饲养斑马鱼的最适温度

斑马鱼是一种常见的热带鱼。和人类有着高度的基因同源性，可以作为模式生物用于实验研究，同时饲养便捷、成熟周期短、排卵量大、体外受精发育、胚体透明，已广泛应用于科研实验室。目前，全球范围内大约有超过1500个斑马鱼实验室，斑马鱼养殖的需求带动了饲养设备的发展，市场火爆。下面简单介绍一下上海地区的斑马鱼饲养设备。

一、产品用途

1. 满足斑马鱼等小型模式生物的产卵、孵化、生长等过程； 2. 应用于胚胎学、发育生物学、毒理学、分子生物学等科目的相关分析测试研究；

3. 建立药物筛选、治疗的研究平台；

4. 应用于环境科学、农业科学的一些重大问题的研究与解决。 二、技术参数

1. 系统支架：不锈钢316L材质；

2. 养殖缸（可选）：PC材质，注塑一次成型，食品级、耐高温高压（国际标准），抗摔性强，防漏坚固。养殖水槽采用自洁性设计，能有效进行水体交换，每个养殖缸供水单独可控。

3. 水循环装置：包含供水、供气管路，循环泵，增氧泵，斑马鱼专用出水、出气调节阀；

4. 水处理装置（设有不锈钢网预过滤器，代替传统的过滤棉，节省耗材费用，降低运行成本）：包含过滤系统（四级过滤）、紫外线杀菌系统、加热系统等；

5. 全自动控制系统：可自动控制水循环、紫外杀菌、温

实验四 斑马鱼胚胎的显微注射

08生物技术 刘佳

一、实验目的

1、练习针刺细胞（未受精卵、去卵核、早期胚胎细胞或体外培养细胞）； 2、练习微吸管制备；

3、掌握细胞显微移植技术（细胞核、外源基因）； 4、了解显微注射的应用及注意事项。

二、实验器材及材料

斑马鱼胚胎、酚红、显微镜；显微操作仪；拉针仪

三、实验原理及步骤

显微注射（microinjection）技术是利用显微操作系统和显微注射技术将外源目的基因直接注入到受精卵的原核中，使外源基因整合到受体细胞的基因组内，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体动物的子宫内发育，从而获得转基因动物。它是目前基因转移效率较好的一种基因转移方法，可直接用不含有原核载体DNA片段的外源基因进行转移；外源基因的长度不受限制, 可达100kb ；实验周期相对比较短。

注射过程：1、注射针内装液：使用无菌的微量加样器从微注射针的后部加入待注射样品酚红一滴。2、注射针安装和定位：（1）将装液后的针头的游离端安在连接器上，然后旋紧连接器以固定针头，再将其固定到微操作仪的托针管上；（2）把载有待注射样本的培养皿放在显微镜载物台上，用低倍物镜对准细胞调焦；（3）移动针头并在显微镜下调整微操作仪，

斑马鱼实验预习报告

一、 实验目的

1、 了解斑马鱼形态结构特点

2、 掌握斑马鱼的分类地位

3、 掌握斑马鱼胚胎发育过程并探究其胚胎发育的影响因素

二、 实验内容

1、 斑马鱼的外部形态观察 2、 写出斑马鱼的分类地位

3、 设计实验探究斑马鱼胚胎发育的影响因素

三、 实验操作

1、 观察斑马鱼的形态

斑马鱼(zebra fish)，又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼（Brachydanio rerio），原产于印度、孟加拉国。 斑马鱼(B. rerio)，是淡水水族箱观赏鱼，原产於亚洲，体长约4公分(1.5吋)，具暗蓝与银色纵条纹。

体长4～6厘米。体呈纺锤形。背部橄榄色，体侧从鳃盖后直伸到尾未有数条银蓝色纵纹，臀鳍部也有与体色相似的纵纹，尾鳍长而呈叉形。雄鱼柠檬色纵纹；雌鱼的 蓝色纵纹加银灰色纵纹。

2、 斑马鱼的分类地位

动物界

脊索动物门 脊椎动物亚门

硬骨鱼纲

辐鳍亚纲 真骨鱼总目

斑马鱼 鲤科

短担尼鱼属 3、 设计实验

斑马鱼的胚胎发育经过受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、胚层分化及出膜几个时期。

实验猜想：影响斑马鱼胚胎发育的因素有水温、营养成分、氧气等 实验方

灯科鱼及饲养

最近闲来无事，看了很多论坛的灯鱼板块，但是总感觉缺了些什么，而且有些帖子的回复有时真让我哭笑不得，也使一些想饲养灯鱼的鱼友走上误区，尤其在混养的种类上，更是令很多误信他人不准确的言论后造成混养失败的鱼友们彻底远离灯鱼，所以鄙人在此简单的总结一下这几年饲养灯鱼的经验，由于鄙人能力与知识有限，希望大家踊跃指出我的错误，在此献丑了。

