倒置荧光显微镜操作

显微镜及数码成像系统操作简要

第一部分 观察方法步骤 1、明场观察方法步骤

2、相差观察方法步骤 3第二部分 第三部分

、荧光观察方法步骤

使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察) 第一部分 观察方法步骤

1、明场观察方法步骤

步骤 涉及部件

主开关拨到“I” 打开电源开关 选择目镜观察光路 三目观察筒选择杆拨至最内 聚光镜选择明场（BF） 聚光镜选择钮 相差移出光路 载物

显微镜及数码成像系统操作简要

第一部分 观察方法步骤 1、明场观察方法步骤

2、相差观察方法步骤 3第二部分 第三部分

、荧光观察方法步骤

使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察) 第一部分 观察方法步骤

1、明场观察方法步骤

步骤 涉及部件

主开关拨到“I” 打开电源开关 选择目镜观察光路 三目观察筒选择杆拨至最内 聚光镜选择明场（BF） 聚光镜选择钮 相差移出光路 载物

荧光显微镜操作手册

Olympus BX51

物镜： 4 ×0.16 （无DIC）

10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil

荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝

2. WIB 绿（长通）

3. WIBA 绿（带通） 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄

操作步骤：（注意：样品须在低倍镜下放置和取下）

DIC观察：

1. 打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2. 将样品置于载物台上，用样品夹夹好

3. 将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜应

与相应的物镜倍数相匹配 4. 先选用低倍物镜（“10×”）

5. 调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6. 换到高倍镜头，观察样品

7. DIC观察时，光路选择拉杆拉到中间位置，既可

为适应三维光学微细加工及三维光学信息存储研究的需要,研制了共聚焦激光扫描荧光显微镜的工作台式扫描系统,扫描范围138μm×138μm。

第10卷　第6期2002年12月

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Dec.　2002OpticsandPrecisionEngineering

光学　精密工程

Vol.10　No.6

文章编号　1004-924X(2002)06-0582-06

共聚焦激光扫描荧光显微镜扫描系统研制

周拥军,陈德强,黄文浩,夏安东

1

1

1

1,2

(1.中国科学技术大学精密机械及精密仪器系,安徽合肥230026;

2.中国科学院化学所分子反应动力学实验室,北京100800)

摘要:为适应三维光学微细加工及三维光学信息存储研究的需要,研制了共聚焦激光扫描荧光显微镜的

工作台式扫描系统,扫描范围138μm×138μm。工作台采用压电陶瓷驱动器(PZTactuator)驱动的方式来获得高分辨率的位移,采用带柔性铰链的杠杆放大装置来获得较大的位移范围。描述了工作台的工作原理,并对其静态和动态性能进行了测试,实验表明这一扫描系统能很好的应用于共聚焦激光扫描荧光显微镜系统。关　键　词:共焦显微镜;压电陶瓷驱动器;柔性铰链中图分类号:TH742.64

植物细胞骨架的光学和荧光显微镜观察

一、实验目的：掌握植物细胞骨架处理及染色方法。

二、实验原理：用适当浓度的TritonX-100处理时，可将细胞内蛋白

质破坏，但细胞骨架系统的蛋白质却被保存，用光学染料考马斯亮兰R250和荧光染料鬼笔环肽染色，在普通光学显微镜和荧光显微镜下观察微丝结构。

三、实验步骤：

光学观察 1、

撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小若干片）置于装有

pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉；材料预处理时间太短会影响下一步操作，务必过夜处理。 2、 3、 4、 5、 6、

吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20min； 吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗三次，每次8min； 3%戊二醛固定30min；

pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次8min；

0.2%考马斯亮兰R250染色20min或者25μg/ mL罗丹明-

鬼笔环肽染色1小时； 7、

用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺子载玻片上，加盖

玻片，于显微镜下观察。

荧光观察：

1． 固定液中(固定液成份:4 %多聚甲醛, 50 mmol/ L Pipes pH 6.9 ,

5 mmol/ L EGTA , 5mmol/

4XCE系列 金相显微镜一、用 途：4XC 系列倒置金相显微镜主要用于鉴别和分析金属内部结构组织，4XCE倒置金相显微镜为研究金属学金相的重要仪器。4XCE倒置金相显微镜配置落射照明 、长距平场消色差物镜、大视野目镜，图像清晰、衬度好，同时还配有内置偏光观察装置。倒置金相显微镜可用于，铸造、冶炼、热处理的研究，原材料的检验或材料处理后的分析等。本仪器系大专院校进行教学，实验室，工厂质量鉴定的理想仪器。 性能特点： ? 对于外形不规则或较大的试样也可进行显微镜观察。 ? 配置大视野目镜和长距平场消色差物镜，视场大而清晰。 ? 粗微动同轴调焦机构，粗动松紧可调，微动格值:2μm。 ? 三目镜筒,可自由切换正常观察，可进行100%透光摄影

