两种外源性蛋白共沉淀
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免疫共沉淀
免疫共沉淀 from WHU SKY
1用细胞刮子收细胞，3000rpm，5min，离心，去上清；或者弃培养基后直接用裂解液裂解细胞。从细胞裂解开始要保持低温，冰上或4度冰箱或4度离心机。
2 PBS清洗，重复步骤1
3选择合适的bufer裂解细胞，现加1000XAL（一般核质均分布的建议使用NP-40，核内分布的建议使用High Salt ，只要求拉下抗原的建议使用RIPA buffer），加入1ml Buffer (106-107个细胞)，4℃,30min（在功能旋转仪上旋转裂解）。 4 12000rpm，15min，离心取上清（若上清仍浑浊，可重复离心1-2次）50ul上清作为 Input，其它各取400ul分别加入特异性抗体和对照IgG均1ug（可根据抗体效价酌情增减），4℃,旋转2-4h，
加抗体时要计算使用相同抗体的样品数，取（N+1~2）*1ug，用小量裂解buffer
稀释，再均分到各样品中，以保证抗体加入量的一致。 5细胞裂解液和抗体孵育期间，准备Protein G（一个反应20ul纯beads，如果beads原管中液体和beads体积比是1:1，一个样品取总体积40ul，多个样品需要多取1-2个样品的beads/液体混合物）
两种外源性有机物料对设施土壤磷变化的影响
两种外源性有机物料对设施土壤磷变化的影响
黄敏，尹维文，余婉霞，周开来，黄永炳，石小娟
（武汉理工大学资源与环境工程学院，武汉430070）
摘要：采用室内强化模拟试验研究了90d培养期内稻草和草炭2种外源性有机物料对设施菜地土壤磷素转化的影响。结果显
kg-1和4gCkg-1的稻草处理土壤微生物生物量磷分别增加111.1%耀310.0%和197.7%耀356.3%，添加量为2gC草示，与对照相比，··kg-1和4gCkg-1的稻草处理土壤有效磷平均降低了15.0%和炭处理分别增加23.7%耀54.6%和63.2%耀157.1%；添加量为2gC··20.2%，（45d）土壤易解吸磷30d后持续降低，培养结束时稻草和草炭处理土壤草炭处理土壤有效磷与对照差异在前期并不显著；
添加稻草和草炭有利于设施土壤磷素的管理，且稻草的效果总体上比草炭的要好；Fe-P是调控设施土呈显著线性相关。研究表明，壤磷素周转与流失的重要形态。
设施菜地；磷形态；外源性有机物料关键词：土壤磷；转化；X53中图分类号：
A文献标志码：
1672-204303-0501-08文章编号：（2015）
doi:10.11654/jaes.2015.03.01
两种外源性有机物料对设施土壤磷变化的影响
两种外源性有机物料对设施土壤磷变化的影响
黄敏，尹维文，余婉霞，周开来，黄永炳，石小娟
（武汉理工大学资源与环境工程学院，武汉430070）
摘要：采用室内强化模拟试验研究了90d培养期内稻草和草炭2种外源性有机物料对设施菜地土壤磷素转化的影响。结果显
kg-1和4gCkg-1的稻草处理土壤微生物生物量磷分别增加111.1%耀310.0%和197.7%耀356.3%，添加量为2gC草示，与对照相比，··kg-1和4gCkg-1的稻草处理土壤有效磷平均降低了15.0%和炭处理分别增加23.7%耀54.6%和63.2%耀157.1%；添加量为2gC··20.2%，（45d）土壤易解吸磷30d后持续降低，培养结束时稻草和草炭处理土壤草炭处理土壤有效磷与对照差异在前期并不显著；
添加稻草和草炭有利于设施土壤磷素的管理，且稻草的效果总体上比草炭的要好；Fe-P是调控设施土呈显著线性相关。研究表明，壤磷素周转与流失的重要形态。
设施菜地；磷形态；外源性有机物料关键词：土壤磷；转化；X53中图分类号：
A文献标志码：
1672-204303-0501-08文章编号：（2015）
doi:10.11654/jaes.2015.03.01
两种老公，两种人生
他：“石头剪子布。谁输了谁去。”
她：“算了。我自己去吧。”
B:他们坐在一起看韩剧。她起身。他问“干吗去？”
她：“去接杯水。”
他：“你坐这看吧。我去给你接。”
女人多可怜。她对男人唯一的要求就是“疼她”。你可以什么都没有。只要你疼她。她就有足够的勇气把自己的下半辈子交给你。
A:他晚上下班。给她打电话“宝贝儿。我晚上和朋友出去吃饭。”
她：“你不是答应我陪我逛街的吗？”
他：“改天吧！”
她默默地流泪。为什么每次都是这样？
B:他下班的时候打电话给她:“亲爱的。别人给我一张奥运会的票。巴西队啊！一会儿我去
看球了啊。”
她：“哦。这样啊。好吧。”
他：“怎么不高兴了？”
她：“你忘了。上周说好今天我朋友和她男朋友请我俩吃饭啊。”
他：“哎呀。对不起亲爱的。我忘记了。那我把票给别人吧。我陪你去吃饭。”
她：“不要了。吃饭可以改天。或者你先去看。我们等你。”
他：“那不行。答应你的事情必须得做到。再说你自己跟他俩在一起像电灯泡似的。你肯定
不舒服啊”
她：“没事……”
没等她说完。他很强势的告诉她“好了。听我的。你收拾一下。我一会儿去接你。”
其实女人不是不懂事。只是。她需要碰上一个懂事的男人。其实。情侣之
15.1两种电荷
第十五章 电 流 和 电 路 第1节 两种电荷
[学习重点] 两种电荷及电荷间的相互作用规律；
[学习难点] 电荷间的相互作用规律， 验电器的原理及电荷的移动
[教 具] 丝绸、毛皮、橡胶棒、玻璃棒、散开的塑料绳，碎纸屑、验电器、
金属棒，多媒体设备。
[教学过程]
一、创设问题情境：
用多媒体展示几幅摩擦起电的图片，说明在干燥的天气里，衣服表面容易吸附灰尘，引出课题。
二、展示学习目标：
1、什么是摩擦起电现象？电荷的种类有几种？电荷间的相互作用如何? 2、验电器原理和作用各是什么？什么是电荷量？电荷量的单位是什么？ 3、原子的结构是怎样的？摩擦起电的实质是什么？ 4、生活中常见的物品中，哪些是导体？哪些是绝缘体？