一。什么是灯鱼？

百度百科是这么写的‘‘灯鱼最初为一类原产于南美洲亚马逊河流域的小型灯科鱼类，近年由于模拟“热带雨林”的水草造景缸而从西欧的荷兰一直热到大陆,作为水草缸的重要主角。灯鱼是一类群栖性鱼类，群游于水草之间，体色绚丽多彩，尤其身上的红光、蓝光或绿光，可以反射出闪烁的光芒，被誉为“会游泳的宝石”。’’有此可见其实灯鱼只是一类小型鱼类的泛指，例如有鲤科、脂鲤科、鳉鱼（蓝眼灯等）、彩虹科等，中国的一些原生鱼也可算作灯鱼的范畴，例如广东省产的白云金丝（唐鱼），几乎遍布中国东南部的青鱂，还有很多，在此不一一列举了。

灯鱼体型也千差万别，最小的应该算Paedocypris progenetica(精灵露比），而本人已知最大的灯鱼之一要算牛奶灯，可以和龙鱼混养的灯鱼。 市面上的灯鱼一般都产

吃鱼聪明 什么鱼最适合孩子

“吃鱼的孩子聪明”，这句话常被家长用于鼓励孩子多吃鱼。的确，鱼类营养丰富，其中丰富的DHA、EPA，能够促进儿童大脑发育和智力发展。此外，鱼肉中丰富的蛋白质、维生素A、维生素D、各种微量元素等，能为孩子提供平衡的膳食营养。鱼虽好，但从安全角度来说，还是要慎重给孩子选择。

从食用安全性的角度来说，一些无肌间刺(俗称刺少)的鱼类比较适合孩子食用，比如大黄鱼、三文鱼、鲳鱼、带鱼等。

从受环境污染程度的角度看，一般自然生长的海鱼类要比人工养殖的海、淡水鱼类污染更少，尤其是在人工养殖地环境污染比较严重的情况下，更应该避免给孩子食用这些鱼类。 从生物链重金属富集来看，最好是选择中等以下个头的鱼类，鱼的个头越大，生长期越长，体内所积累的污染元素越多。因此，家长在给孩子选择鱼类时，不必专挑名贵的鱼，可以就地取材，选择价格相对实惠的鱼，如鲐鱼(青鲇)、蓝圆鲹(竹莢鱼、池鱼、黄鲇)、马鲛鱼(鲅鱼)、沙丁鱼等鱼类，DHA含量都很高、蛋白质含量也高，而且肉多味美。

另外，鱼的种类丰富，产地也很多，给孩子吃鱼时没必要拘泥于某一种或几种鱼类，要注意多给孩子尝试不同品种的鱼，这样可以让孩子品尝不同的口味，综合摄取不同营养特点的鱼肉，并养成不挑食的好习惯

显微注射斑马鱼胚胎分析基因功能

数以百万计的斑马鱼雌鱼是从饲养箱中繁殖出来的，受精卵产在箱的底部并得以收集。收集的鱼卵排列在位于培养皿中的载玻片的一侧，然后用气体推动注射针中的样品，并对显微注射设备进行调节使注射量的多少符合要求。最后，当卵发育至合适的时间时进行显微注射。

1. 简介（略） 2. 鱼卵的收集

在注射之前(前一天)将鱼放在饲养箱中分开的区域。为使取得卵较多，可按一只雄鱼对两只雌鱼的比例分配。第二天清晨开灯后，取出饲养箱中的隔板，使鱼不受干扰地交配大约20分钟。用滤网收集饲养箱中的鱼卵，孵化液（egg water，注1）冲洗，转移到含孵化液的培养皿中。鱼可重新分组入大缸以便再次取卵注射。注意取卵的时间以便获得最大数量的分裂不超过一细胞期的卵。最后，把一片载玻片放在倒扣的10cm培养皿盖上，用移液管将鱼卵在载玻片的一侧排成一列，然后用Kimwipe（注2）放在载玻片的另一侧吸去多余的水，然后准备显微注射针。

3. 拉针，加入注射液及相关准备

用拉制显微注射针的机器将外径1mm的毛细玻璃管拉成两根针，用15cm培养皿存放注射针。针可提前拉制好。拉针用以下设置: heat 645, pull 60, velocity 80。用微量加样枪

木瓜蛋白酶最适PH值和温度

木瓜蛋白酶﹙Papain﹚是由种植的番木瓜未成熟果实中割取乳液经采用生物技术提取、微滤、超滤、冷冻干燥提练而得的纯天然、健康、安全、高效的生物酶制剂。本品是蛋白酶混合物，含木瓜蛋白酶、木瓜凝乳酶、木瓜肽酶。有很强的蛋白水解催化活性及凝乳、溶菌活性，还具备脂解能力及蛋白合成能力，主要是催化蛋白质水解，切割分解点很多，优先分解精氨酸，苯丙氨酸的肽鍵。木瓜蛋白酶是由212个氨基酸组成，分子量为21000，属于含疏基﹙—SH﹚肽链内切酶，由于木瓜蛋白酶具有酶活高，热稳定性好，可广泛应用于食品、医药、日化、饲料、皮革及纺织等行业。

