N KMnO4的毫升数表示： M=（A－B）×T 式中：

A：空白消耗的0.1N KMnO4 毫升数

B：滤液消耗的0.1 N KMnO4 毫升数 T：KMnO4

碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒

BCA蛋白浓度测定试剂盒 产品编号 产品名称 包装

蛋白浓度测定试剂盒次

产品简介：

¾

¾

¾

¾ BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而 成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。 灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。 在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的

Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。

BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页:

/Compatibility Chart For B

CRISPR核酸酶载体试剂盒说明书

目录

内容和保存 介绍

产品信息 方法

实验轮廓

设计单链DNA寡核苷酸 产生双链寡核苷酸 连接反应

转化感受态E.coli细胞 分析转化子 转染哺乳细胞系 附录A

CRISPR核酸酶载体试剂盒的图谱和特点 附属产品 技术支持 参考 附录B

CRISPR核酸酶表达细胞的富集

内容和含量

1.1 双链（ds）对照寡核苷酸序列

ds 克隆对照的寡核苷酸的序列如下所列。ds 克隆对照的寡核苷酸来自退火的，并在试剂盒中提供的50μM的双链寡核苷酸。 ds 克隆对照的寡核苷酸在应用于连接反应之前需要进行再退火和稀释。

5’ CATTTCTCAGTGCTATAGAGTTTT 3’ 3’GTGGCGTAAAGAGTCACGATATCT 5’

1.2感受态细胞

转化效率≥1×10 cfu/微克质粒DNA

9

1.3 TOP10细胞的基因型

F-MCRAΔ（MRR-hsdRMS-mcrBC）φ80lacZΔM15ΔlacX74recA1 araD139Δ（ARA-LEU）7697Galu galKpsL（STRR）endA1 nupG

2 介绍

2.1 产品信息 2.1.1 介绍

GENEART?CRISPR核酸

微生物检测试剂盒

核

酸 产品编

项目

种号 类

产品名称

方 法

规 格 价 格

SA-6131 沙门氏菌(Spp)核酸检测试剂盒

沙门氏菌 DNA

SA-6132 沙门氏菌(Spp)核酸检测试剂盒 副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂

SA-7051

副溶血性盒

DNA

弧菌 副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂

SA-7052

盒 SA-7061 霍乱弧菌(VC)核酸检测试剂盒

霍乱弧菌 DNA

SA-7062 霍乱弧菌(VC)核酸检测试剂盒 大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂

SA-7071

盒

大肠杆菌 DNA

大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂

SA-7072

盒

单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂

SA-7081

单增李斯盒

DNA

特菌 单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂

SA-7082

盒

金黄色葡萄球菌(MRSA)核酸检测

SA-7091

金黄色葡试剂盒

DNA

萄球菌 金黄色葡萄球菌(MRSA)核酸检测

SA-7092

试剂盒

口腔变形链球菌(SM)核酸检测试

SA-7111

口腔变形剂盒

DNA

链球菌 口腔变形链球菌(SM)核酸检测试

SA-7112

剂盒

幽门螺旋杆菌(HP)核酸检测试剂

SA-7121

幽门螺旋盒

DNA

杆菌 幽

类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法）

【产品名称】

通用名称：类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法） 商品名称：类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法）

英文名称：Rheumatoid Factoid Reagent Kit（Slide Latex Agglutination Test）

【包装规格】每包装盒为：胶乳液5ml；阳性对照0.5ml；阴性对照0.5ml 【临床意义】对血清中RF定性或半定量测定，做辅助诊断用。 【检验原理】本试剂胶乳液是由纯化的人IgG和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶

乳。RF胶乳的灵敏度调整到20IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见凝集颗粒，试用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。

【主要组成成份】

胶乳液成份：类风湿因子胶乳、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液 阳性对照成份：羊抗人IgG抗血清、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液 阴性对照成份：牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液

不同批号试剂盒中的乳胶液、阳性对照和阴性对照不能混用。

【储存条件及有效期】

储藏温度2-10℃，切勿冷冻。有效期一年。

【适用仪器】

手工操作

【样本要求】

经离心获得新鲜血清样本，贮存于2-8℃，48小时内使用，时间过长须冰冻贮存。

1.样品准备：

细胞培养液：通过离心去除颗粒后马上检测或分装后保存在-20度以下，避免反复冻融。 细胞裂解液：分析前，细胞必须按照细胞裂解程序进行裂解。

血清：使用血清分离管并让标本在室温下凝血30min然后1000g离心15min，马上检测或分装后保存在-20度以下，避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝的血浆，1000g离心15min，马上检测或分装后保存在-20度以下，避免反复冻融。

血清或血浆样本需20倍稀释后，建议的稀释的方法是20ul样本加上380ul Calibrator Diluent RD 5p（1:5倍稀释）。

2.细胞裂解程序

（1）.细胞用10ml Cell Lysis Buffer1 将细胞重悬浮到5*10^6个/ml。 （2）.孵育并间断在室温下给予漩涡30min。 （3).12, 000rpm下离心10min以去除细胞成分。 (4).分装细胞并在-20度以下，避免反复冻融。

3.试剂准备 Wash Buffer：如果浓缩液中出现结晶，室温复温后轻轻混合直到结晶溶解。20ml Wash Buffer的浓缩液可以用去离子水或灭菌水配到500ml。

Substrate solution：等体积的Rea