核糖体生产蛋白质还是多肽

微生物发酵生产蛋白质与多肽的研究进展

摘 要 :活性肽指能够调节生物机体的生命活动或具有某些生理活性作用的一类肽的总称。这些生物活性肽大多以非活性状态存在于蛋白质长链中，当被酶解成适当的长度时，它们的生理活性才会表现出来。

关键词：生物活性肽；生理活性酶解发酵

前 言:生物活性肽是指能够调节生物机体的生命活动或具有某些生理活性作用的一类肽的总称。这些生物活性肽大多以非活性状态存在于蛋白质长链中，当被酶解成适当的长度时，它们的生理活性才会表现出来。从生物学角度讲，肽链长度少于10个氨慕酸的称为寡肽，超过10个氨基酸的称为多肽，50个以上的氨基酸称为蛋白质，具有某些生理活性的寡肽和多肽统称为生物活性肽。生物体内已经发现、定性了几百种生物活性肽，它们是机体完成各种复杂的生理活动所必不可少的参与者。近年来通过对动植物深焉白原料进行适当方法的水解，已经有大量具有重要生物活性的短肽被释放和辨认出来。由于这些蛋白资源十分丰富和廉价，通过水解这些蛋白质所获得的生物活性放不仅价格便宜、安全性好、工艺简单而且容易进行工业化生产。生物活性肽生产方法主要有动植物组织器官提取法、化学合成法、蛋自酶水解法、基因工程法和微生物发酵法。

1基本概述

肽是由两个或两

微生物发酵生产蛋白质与多肽的研究进展

摘 要 :活性肽指能够调节生物机体的生命活动或具有某些生理活性作用的一类肽的总称。这些生物活性肽大多以非活性状态存在于蛋白质长链中，当被酶解成适当的长度时，它们的生理活性才会表现出来。

关键词：生物活性肽；生理活性酶解发酵

前 言:生物活性肽是指能够调节生物机体的生命活动或具有某些生理活性作用的一类肽的总称。这些生物活性肽大多以非活性状态存在于蛋白质长链中，当被酶解成适当的长度时，它们的生理活性才会表现出来。从生物学角度讲，肽链长度少于10个氨慕酸的称为寡肽，超过10个氨基酸的称为多肽，50个以上的氨基酸称为蛋白质，具有某些生理活性的寡肽和多肽统称为生物活性肽。生物体内已经发现、定性了几百种生物活性肽，它们是机体完成各种复杂的生理活动所必不可少的参与者。近年来通过对动植物深焉白原料进行适当方法的水解，已经有大量具有重要生物活性的短肽被释放和辨认出来。由于这些蛋白资源十分丰富和廉价，通过水解这些蛋白质所获得的生物活性放不仅价格便宜、安全性好、工艺简单而且容易进行工业化生产。生物活性肽生产方法主要有动植物组织器官提取法、化学合成法、蛋自酶水解法、基因工程法和微生物发酵法。

1基本概述

肽是由两个或两

氨基酸、多肽与蛋白质

第十四章 氨基酸、多肽与蛋白质
14.2 写出下列氨基酸分别与过量盐酸或过量氢氧化钠水溶液作用的产物。
a. 脯氨酸 b. 酪氨酸 c. 丝氨酸 d. 天门冬氨酸
答案：
　
14.3 用简单化学方法鉴别下列各组化合物：
　　
　　b. 苏氨酸 丝氨酸 c. 乳酸 丙氨酸
答案：
　　
14.4 写出下列各氨基酸在指定的PH介质中的主要存在形式。
　a. 缬氨酸在PH为8时 b. 赖氨酸在PH为10时
　　 c. 丝氨酸在PH为1时 d. 谷氨酸在PH为3时
答案：

　
14.5 写出下列反应的主要产物
　
　
答案：
　
　
　
14.6 某化合物分子式为C3H7O2N，有旋光性，能分别与NaOH或HCl成盐，并能与醇成酯，与HNO2作用时放出氮气，写出此化合物的结构式。
答案：
　　
　　
14.7 由3-甲基丁酸合成缬氨酸，产物是否有旋光性？为什么？
答案：

　　如果在无手性条件下,得到的产物无旋光活性,因为在α-氯代酸生成的那一步
　　无立体选择性.
14.8 下面的化合物是二肽、三肽还是四肽？指出其中的肽键、N-端及

班级：________________ 姓名：________________ 学号：________________ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _装_ _ _ _ _订_ _ _ _ _线_ _ _（装订线内禁止填写答案）_ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____

一、单项选择题,（在备选答案中只有一个是正确的）(本大题共100小题,100分)

1. 维系蛋白质α-螺旋和β-折叠结构稳定的化学键是

A.氢键 B.离子键 C.二硫键 D.疏水作用 E.肽键

(4)氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,4

11. 在电场中，蛋白质泳动速度取决于

A.蛋白质颗粒的大小 B.蛋白质颗粒的形状 C.带净电荷的多少

D.A+C

E.蛋白质所带电荷的多少，分子量的大小

蛋白质、多肽等大分子的质谱分析

检测仪器:

1、基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)

2、基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱(Autoflex III MALDI-TOF/TOF) 3、纳升液相电喷雾四级杆飞行时间串联质谱仪(micrOTOF-Q II? ESI-Qq-TOF) 主要应用:

1、生物大分子的分子量检测 2、蛋白质、多肽的纯度鉴定 3、蛋白质的肽指纹图谱检测 4、混合组分的分子量分布检测 5、合成物质的分子量检测与纯度评价 6、重组蛋白的分子量检测与纯度评价 7、蛋白质的多肽谱检测 8、血清多肽谱的检测

9、PEG修饰的蛋白药物的研究 样品要求:

1、样品含量: 50-100Fmol (液体约5ul) 2、样品形式: 液体；干粉；胶粒/条带

3、非胶样品: 挥发性盐<20mM，无PBS、SDS和尿素等物质 4、胶类样品: 银染过程中未使用戊二醛作为固定剂 5、保存方式: 液体建议低温，胶类用去离子水防干

蛋白质及多肽质谱鉴定

简介

博奥生物有限公司蛋白质实验室于2006年开始对外提供多肽和蛋白质测试服务，包括多肽和蛋白质的分子量和序列测定，蛋白种类鉴定。博奥采用串联质谱法（Tandem Mass Spectrometry, MS/MS）鉴定蛋白，可靠性高。蛋白经胰酶消化形成的肽段进入质谱，一级质谱检测多肽分子的大小，然后再将肽段打

第五章 蛋白质（Protein) 本章主要内容（Content）

蛋白质的一般性质（General aspects)

■ 结构 ■ 蛋白质-水相互作用，影响蛋白质水溶性的因素 ■ 蛋白质-脂的相互作用 蛋白质的变性（Denaturation）

■ 蛋白质变性产生的效应 ■ 导致蛋白质变性的物理因素 ■ 导致蛋白质变性的化学因素

蛋白质的功能性质（Functional Properties） 定义与分类

水化性质 溶解度与粘度、凝胶作用

组织化 热凝结和形成、纤维的形成热塑挤压、面团 乳化性质 乳化能力与乳化稳定性 起泡作用 起泡性与泡沫稳定性 ?蛋白质的营养特性（Nutritional properties） ?蛋白质的开发利用（Utilization）

植物蛋白质和动物蛋白质：浓缩蛋白质与分离蛋白质利用微生物生产蛋白质——单细胞蛋白 第一节 引言（Introducti

■ 蛋白质是构成生物体的基本物质。

病毒，细菌，激素，植物和动物细胞原生 质都是以蛋白质为基

1

础的。

■ 酶是蛋白质 已经发现数以千计的酶。 ■ 蛋白质是由20种氨基酸构成的聚合物 一、蛋白质的分类： （一）根据组成分类

? 简单蛋白质（

蛋白质 (Protein)

组成（Composition）

?生物大分子（Macromolecule） ?构件分子—氨基酸 (Amino acid)

氨基酸 (Amino acids) R—基团

对氨基酸性质影响强烈

?非极性、疏水性。 ?极性、电中性。

?极性、负电荷、碱性。 ?极性、正电荷、酸性。

水溶液中的氨基酸 两性电解质

水溶液中的氨基酸 酸性氨基酸

水溶液中的氨基酸 碱性氨基酸

分类（Classification）

?非极性、疏水性的 ?极性、电中性的

?极性、带负电荷、碱性的 ?极性、带正电荷、酸性的

?植物蛋白与动物蛋白在氨基酸组成上

的差异——

?人体必须氨基酸——

8种氨基酸

?蛋白质的生物学效价（PER） ?转基因植物蛋白

?各种氨基酸配比的蛋白食品

一级结构（Primary structure）

?氨基酸——氨基+羧酸基 ?肽键(Peptide bond)

一级结构（Primary structure）

?线性结构(Linear polymer of amino

acids) ?氨基酸序列（Sequence）——蛋白质分子

?氨基末端（N-terminal） ?羧酸基末端（C-terminal）

?氨基酸残基(Amin

1- 蛋白质化学

名词解释

（一） 两性离子（dipolarion）与两性化合物 （二） 等电点(isoelectric point,pI)与等离子点 （三） 必需氨基酸（essential amino acid） （四） 稀有氨基酸(rare amino acid)

（五） 非蛋白质氨基酸(nonprotein amino acid) （六） 构型(configuration)与构象(conformation) （七） 肽键、肽平面、肽单位、多肽 （八） N末端与C末端

（九） 蛋白质的一级结构(protein primary structure) （十） 蛋白质的二级结构(protein secondary structure) （十一） 蛋白质的α－螺旋结构 （十二） 蛋白质的β－折叠结构 （十三） 结构域(domain)

（十四） 超二级结构(super-secondary structure) （十五） 蛋白质的三级结构(protein tertiary

第十二章 蛋白质代谢

一：填空题

1.蛋白质的生物合成是以________________作为模板，________________作为运输氨基酸的工具，________________作为合成的场所。 2.细胞内多肽链合成的方向是从________________端到________________端，而阅读mRNA的方向是从________________端到________________端。

3.核糖体上能够结合tRNA的部位有________________部位、________________部位和________________部位。 4.ORF是指________________，已发现最小的ORF只编码________________个氨基酸。

5.蛋白质的生物合成通常以________________作为起始密码子，有时也以________________作为起始密码子，以________________、________________和________________作为终止密码子。

6.SD序列是指原核细胞mRNA的5′-端富含________________碱基的序列

蛋白质纯化

一．可溶性蛋白的纯化

方法 AC IEX GF 粗分离 + + - 中度纯化 + + - 精细纯化 - + + 1. 盐析

硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。 硫酸铵分级沉淀的方法其实很简单，一般就是用浓度从低到高的硫酸铵去沉淀蛋白，可以直接在液体里加固体的硫酸铵就可以，到一定的浓度离心沉淀，上清继续加硫酸铵，再离心，上清再加硫酸铵，然后用电泳检测或者活性检测沉淀的效果。

2. 亲和纯化

Tag His GST MBP Strep(II) Flag

Size (aa) 6 218 396 8 8 Capacity (mg/ml) 40 10 10 6 0.6 MW (kDa) 1 26 42.5 1 1 Cleavage TEV/ Thrombin Thr