二、成像系统简介：4XCE电脑型倒置金相显微镜是通过光电转换与计算机，数码相机以及电视机等设备结合在一起，不仅可以在目镜上观察，还能在显示屏幕上观察实时动态图像，还可在计算机，数码相机上将所需要的图片进行编辑、保存和打印。 三、技术参数： 平场目镜 放大倍数(X) 10X 平场消色差物镜 放大倍数（X） 10X 20X 40X 100X(油) 光学放大倍数 系统参考放大倍数 目镜筒 载物板孔径 照明系

浅谈倒置奥林巴斯显微镜的基本使用

资料来源： 2012-5-9

调试好的奥林巴斯显微镜CKX31只不过说明基本条件可以提供使用。但是在每次使用前，根据使用不同倍率、不同光路、不同照像系统都需要作一些调整。使用前首先接通电源。察看主机底盘下面的电压标识盘上显示的数字，是否符合额定输入电压.如果仪器内符合额定电压，就可接通电源开关。指示灯点亮之后先给低档电压顶热灯丝。这样作可以延长灯管寿命。逐步加大电压到6V或8V,把光路转换标识盘旋到BI位置上。放置好标本。lox物镜旋入光路。把聚光镜转台置于明视野位置"CT”上。再调孔径光栏。如果观察反差小的标本时，孔径光栏小些。能够显现出标本的反差为适宜.调整双筒目镜的瞳距.有些人两眼瞳距小约52mm，有些人瞳距大些，约58mm。将双目镜筒的宽度调到根据个人瞳距宽度，肴到进人双眼的视野变成一个视野为准再调视度，先用无视度调节补偿环的目镜调焦.当标本看得清晰时，再旋转另一目镜的视度调节补偿环，使标本同样清晰。在进行显微照相时，把光路转换到向相机，可以看到十字线和图框。转动调焦螺旋使十字线变成双条十字线。

较简易的倒置奥林巴斯显微镜CKX41的照像系统安装在倾斜式双目镜筒的直立式单镜筒上.这种单镜筒上

免疫荧光标记法敏感性高,对于含量极微的抗原、普通酶法不容易显示的标本尤为实用,染色技术成熟、简单易行,现已经广泛用于细胞学、分子生物学研究、临床疾病的诊断等工作中,已经成为诸多研究惯常选用的经典方法。另外绿色荧光蛋白作为一个优秀的蛋白合成示踪剂,对于它的观察也需要荧光技术。但是荧光衰竭快,染色标本保存时间很短,重复观察以及显微照相技术难度较大。因此

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（一）显微镜 1 显微镜的结构识别

2显微镜的使用步骤 （1）取镜和安放

[1]右手握住镜臂，左手托住镜座。

[2]把显微镜放在实验台距边缘7 cm左右处,略偏左,安装好目镜和物镜。 （2）对光

[3]转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。要使物镜前端与载物台保持2 cm的距离。

[4]把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜，右眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。 （3）观察

[5]把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，玻片标本要正对通光孔的中心。

[6]顺时针转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛一定要看着物镜）。 [7]用左眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 [8]练习将所观察的标本移到视野中央。 （4）实验完毕

[9] 用擦镜纸将目镜和物镜擦拭干净；

转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。 最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。 注： ①

奥林巴斯bx51m(lympusbx51m)荧光显微镜的使用技巧心得

奥林巴斯bx51m(lympusbx51m)荧光显微镜的使用技巧心得

说到生物，大家就会想到一个一个形态各异的细胞。但是要观察细胞形态的细微变化，一架性价比高的显微镜是必不可少的。从列文虎克发明第一架光学显微镜至今，显微镜为了满足观察者的需要而不断更新换代。目前，生物细胞培养最常用的就是荧光显微镜，可以用于观察绿色，红色和蓝色三种荧光。另外，从观察活细胞角度和固定细胞角度，又可以分为颠倒显微镜和正置显微镜两种。

先说说奥林巴斯的荧光显微镜（奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M），我使用的机器型号是,奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M。

之所以很多人选择奥林巴斯（奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M的荧光显微镜），很大程度上是由于他们家的软件设计的相当人性化。这款软件功能非常强大，从图像拍摄到图像后处理一步到位，可以满足你所能想到和想不到的多种拍摄细节要求。在图像获取方面，该软件的活图采集像素比较高，而且清楚度也很不错，另外还配有图像锁定按钮，很方便将观察区域进行锁定，方便多张相片的采集。在预备拍摄的时候，首先要做好照片的白平衡，这个对任何拍摄都十分重要。