生物显微制片技术

植物制片的方法及准备

一、植物制片的基本要求与主要制片方法

植物内部结构不能用大而厚的组织块置于显微镜下观察，必须进行制作切片，才能供显微镜下观察应用。 石蜡（或徒手）切片，是将植物切成薄的材料，按下列主要步骤与要求制成永存切片。 1.采样：材料的选择与分割 2.杀生、固定与器皿清洗 3.冲洗（有的不经此步） 4.脱水（各级酒精） 5.透明

6.渗透（例如浸蜡） 7.包埋（石蜡包埋） 8.切片（切片机或徒手切片） 9.粘片 10.烘片

11.脱包埋剂（石蜡） 12.经各级酒精（脱水） 13.染色 14.分色 15.脱水 16.透明

17.封藏成永存片

从上述主要环节来看，首先将材料加以处理（1、2、3项），第二步进行制片基础的处理工作（4、5、6、7项），在保证质量完成这两类工作基础上，方可顺利完成切片工作（包括8、9、10项），也就是说切出符合规格的薄片来，然后再对组织进行染色、脱水、透明等一系列工作，才可制成透明清晰、染色鲜艳、适合显微镜观察摄影，并作教学、科研长期保存的永存片。其详细制片过程与方法，在以后章节内加以介绍。 通常制片分两大类型。

二、 溶液的配制

（一）各级酒精浓度的配制 在植物制片中常用各级酒精，一般以95%

中药显微鉴定知识总结

中药鉴定常用的鉴定方法有：（原植物、动物和矿物）鉴定法、性状鉴定法、显微鉴定法及理化鉴定法等。

显微鉴定法是利用显微技术对中药进行显微分析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定，利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物的特征、矿物的光学特性，和用显微化学方法，确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等，用以鉴别药材的真伪与纯度甚至品质。

（一）显微制片方法

显微鉴定时可根据检品的不同情况制作相应的制片，包括横切片或纵切片、表面制片、粉末制片、解离组织片、花粉粒与孢子制片、磨片制片、含粉末药材的制剂显微纸片等。

制作解离组织片时，解离液选择原则为：如样品中薄壁组织占大部分，木化组织少或分散存在，可用氢氧化钾法；如果样品坚硬，木化组织较多或集成较大群束，可用硝铬酸法或氯酸钾法。 （二）植物细胞壁和内含物的鉴别 （1）细胞壁性质的鉴别：

①木质化细胞壁加间苯三酚试液显红色或紫红色。 ②木栓化或角质化细胞壁加苏丹Ш显橘红色至红色。 ③纤堆素细胞壁加氯化锌碘试液显蓝色或紫色。 ④硅质化细胞壁加硫酸无变化。 （2）细胞内含物性质的

实验二十 显微镜

实验目的:

⒈熟悉显微镜的构造及原理;

⒉学会显微镜的调整和使用、以及测量微小长度的方法;

⒊理解数值孔径与显微镜分辨本领的含义，验证显微镜分辨本领与物镜数值孔径的 关系。

仪器用具:

⒈XSP-18A生物显微镜；⒉测微尺；⒊测微目镜；⒋被测物(透射光栅及生物切片)；⒌2号鉴别率板；⒍光阑及其支架。

实验原理:

显微镜是用来观察和研究微小物体的助视仪器。显微镜已广泛地应用于现代科学技术 和生产和各个领域，没有显微镜的发明和发展，就不可能有现代科学许多领域的发展。 ⒈显微镜的基本光路

显微镜的最主要部分是物镜和目镜。为了简单起见，可以把构造复杂的物镜和目镜都

当作是一单独的薄凸透镜。其光路见图1。 物镜LO的焦距fO很短，待观察物体PQ放在它前面距离略大于fO的地方(设物距为sO)使PQ经LO 后成一放大实象

?)。P'Q'(设象距为sO然后再用目镜LE作为

放大镜来观察这个中间象。中间象P'Q'应放在目镜LE的第一焦点FE以内(设物距为sE)，经过目镜后在明视距离(s??＝

25cm)处成一放大虚象P\。因为

?