三、围绕问题，合作探究
（一）、两种电荷
阅读课本32页至33页内容，请自主完成下列问题，思考：
当空气干燥时用塑料梳子梳头发，为什么头发会随梳子“飘”起来；如果我们身上穿了化纤衣服，衣服会粘在皮肤上，在晚上脱衣时，有时会发出响声，甚至出现火花。这些现象发生的原因是什么？ 1.摩擦起电：[演示实验：]
用毛皮摩擦橡胶棒，用丝绸摩擦玻璃棒，分别把棒靠近纸屑，乒乓球等轻小物体，现象：_________ _。说明摩擦过的物体能够
两种电荷教学设计
《电荷》教学设计
【教材分析】
《电荷》是人教版八年级第五章第一节，本节的教学内容有：摩擦起电现象、两种电荷及其作用规律、验电器、电荷量及其单位、原子结构、原子核、电荷在导体中定向移动。其中两种电荷及其作用规律是教学重点，认识自然界只有两种电荷同时又是教学难点。摩擦起电是人类最早发现的电现象，两种电荷及其相互作用规律是进一步深入学习电流概念的关键，因此本节课作为初中电学起始课，具有很重要的地位。 【教学目标】 1．知识与技能
●认识摩擦起电的现象，了解电荷的种类及电荷间的相互作用规律； ●了解验电器的原理及其构造作用，了解电荷量及其单位；
●了解原子结构，认识元电荷，了解金属中存在自由电子和电荷的移动，了解导体和绝缘体。
2．过程与方法
●经历实验探究活动感受摩擦起电，知道带电体的性质；
●在认识自然界只有两种电荷的过程中，感受人们所用的推理方法； ●尝试应用已知的科学知识去解决具体的问题。 3．情感态度与价值观
●关心生活、生产、自然现象中常见的电现象（如摩擦起电等），对电荷种类的探究产生兴趣，能主动利用简易器材动手做实验，激发学生主动学习的兴趣；
●具有对科学的求知欲，乐于探索、善于
免疫共沉淀Co-IP步骤
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤
一、原理：
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
其优点为：（1）相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点为：（1）可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；（2）两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；（3）必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正
免疫共沉淀Co-IP步骤
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤
一、原理：
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
其优点为：（1）相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点为：（1）可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；（2）两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；（3）必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，所以，若预测不正
社区矫正的两种模式
社区矫正的两种模式
靳利飞
2012-12-18 16:26:03 来源：《中国社会导刊》(京)2008年10下期
【英文标题】Two Models of Community Correction
【内容提要】 在我国探索“非犯罪化”和“非刑罚化”的刑法改革过程中，社区矫正是一项受到政府和学界大力推崇和普遍赞誉的重要的非监禁执行活动。近几年，社区矫正试点工作在全国迅速扩展。目前，我国的社区矫正基本上形成了在基本价值理念、运作方式等方面都有所区别的两种模式：“北京模式”和“上海模式”。
社区矫正的“北京模式”
北京市是全国范围内唯一将社区矫正试点工作扩大到整个辖区的地区。北京市于2001年底开始社区矫正工作，于2002年上半年在司法局内成立专门的矫正工作机构——监狱劳教工作联络处，全权负责北京市的社区矫正工作。同时，组织力量进行专门的社区矫正工作调研，并进行假释和监外执行等犯罪人员社区矫正的理论研究和实践探索。2003年7月1日，北京将东城、房山、密云作为社区矫正的首批试点区县。之后，逐年加大试点工作的深度和广度。2004年5月1日，北京市决定将全市的所有区县均纳入试点范围。
社区矫正的“北京模式”，是由北京市社
两种不同的医疗观
两种不同的医疗观
——中西医之比较
寿建新
中西医是在两种不同的历史条件下形成的。中医是建立在生产力水平低下、科学不发达的朴素唯物主义基础上的。虽有许多独到之处，也对人体生理、病理、防病、治病等研究提出许多有价值的观点，但总的说，对疾病认识比较笼统。西医是建立在近代自然科学不断发展基础上的，它通过解剖学、生理学、病理学、微生物学及各种实验检查和物理检查，对疾病的认识较为深入和具体。
这是两中不同的医疗观！
这两种不同的医疗观，蕴含着不同的哲学思想，反映着不同的时代精神。这从中西医各自的特点中清晰表现出来。中西医由于理论基础、结构和体系的不同，对疾病认识不同，因而诊疗原则和结果也不同。中医的特点是坚持一个观念——整体观念和两个原则：唯物主义本体论的实践原则和辨证论治原则。
西医的特点是什么呢？
西医的第一个特点是分析实验。
从比利时解剖学家维萨利斯（1514-1564）1543年发表《人体构造》一书开始，到1628年英国医生哈维（1578-1657）用实验证明血液循环的规律之后，近代医学开始迅速发展起来。随着自然科学的进步，在不太长的时间内，生理学、病理学、生物化学、微生物学相继产生并确立为科学。最后，精神系统生理学、巴甫洛夫高级神经活