荧光显微镜的操作

显微镜及数码成像系统操作简要

第一部分 观察方法步骤 1、明场观察方法步骤

2、相差观察方法步骤 3第二部分 第三部分

、荧光观察方法步骤

使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察) 第一部分 观察方法步骤

1、明场观察方法步骤

步骤 涉及部件

主开关拨到“I” 打开电源开关 选择目镜观察光路 三目观察筒选择杆拨至最内 聚光镜选择明场（BF） 聚光镜选择钮 相差移出光路 载物

显微镜及数码成像系统操作简要

第一部分 观察方法步骤 1、明场观察方法步骤

2、相差观察方法步骤 3第二部分 第三部分

、荧光观察方法步骤

使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察) 第一部分 观察方法步骤

1、明场观察方法步骤

步骤 涉及部件

主开关拨到“I” 打开电源开关 选择目镜观察光路 三目观察筒选择杆拨至最内 聚光镜选择明场（BF） 聚光镜选择钮 相差移出光路 载物

荧光显微镜操作手册

Olympus BX51

物镜： 4 ×0.16 （无DIC）

10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil

荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝

2. WIB 绿（长通）

3. WIBA 绿（带通） 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄

操作步骤：（注意：样品须在低倍镜下放置和取下）

DIC观察：

1. 打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2. 将样品置于载物台上，用样品夹夹好

3. 将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜应

与相应的物镜倍数相匹配 4. 先选用低倍物镜（“10×”）

5. 调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6. 换到高倍镜头，观察样品

7. DIC观察时，光路选择拉杆拉到中间位置，既可

为适应三维光学微细加工及三维光学信息存储研究的需要,研制了共聚焦激光扫描荧光显微镜的工作台式扫描系统,扫描范围138μm×138μm。

第10卷　第6期2002年12月

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Dec.　2002OpticsandPrecisionEngineering

光学　精密工程

Vol.10　No.6

文章编号　1004-924X(2002)06-0582-06

共聚焦激光扫描荧光显微镜扫描系统研制

周拥军,陈德强,黄文浩,夏安东

1

1

1

1,2

(1.中国科学技术大学精密机械及精密仪器系,安徽合肥230026;

2.中国科学院化学所分子反应动力学实验室,北京100800)

摘要:为适应三维光学微细加工及三维光学信息存储研究的需要,研制了共聚焦激光扫描荧光显微镜的

工作台式扫描系统,扫描范围138μm×138μm。工作台采用压电陶瓷驱动器(PZTactuator)驱动的方式来获得高分辨率的位移,采用带柔性铰链的杠杆放大装置来获得较大的位移范围。描述了工作台的工作原理,并对其静态和动态性能进行了测试,实验表明这一扫描系统能很好的应用于共聚焦激光扫描荧光显微镜系统。关　键　词:共焦显微镜;压电陶瓷驱动器;柔性铰链中图分类号:TH742.64

植物细胞骨架的光学和荧光显微镜观察

一、实验目的：掌握植物细胞骨架处理及染色方法。

二、实验原理：用适当浓度的TritonX-100处理时，可将细胞内蛋白

质破坏，但细胞骨架系统的蛋白质却被保存，用光学染料考马斯亮兰R250和荧光染料鬼笔环肽染色，在普通光学显微镜和荧光显微镜下观察微丝结构。

三、实验步骤：

光学观察 1、

撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小若干片）置于装有

pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉；材料预处理时间太短会影响下一步操作，务必过夜处理。 2、 3、 4、 5、 6、

吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20min； 吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗三次，每次8min； 3%戊二醛固定30min；

pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次8min；

0.2%考马斯亮兰R250染色20min或者25μg/ mL罗丹明-

鬼笔环肽染色1小时； 7、

用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺子载玻片上，加盖

玻片，于显微镜下观察。

荧光观察：

1． 固定液中(固定液成份:4 %多聚甲醛, 50 mmol/ L Pipes pH 6.9 ,

5 mmol/ L EGTA , 5mmol/

免疫荧光标记法敏感性高,对于含量极微的抗原、普通酶法不容易显示的标本尤为实用,染色技术成熟、简单易行,现已经广泛用于细胞学、分子生物学研究、临床疾病的诊断等工作中,已经成为诸多研究惯常选用的经典方法。另外绿色荧光蛋白作为一个优秀的蛋白合成示踪剂,对于它的观察也需要荧光技术。但是荧光衰竭快,染色标本保存时间很短,重复观察以及显微照相技术难度较大。因此