实验二十 显微镜

实验目的:

⒈熟悉显微镜的构造及原理;

⒉学会显微镜的调整和使用、以及测量微小长度的方法;

⒊理解数值孔径与显微镜分辨本领的含义，验证显微镜分辨本领与物镜数值孔径的 关系。

仪器用具:

⒈XSP-18A生物显微镜；⒉测微尺；⒊测微目镜；⒋被测物(透射光栅及生物切片)；⒌2号鉴别率板；⒍光阑及其支架。

实验原理:

显微镜是用来观察和研究微小物体的助视仪器。显微镜已广泛地应用于现代科学技术 和生产和各个领域，没有显微镜的发明和发展，就不可能有现代科学许多领域的发展。 ⒈显微镜的基本光路

显微镜的最主要部分是物镜和目镜。为了简单起见，可以把构造复杂的物镜和目镜都

当作是一单独的薄凸透镜。其光路见图1。 物镜LO的焦距fO很短，待观察物体PQ放在它前面距离略大于fO的地方(设物距为sO)使PQ经LO 后成一放大实象

?)。P'Q'(设象距为sO然后再用目镜LE作为

放大镜来观察这个中间象。中间象P'Q'应放在目镜LE的第一焦点FE以内(设物距为sE)，经过目镜后在明视距离(s??＝

25cm)处成一放大虚象P\。因为

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应用例

实2在0006倍观下碳酸测粉钙末在1900倍下对P8VC糊脂树 行观近测

描扫镜电ScaninngE lectornMicroan lyzera

扫 描

电 镜的 SEM(基 本 ) 理原SEM

扫

描电的镜大特点★最焦大，深像图有富体立感，别适特于表合面形 的研究 貌放大★倍数范围，广从十几倍2万倍，几到乎盖覆了光学显 微和镜ETM范围的 制★简单样样，品电的子损伤 这小些面优于T方EM,以所SE成M为高子材料 分用的常要剖析重段

手S

EMTE与M的主区别★在原要理上S,EM是用透不电子射成，像是 而用二电次加子背景射散子电成像。★ 在器仪造上构除了，光源、空系真相统外似 检测，系完全统同。不

扫电镜描(EMS)SME分的率辨要受主到子束直电的限径， 这里制子电直束径的指聚焦后扫描是样在上的照品 射的尺寸点。

对同样距的二个颗粒，品子束电直越径， 越小得随好的分辨到效果。但子电直束径小，信 越噪越小 。

比扫

电镜(SE描)M辨分率ES的分M辨率要受主到子束电径的限制，这直 里子电束直径指是的聚焦扫后描在品上样照射的 点尺的寸。对样品同距的个颗二，电粒子束直径 小，越越得随到的分好效果辨电子，直束越小径， 噪信越比 。小

大倍数放EM的S放倍大数屏幕分与

电子显微镜

显微分析技术 电子显微镜 Technology for Microscopy Analysis ----Electron Microscope一束电子射到试样上，电子与物质相互作用，当 电子的运动方向被改变，称为散射。

弹性散射 散射

电子只改变运动方向而电子的 能量不发生变化

非弹性散射 电子的运动方向和能量都发生变化

电子显微镜

电子显微镜

直接透射电子，以及弹性或非弹性散射的透射 透射电子 电子用于透射电镜(TEM)的成像和衍射◆

如果入射电子撞击样品表面原子的外层电 子，把它激发出来，就形成低能量的二次电子， 在电场的作用下它可呈曲线运动，翻越障碍进 入检测器，使表面凹凸的各个部分都能清晰成 像。 二次电子 ◆ 二次电子的强度主要与样品表面形貌有关。 二次电子和背景散射电子共同用于扫描电镜 (SEM)的成像。 ◆ 当探针很细，分辨高时，基本收集的是二 次电子而背景电子很少，称为二次电子成像 (SEI)

电子显微镜

如果入射电子把样品表面原子的内层电子撞 出，被激发的空穴由高能级电子填充时，能 特征X射线 量以电磁辐射的形式放出，就产生特征X射线， 可用于元素分析。 如果入射电子把外层电子打进内层，原 俄歇 子被激发了.为释放能量而电离出次外层

扫描电子显微镜

扫描电子显微技术与X 扫描电子显微技术与X 射线显微分析(Scanning electron microscopy and X-ray microanalysis) X报告人： 肖江群

扫描电子显微镜

扫描电子探针显微技术与X射 线显微分析 定义与历史回顾 显微分析的基本原理 几个重要的概念 仪器与装置(组图) 定性X射线显微分析 定量X射线显微分析 扫描电镜和X射线显微分析的样品制备 技术应用前景

扫描电子显微镜

探针微区分析的定义所谓的电子探针分析就是利用电子轰击待研究的 试样来产生X射线，根据X射线中谱线的波长和强 度鉴别存在的元素并算出其浓度。 在做定性分析时用X射线谱仪在有关谱线可能出 现的波长范围内把谱线纪录下来。然后对照波长 表，定量分析时把试样的X射线强度与标样的对 比，并作一些校正就可以算出分析点上的成分含 量。

