生物学院实验室利用分析

生物安全实验室等级

参照美国国立卫生研究所、美国疾病控制中心的标准，我国生物安全实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四个等级，分别对应Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级生物安全标准。 美国国立美国疾控中国卫生病原 操作 一级屏障 二级屏障 卫生研究中心 部 所 P1 BSL-1 一级 不会经常引发健标准的微生物操作 不要求 开放实验台、洗手池 康人疾病 P2 BSL-2 二级 人类病原菌，因BSL-1 操作如： 一级、二级生物安全柜 BSL-1 如： 皮肤伤口、吸入、1、限制进入 实验服、手套、若需要高压灭菌锅 黏膜暴露而发生2、有生物危险警告标志 则采取面部保护措施 危险 3、“利器”安全措施 4、生物安全手册，其中规定废物消毒和医疗观察 P3 BSL-3 三级 内源性和外源性BSL-2 操作如： 一级、二级生物安全柜 BSL-2如： 病源，可通过气1、控制进入 保护性实验服、手套、1、与进入走廊隔开 溶胶传播，能导2、所有废物消毒 若需要则采取呼吸保2、双门进入，门自动致严重后果或生3、洗涤前，实验服消毒 护措施 关闭 命危险 4、有基础血清 3、排除的空气不循环、 4、实验室内负压 P4 BSL-4 四级 对生命有高度危BSL

1、[判断题] 人畜共患细菌性疾病有李斯特菌、沙门氏菌病、鼠疫、鹦鹉热。（分值1.0） 你的答案：正确

2、[判断题] 在遗传学等实验中接触的秋水仙素是致癌物质，实验中可以让少量药品接触到皮肤上。（分值1.0）

你的答案：正确标准答案：错误

3、[判断题] 根据所操作的生物因子的危害程度和应采取的防护措施，将生物安全的防护水平分为四级，1级防护水平最低，4级防护水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平。（分值1.0） 你的答案：正确

4、[判断题] 当实验室活动涉及传染性或潜在传染性生物因子时，不需要进行危害程度评估。（分值1.0） 你的答案：错误

5、[判断题] 生物污染的液体在排放到生活污水管道之前，必须进行污染清除处理。（分值1.0）

你的答案：正确

6、[判断题] 实验动物生物安全性事件，主要表现二方面。一是正常动物在实验过程中，感染上人畜共患病；二是受感染动物由于逃逸或其产生的废弃物处理不当等，造成传染病扩散。（分值1.0） 你的答案：正确

7、[判断题] 用于实验研究的小型啮齿类动物，一般都是无致病原感染的动物，不必在实验过程中注视其生物安全问题。（分值1.

1、[判断题] 人畜共患细菌性疾病有李斯特菌、沙门氏菌病、鼠疫、鹦鹉热。（分值1.0） 你的答案：正确

2、[判断题] 在遗传学等实验中接触的秋水仙素是致癌物质，实验中可以让少量药品接触到皮肤上。（分值1.0）

你的答案：正确标准答案：错误

3、[判断题] 根据所操作的生物因子的危害程度和应采取的防护措施，将生物安全的防护水平分为四级，1级防护水平最低，4级防护水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平。（分值1.0） 你的答案：正确

4、[判断题] 当实验室活动涉及传染性或潜在传染性生物因子时，不需要进行危害程度评估。（分值1.0） 你的答案：错误

5、[判断题] 生物污染的液体在排放到生活污水管道之前，必须进行污染清除处理。（分值1.0）

你的答案：正确

6、[判断题] 实验动物生物安全性事件，主要表现二方面。一是正常动物在实验过程中，感染上人畜共患病；二是受感染动物由于逃逸或其产生的废弃物处理不当等，造成传染病扩散。（分值1.0） 你的答案：正确

7、[判断题] 用于实验研究的小型啮齿类动物，一般都是无致病原感染的动物，不必在实验过程中注视其生物安全问题。（分值1.

