试剂的取用及溶液的配制实验原理

实验室常用溶液及试剂配制

实验室常用溶液、试剂的配制 表一 普通酸碱溶液的配制

名 称 （分子式） 比重 （d） ） ） 盐 酸 （HcL） 硝 酸 （HNO3） 硫 酸 （H2SO4） 冰醋酸 （Hac） 磷 酸 （H3PO4） 氨水（NH3·H2O） 氢氧化钠（NaOH） 氢氧化钾（KOH） 9） 表二 常用酸碱指示剂

指示剂 In 百里酚蓝 （麝香草酚蓝） 甲基橙 3.4 3.1～4.4 红 黄 溴甲酚绿 4.9 3.8～5.4 黄 蓝 0.1%的20%乙醇溶液或0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml 橙0.05%水溶液 1.65 PKHpH 12.～2.8 变色范围色 红 酸色 黄 0.1%的20%乙醇溶液 碱配 制 方 法 0.90～0.91 0） （330） （240） （173） （12） （11.5） （80） （56（4028 15 400 200 134 77 1.69 85 15 39 19 12 6 1.05 99.9 17 253 177 118 59 1.83～1.84 95～98 18 84 42 28 14 1.39～1.40 65～6

实验室常用溶液及试剂配制

一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1

表一 普通酸碱溶液的配制 表二 常用酸碱指示剂配制 表三 混合酸碱指示剂配制

表四 容量分析基准物质的干燥 表五 缓冲溶液的配制

1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液

2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液

5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 8、 常用缓冲溶液的配制

二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4

1、硝酸银（CAgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（CI2=0.1mol/L）标准溶液的配制

3、硫代硫酸钠（CNa2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（CHClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（

常用试剂的配制 一、常用试剂的配制：

1、100g/L钼酸铵溶液：称取100克钼酸铵于500毫升烧杯中加水溶

液、移入1升，稀释至刻度，混匀。（如溶液浑浊，应过滤）。

2、200g/L硫氰酸钾溶液：称取200克硫氰酸钾于500毫升烧杯中，溶解于水，移入1升容量瓶中，稀释至1升体积。

3、50g/L氯化钡溶液：称取50克二氯化钡于500毫升烧杯中，溶解于水，移入1升容量瓶中，稀释至1升体积。

4、100g/L酒石酸溶液：称取100克酒石酸溶于水中，移入1升容量瓶中，稀释至刻度。

5、150g/L氢氧化钾溶液：称取150克氢氧化钾溶于水中，移入1升容量瓶中，稀释至刻度。

6、20g/L二安替比林甲烷（DAM）溶液：称取出20克二安替比林甲烷于烧杯中加水约200毫升，再加1+1盐酸333毫升，搅拌溶解，继续加水稀至1升，混匀，此溶液酸度为2mol/L。保存于棕色瓶中。

7、氨性缓冲液（PH=10）：

称取67.5克氯化铵溶于200毫升水中，加入570毫升浓氨水、稀释至1升。 8、醋酸——醋酸钠缓冲液（PH=5.2~5.9）。

称取无水乙酸钠79克（或称取150克结晶醋酸钠NaAC˙3H2O）溶解于水，加7.7毫升乙酸、稀至1升，用间隔为0.2的PH

实验一 溶液的配制

一、 实验目的

1． 掌握各种浓度溶液的配制及溶液稀释的操作

2． 熟悉规范化地使用台秤、量筒或量杯等仪器的实验操作 3． 培养细心观察，准确操作，认真记录的良好习惯

二、实验原理

溶液的浓度是指一定量的溶液或溶剂中所含溶质的量。常用的浓度表示方法有：

物质的量浓度：CB=nB/V 单位：mol/L 质量浓度：ρB=mB/V 单位：g/L 质量分数：ωB=mB/m 体积分数：φB=VB/V

溶液浓度的配制方法有两种：

1． 用一定量的溶液中所含的溶质来表示溶液的浓度，如ωB，其配制的方法是：将定量的溶质和溶剂混合均匀即可

2． 用一定体积的溶液中所含溶质的量来表示溶液的浓度，如CB、ρB、φB，其配制的方法是：将一定量的溶质与适量的溶剂酰混合，使得溶质完全溶解，定量转移到量筒或量杯中，然后再加溶剂到溶液总体积，最后用玻璃棒搅匀。