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奥林巴斯bx51m(lympusbx51m)荧光显微镜的使用技巧心得

奥林巴斯bx51m(lympusbx51m)荧光显微镜的使用技巧心得

说到生物，大家就会想到一个一个形态各异的细胞。但是要观察细胞形态的细微变化，一架性价比高的显微镜是必不可少的。从列文虎克发明第一架光学显微镜至今，显微镜为了满足观察者的需要而不断更新换代。目前，生物细胞培养最常用的就是荧光显微镜，可以用于观察绿色，红色和蓝色三种荧光。另外，从观察活细胞角度和固定细胞角度，又可以分为颠倒显微镜和正置显微镜两种。

先说说奥林巴斯的荧光显微镜（奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M），我使用的机器型号是,奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M。

之所以很多人选择奥林巴斯（奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M的荧光显微镜），很大程度上是由于他们家的软件设计的相当人性化。这款软件功能非常强大，从图像拍摄到图像后处理一步到位，可以满足你所能想到和想不到的多种拍摄细节要求。在图像获取方面，该软件的活图采集像素比较高，而且清楚度也很不错，另外还配有图像锁定按钮，很方便将观察区域进行锁定，方便多张相片的采集。在预备拍摄的时候，首先要做好照片的白平衡，这个对任何拍摄都十分重要。

奥林巴斯bx51m(lympusbx51m)荧光显微镜的使用技巧心得

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说到生物，大家就会想到一个一个形态各异的细胞。但是要观察细胞形态的细微变化，一架性价比高的显微镜是必不可少的。从列文虎克发明第一架光学显微镜至今，显微镜为了满足观察者的需要而不断更新换代。目前，生物细胞培养最常用的就是荧光显微镜，可以用于观察绿色，红色和蓝色三种荧光。另外，从观察活细胞角度和固定细胞角度，又可以分为颠倒显微镜和正置显微镜两种。

先说说奥林巴斯的荧光显微镜（奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M），我使用的机器型号是,奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M。

之所以很多人选择奥林巴斯（奥林巴斯bx51m,OLYMPUSBX51M的荧光显微镜），很大程度上是由于他们家的软件设计的相当人性化。这款软件功能非常强大，从图像拍摄到图像后处理一步到位，可以满足你所能想到和想不到的多种拍摄细节要求。在图像获取方面，该软件的活图采集像素比较高，而且清楚度也很不错，另外还配有图像锁定按钮，很方便将观察区域进行锁定，方便多张相片的采集。在预备拍摄的时候，首先要做好照片的白平衡，这个对任何拍摄都十分重要。

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（一）显微镜 1 显微镜的结构识别

2显微镜的使用步骤 （1）取镜和安放

[1]右手握住镜臂，左手托住镜座。

[2]把显微镜放在实验台距边缘7 cm左右处,略偏左,安装好目镜和物镜。 （2）对光

[3]转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。要使物镜前端与载物台保持2 cm的距离。

[4]把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜，右眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。 （3）观察

[5]把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，玻片标本要正对通光孔的中心。

[6]顺时针转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛一定要看着物镜）。 [7]用左眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 [8]练习将所观察的标本移到视野中央。 （4）实验完毕

[9] 用擦镜纸将目镜和物镜擦拭干净；

转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。 最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。 注： ①

显微镜

科技名词定义 中文名称： 显微镜 英文名称： microscope 定义：

由光源聚光器、目镜和物镜组成复式显微放大装置。 应用学科：

细胞生物学（一级学科）；细胞生物学技术（二级学科） 以上内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 求助编辑百科名片

显微镜图片

显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜分光学显微镜和电子显微镜：光学显微镜是在1590年由荷兰的杨森父子所首创。现在的光学显微镜可把物体放大1600倍，分辨的最小极限达0.1微米，国内显微镜机械筒长度一般是160mm。 目录 简述 中文名称 英文名称 仪器简介

显微镜-基本简介 仪器的历史 种类

光学显微镜 简介

暗视野显微镜 相位差显微镜 视频显微镜 荧光显微镜

偏光显微镜 超声波显微镜 解剖显微镜 共聚焦显微镜 金相显微镜 生物显微镜 金相显微镜

透反射式偏光显微镜 简介 操作练习 电子显微镜

场发射扫描电子显微镜 仪器结构

光学显微镜结构 电子显微镜结构 成像原理

光学显微镜成像原理 电子显微镜成像原理 显微镜的维护