一.常用贮液与溶液

1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小

份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无

DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存

于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到

100ml。

1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.

实验室生物安全水平标准

本章总结了传染性微生物和实验动物操作生物安全水平的基本要素。此分 级系统根据对实验人员、环境和社区所提供的保护程度按升序的方式划分。 BSL-1级适用于特性比较清楚、通常对健康成人不致病并且对实验室人员及环境潜

在危害性小的病原体。实验室并不一定要与大楼里的公共通道分开，操作通常在开放的

台面上进行，并遵循标准微生物学操作规程。特殊的防扩散装备或实验设施设计既非必

要，也非常规应用。实验室人员应参加过实验室操作培训，并且由在微生物学或相关学

科方面训练有素的科研管理人员对实验室工作进行监督。

以下标准和特殊操作规程、安全设备和设施适用于BSL-l级病原体。 第一节 生物安全1级(BSL-1) 二、标准微生物学操作规程

1．正在处理培养物或标本时，由实验室主管限制或控制外来人员进入实验室。 2．实验人员在处理完生物活性物质、脱下手套、离开实验室之前必须洗手。 3．工作区内不得进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品以及贮存供人食用的

食物。带隐形眼镜的实验人员仍需配戴护目镜或面罩。食物应贮存于工作区外的专

用橱柜或冰箱内。

4，禁止使用口吸移液技术，应使用机械移液装置。

5．制定使用锐利器具如注射器针头、手术刀片等的安

实验一 分子生物学实验室常用仪器设备简介

一、实验目的

熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用 二、实验原理

1、恒温气浴摇床：用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养，发酵，杂交，生化反应及酶和组织研究等。

2、超净工作台：用于分子生物学无菌操作。

3、低温台式高速离心机：用于分离纯化DNA和蛋白质等，如基因片段的分离，蛋白酶的沉淀和回收等。

4、微量移液管：是连续可调的，计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。有多种规格：①0.5-10μL②10-100μL③20-200μL④100-1000μL。

5、电泳仪：用于确定大分子物质的分子量以及鉴定物种亲缘关系的仪器。

6、PCR仪：用于目的基因的扩增，是一对寡糖核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段。主要用于基础研究和应用研究等领域。

7、灭菌锅：用于细菌和细胞培养及核酸等有关实验使用的试剂，器皿及实验用具的严格灭菌。

三、实验仪器

恒温气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌锅、PCR仪、电泳仪。

四、实验步骤

（一）、恒温气浴要穿的使用： 1、样品瓶牢固放入弹簧夹中

2、接

实验室生物安全应急预案

一、目的

本着对实验室工作人员健康与安全负责的精神，加强实验室生物安全的管理，制定有效的应急处理程序和控制措施，以保证在实验室发生生物安全事件时，做到应急准备充分，信息渠道畅通，指挥系统有效，反应机制灵敏，处置规范操作，从而遏制生物安全事件危害的进一步扩大，保证公众健康和社会稳定。 二、适用范围

本预案适用于发生于微生物实验室和生物安全二级实验室与实验室安全相关的、危害实验室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：

1.病原微生物和有毒有害化学试剂的实验室污染事件； 2.工作人员受到实验室内有毒有害病原微生物或有毒有害化学试剂的感染或侵害；

3.病原微生物、有毒有害化学试剂被泄漏出实验室事件； 4.由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。

三、编制依据

1.《中华人民共和国传染病防治法》 2.《突发公共卫生事件应急条例》 3.《实验室生物安全手册》（第三版）

四、组织机构及职责分工

成立实验室突发生物安全应急领导小组，负责该预案的启动和实施，负责组织实验室突发生物安全事故的应急处置工作。

组长：单位领导 负责预案启动、紧急决策、总协调指挥，同时为事件责任报告人，负责事件的上报

生物实验室解说词

各位领导：

大家好，欢迎各位领导来我校莅临指导。

这是生物实验室，包括学生实验室、准备室、和仪器室三部分，建筑面积171平方米，符合河北省中小学实验室建设标准。

学生实验室面积93平方米，共有实验桌28张，凳子56个，能满足2人一组56名学生的分组实验。在日常教学中，严格按照河北省中学生物演示实验和分组实验目录开足开齐实验，其中演示实验开出率各年级均达到100%，学生分组实验开出率也达到100%，教师对学生的分组实验报告单进行了认真细致的批阅。