三、实验预习题

1． 配制固体溶质的溶液时，该如何操作？ 2． 用浓硫酸配制稀硫酸时，该如何操作？

3． 什么叫浓度？表示溶液的浓度有几种方法？写出其数学表达式

四、实验用品

φB＝0.95的酒精，Na

实验一 溶液的配制

一、 实验目的

1． 掌握各种浓度溶液的配制及溶液稀释的操作

2． 熟悉规范化地使用台秤、量筒或量杯等仪器的实验操作 3． 培养细心观察，准确操作，认真记录的良好习惯

二、实验原理

溶液的浓度是指一定量的溶液或溶剂中所含溶质的量。常用的浓度表示方法有：

物质的量浓度：CB=nB/V 单位：mol/L 质量浓度：ρB=mB/V 单位：g/L 质量分数：ωB=mB/m 体积分数：φB=VB/V

溶液浓度的配制方法有两种：

1． 用一定量的溶液中所含的溶质来表示溶液的浓度，如ωB，其配制的方法是：将定量的溶质和溶剂混合均匀即可

2． 用一定体积的溶液中所含溶质的量来表示溶液的浓度，如CB、ρB、φB，其配制的方法是：将一定量的溶质与适量的溶剂酰混合，使得溶质完全溶解，定量转移到量筒或量杯中，然后再加溶剂到溶液总体积，最后用玻璃棒搅匀。

三、实验预习题

1． 配制固体溶质的溶液时，该如何操作？ 2． 用浓硫酸配制稀硫酸时，该如何操作？

3． 什么叫浓度？表示溶液的浓度有几种方法？写出其数学表达式

四、实验用品

φB＝0.95的酒精，Na

E L I S A试剂配制及实验流程

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。以双抗体夹心法举例说明。

试剂配制：

(1) 包被缓冲液 + 碳酸盐缓冲液)：

Na

2CO

3

NaHCO

3

加蒸馏水至1000ml。（用时稀释成1x，加%BSA）(2) 洗涤缓冲液 0.15M PBST)：

%Tween-20

加在PBS缓冲液1000ml中。

PBS缓冲液：

KH

2PO

4

0.27g

Na

2HPO

4

·12H

2

O 3.58g

NaCl 8g

KCl

加蒸馏水至1000ml。

(3) 封闭缓冲液：

牛血清白蛋白(BSA) 2% 2g

（或5%脱脂奶粉）加洗涤缓冲液100ml。

(4) 稀释液：

牛血清白蛋白 %

加PBS 缓冲液100ml。

(5) 底物缓冲液：

Na

2HPO

4

(无水L，带12结晶水L) 取

柠檬酸(无水L，带1结晶水L) 取加蒸馏水至100ml。

(或Na

2HPO

4

·12H

2

O 1.84g

柠檬酸·H

2

O 0.51g

加蒸馏水至100ml)

(6) TMB(四甲基联苯胺)显色液（显蓝色）：HRP-

TMB(2mg/ml水)

底物缓冲液

30% H

2O 2

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。

2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水

用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris

20ml 甘油

980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g

（ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g

DEPC水 1000ml

分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用

5 HEPES 溶液 HEPES 23.8g

(ph6.8-8.0) DEPC H2O 100ml

6 50X Denhaldt′s 液

聚蔗糖（Ficoll 400）

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g DEPC水 1000ml 分别稀释至2XSSC和0

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g DEPC水 1000ml 分别稀释至2XSSC和0

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。

2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水

用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris

20ml 甘油

980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g

（ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g

DEPC水 1000ml

分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用

5 HEPES 溶液 HEPES 23.8g

(ph6.8-8.0) DEPC H2O 100ml

6 50X Denhaldt′s 液

聚蔗糖（Ficoll 400）