一、 酶解原理

在一定温度，PH值及底物浓度下，木瓜蛋白酶能够分解蛋白质生成蛋白胨，多肽及氨基酸等物质。

二、 活力定义

紫外光分光度法：在测定条件（37±0.2℃；PH值7.0）每分钟水解酪蛋白释出的三氯乙酸可溶物在275nm波长有吸光度与1微克酪氨酸的吸光度相当时，所需的酶量即为一个活力单位，用u/g表示。

三．木瓜酶最适PH值

木瓜蛋白酶的最适pH值：每个酶都有最适pH，在此pH下催化反应的速率是它的最高值。木瓜蛋白酶可进行催化反应的pH作用范围是3.5~9，最适pH范围是5~7。

四、木瓜

木瓜蛋白酶最适PH值和温度

木瓜蛋白酶﹙Papain﹚是由种植的番木瓜未成熟果实中割取乳液经采用生物技术提取、微滤、超滤、冷冻干燥提练而得的纯天然、健康、安全、高效的生物酶制剂。本品是蛋白酶混合物，含木瓜蛋白酶、木瓜凝乳酶、木瓜肽酶。有很强的蛋白水解催化活性及凝乳、溶菌活性，还具备脂解能力及蛋白合成能力，主要是催化蛋白质水解，切割分解点很多，优先分解精氨酸，苯丙氨酸的肽鍵。木瓜蛋白酶是由212个氨基酸组成，分子量为21000，属于含疏基﹙—SH﹚肽链内切酶，由于木瓜蛋白酶具有酶活高，热稳定性好，可广泛应用于食品、医药、日化、饲料、皮革及纺织等行业。

一、 酶解原理

在一定温度，PH值及底物浓度下，木瓜蛋白酶能够分解蛋白质生成蛋白胨，多肽及氨基酸等物质。

二、 活力定义

紫外光分光度法：在测定条件（37±0.2℃；PH值7.0）每分钟水解酪蛋白释出的三氯乙酸可溶物在275nm波长有吸光度与1微克酪氨酸的吸光度相当时，所需的酶量即为一个活力单位，用u/g表示。

三．木瓜酶最适PH值

木瓜蛋白酶的最适pH值：每个酶都有最适pH，在此pH下催化反应的速率是它的最高值。木瓜蛋白酶可进行催化反应的pH作用范围是3.5~9，最适pH范围是5~7。

四、木瓜

一、仔猪的饲养

（一） 仔猪的出生

一般情况下，母猪怀孕期为114天左右，即3个月加3周加3天，也就是我们常说的“333”天。

母猪的分娩过程较为顺利，全窝仔猪出生时间约需24个小时，最短的仅需一个小时左右，个别的长达12个小时以上。大约间隔5-25分钟出生一头仔猪，有时也能连续产出2-3头，接产时应留心这些情况，以避免接产不及时而造成窒息死亡。母猪分娩时间的长短与母猪的体质强弱或产前的运动有关，体质强的母猪一般分娩时间较短，适当增加母猪产前的运动，有利于缩短分娩时间。若产圈内声音嘈杂或有生人进入，敏感的母猪也会延长时间。分娩时，若阵缩不力，可以用催产素（脑垂体后叶素）30-50国际单位，皮下一次注射，促使仔猪出生。在最后一头仔猪产出约1小时后排出胎衣，标志着分娩结束。接产者应立即将胎衣和弄脏的垫草清除出去，防止个别母猪吞食后形成吃仔猪的恶癖。如产后24小时胎衣不下来，可用脑垂体后素每次20-40国际单位，或用麦角浸膏1-2毫升皮下注射。同时可服用抗生素防止尿道感染。

1、 怎样接产仔猪

正常情况下，每头仔猪从母猪产道内排出来的过程是较快的。当母猪腹部强烈努责，后肢伸直，尾巴翘起时就将有仔猪产出，

1

应准备接产。

仔猪出生后应及时把仔猪鼻孔

生物11101班 1105151014 张佳会 1105151015 李彬煜 翻译

斑马贻贝(Dreissena polymorpha)生物体内积累人类的水源性原生动物:对水中生物监测

M. Palos Ladeiro, D. Aubert, I. Villena, A. Geffard, A. Bigot

关键词：隐孢子虫 肠梨形鞭毛虫 刚地弓形虫 生物体内积累 亲器官性 斑马贻贝

摘要：隐孢子虫，肠梨形鞭毛虫和刚地弓形虫是普遍存在的病原菌，它们的水传播方式已经在

很大程度上证明了。因为它们在不同的河道中被发现，它们和水中生物的相互作用就成为可能。河道生物监测中的原生动物监测目前是建立在大型水过滤基础上的。斑马贻贝Dreissena polymorpha是生态毒理学研究中精选的生物模型，它已经被用来检测河道中的化学污染了。在目前的研究中，斑马贻贝是一种新的用于检测水中原生动物污染的工具。在活的有机体内暴露是在实验室中进行实验的。斑马贻贝被暴露在不同原生动物浓度中一个星期。原生动物检测是通过Taqman实时qPCR实现的。我们的实验证实了贻贝中的隐孢子虫、肠梨形鞭毛虫和刚地弓形虫的卵囊的积累与周围环境的污染是成比例的，在肌肉组织中