扫描电子显微镜

历史回顾 把特征X 把特征X线用于分析化学的想法可以追溯 到Moseley(1913~1914)。1920年至1930年， Moseley(1913~1914)。1920年至1930年， 由于X 由于X线谱学与原子结构有关引起了一些科 学家的注意，他们详细地研究了特征

制片管理系统——影视剧生产的数字化管理方案

　　数字化管理，英文称Digital　Management，是指使用现代计算机技术和网络通讯、人工智能等手段，量化管理对象与管理行为，科学地实现计划、组织、协调、服务等职能的管理活动和管理方法的总称。管理是现代企业发展永恒的主题。管理的信息化，数字化是现代企业高速发展的一项革命，其目的是推动企业从传统的经验管理向科学化、数字化管理的转变。
影视制片业的数字化管理和数字化设备的建设是并驾齐驱的两套马车，相辅相成缺一不可，数字化设备提高的是影视作品的技术质量和艺术质量，增强的是影视作品的艺术感染力，数字化管理提高的管理水平和管理艺术，降低的是制作成本，节约的是金钱。
　　数字化管理在西方发达国家的生产管理中占有很大比重，贯穿企业生产的全过程，它具有科学，准确，高效，低成本的特点，是当前管理工作实施改革的重要手段。好莱坞在上个世纪的90年就推出了一系列制片管理方面的软件，著名的Movie Magic Budgeting and Scheduling一直活跃在好莱坞的舞台上，笔者2010年去美国拍摄电视剧见过它的芳容，2004年随美国黑森林影业集团在上海拍戏曾使用过该软件，尽管它依然采用手工操作的方式，也没有查询

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生物显微镜的操作规程

1 目的

规范生物显微镜的操作使用、保养和维护，以延长仪器设备寿命，使检验结果准确可靠。 2 适用范围

本操作规程适用于本公司的生物显微镜。 3 职责

3.1使用人员：应按使用说明书或操作规程正确使用，并作好记录。 3.2保管人员：进行日常管理与维护，监督仪器操作是否符合规程。 3.3计量检定员：负责生物显微镜的周期检定计划并实施。 3.4科室负责人：负责该仪器综合管理. 4 仪器设备性能技术指标

电源：220V/50HZ。配有4×10×100×物镜，10×16×目镜。 5安全操作注意事项及特别提示

5.1应保护好物镜，油镜用后要用二甲苯擦拭镜头，以保证清洁。 5.2本仪器必须设专人管理，实行专管共用，使用人员必须经专门培训。

5.2使用粗调时应注意镜头与载玻片的距离，以免压坏载玻片和镜头，使用微调时应轻而缓慢。

5.3如发生故障应立即报告，送专业单位检修，不得自行修理。 6 操作规程

6.1设备运行步骤。

6.1.1将电源插头插入外接电源插座（插入前应检查外接电源电压是否相符）。 6.1.2先将亮度调节柄调节至最小位置，开启电源开关，滑动亮度调节柄至适合位置。

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显微技术SEM TEM AFM

现代分析测试技术— 现代分析测试技术—显微技术

第十二章 显微技术

分辨本领

人的眼睛仅能分辨0.1 0.2mm的细节 0.11) 人的眼睛仅能分辨0.1-0.2mm的细节 2) 光学显微镜，人们可观察到象细菌那样小的 光学显微镜， 物体(200nm)。 物体(200nm)。 (200nm) 3) 用光学显微镜来揭示更小粒子的显微组织结 构是不可能的，受光学显微镜分辨本领(或分辨 构是不可能的，受光学显微镜分辨本领( 的限制。 率)的限制。

显微技术SEM TEM AFM

现代分析测试技术— 现代分析测试技术—显微技术 探针与显微分析仪》的主要种类： 《探针与显微分析仪》的主要种类： 1) 光 学 显 微 镜： a) 透镜显微镜 2) 电 子 显 微 镜： a) 透射电子显微镜 3) 电 子 探 针： a) X射线谱仪 4) 探 针 显 微 镜： a) 扫描隧道显微镜 5) 粒 子 探 针： a) 离子探针分析 6) 光 子 探 针： a) 光散射颗粒分析

b)共聚焦显微镜 b)共聚焦显微镜 b) 扫描电子显电镜 b) 俄歇电子谱仪 b) 原子力显微镜 b) 质子探针分析 b) 激光表面形貌分析

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