准备室面积27平方米，新增设教师实验准备桌、超净工作台等。

仪器室面积有51平方米，各种仪器分别按照通用、专用、标本、模型、挂图、玻璃仪器、药品和其他实验材料和工具九大类别有顺序的整齐摆放，做到不挤压、不侧放，盘架化管理，除玻璃仪器外其他类别仪器分别贴上标签，并且还有橱目标签，标明了仪器的编号、名称和数量。

此外我们实验室的账目齐全，有固定资产总账、明细账、低值易耗账目，并做到每一学年进行一次数据的更新。

实验室管理方面，各位生物教师认真备课，指导学生实验，取得了良好效果，辅助了教学。

以上是我们学校生物实验室的基本情况，望各位领导提出宝贵意见。

生物安全手册

（第一版）

AA大学附属RYC医院检验科

AA大学附属RYC医院检验科目录

AA大学附属RYC医院检验科目录

目录

1．生物安全管理体系1-1

1.1 紧急事件电话和办公室联系方式

1.2 生物安全管理机构

1.2.1 RYC医院生物安全管理机构

1.2.2 RYC医院检验科生物安全管理小组

1.3 职责

2．生物安全评估和管理2-1

2.1风险评估和风险管理表

2.2 暴露途径

2.3 生物安全等级和检查制度

3．标志3-1

3.1 墙面标志

3.2 门上标志

3.3 标贴和颜色

3.4 外送维修或处理的设备

4．生物安全要求和人员管理4-1

4.1 生物物质的使用登记

4.2 生物安全柜

4.3 人员管理

5．医学监督程序5-1

5.1 暴露于结核杆菌实验室工作人员的筛选

5.2 免疫

5.3 医学限制

5.4 实验室工作人员血清贮存

6．个人防护装备（PPE）6-1

6.1 实验服、隔离衣

6.2 手套

6.3 工作鞋

6.4 护目镜

6.5 口罩、帽子

7．实验室设备7-1

7.1 生物安全柜

7.2 离心沉淀程序

AA大学附属RYC医院检验科目录

7.3 化学吸附真空管和过滤器

7.4 注射器和针头

7.5 移液管

7.6 搅拌机、混匀器、超声波清洗和粉碎机

7.7 冻干

7.8 其它设备（水浴箱、冷藏箱、

实验室生物安全应急预案

一、目的

本着对实验室工作人员健康与安全负责的精神，加强实验室生物安全的管理，制定有效的应急处理程序和控制措施，以保证在实验室发生生物安全事件时，做到应急准备充分，信息渠道畅通，指挥系统有效，反应机制灵敏，处置规范操作，从而遏制生物安全事件危害的进一步扩大，保证公众健康和社会稳定。 二、适用范围

本预案适用于发生于微生物实验室和生物安全二级实验室与实验室安全相关的、危害实验室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：

1.病原微生物和有毒有害化学试剂的实验室污染事件； 2.工作人员受到实验室内有毒有害病原微生物或有毒有害化学试剂的感染或侵害；

3.病原微生物、有毒有害化学试剂被泄漏出实验室事件； 4.由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。

三、编制依据

1.《中华人民共和国传染病防治法》 2.《突发公共卫生事件应急条例》 3.《实验室生物安全手册》（第三版）

四、组织机构及职责分工

成立实验室突发生物安全应急领导小组，负责该预案的启动和实施，负责组织实验室突发生物安全事故的应急处置工作。

组长：单位领导 负责预案启动、紧急决策、总协调指挥，同时为事件责任报告人，负责事件的上报