家兔离体小肠实验

乙酰胆碱对离体家兔小肠运动作用

摘要：通过观察乙酰胆碱对家兔离体肠肌收缩运动的影响，探究其基本原理和作用机制。方法：取家兔离体肠肌一段，放置于盛有38℃的麦氏流浴槽中并连接张力换能器，利用生物信号采集处理系统进行数据收集，观察其收缩活动的特点并记录，分析得出结论。 结论：滴加乙酰胆碱（Ach）后，肠肌运动节律较规则，频率和幅度都增大，紧张性增强；先滴加阿托品，肠肌运动节律不规则，频率减小，幅度减小，紧张性降低，随之滴加乙酰胆碱后，肠肌运动节律没有明显改变。结论：乙酰胆碱（Ach）能增加肠肌兴奋性；乙酰胆碱是作用于胃肠平滑肌膜上的M受体来使肠肌兴奋。 关键词：乙酰胆碱；离体肠肌；肌收缩；M受体

Abstract :To explore its mechanism of action, observing how the acetylcholine works on isolated rabbit intestinal muscle movement. Form rabbit isolate intestinal muscle for some, put it in Magnus’ bath containing 38℃ Tyrode’s sol

教学时数 2学时 实验原理 一、 离体实验

1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验 2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量

药物的筛选。 3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。 （1）温度：38±0.5℃ （2）通氧气：1－2气泡/s

（3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。

二、离体肠管实验

1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择 （1）小肠：十二指肠、空肠、回肠

（2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。 （3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验 2、肠内受体及作用原理

（1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。

（2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠

平滑肌兴奋而收缩。 （3）药品对受体的作用：

1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩

幅度增加，蠕动加强。 2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，

可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。

3、肾上腺素

实验数据分析

1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图2. 洗脱Ach后的小肠运动曲线

由图可知，加入0.01?h后，可见离体肠管活动增强，曲线出现收缩频率变快，幅度增加。主要原因和消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M型乙酰胆碱受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。

2. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图3. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图4. 洗去CaCl2后的小肠运动曲线

由图可知，加入2êCl2溶液2滴后，离体肠管活动稍有减弱，描记曲线出现收缩幅度略微减弱。可能是因为加入CaCl2后，细胞内Ca2+浓度升高，一直处于较高水平。生成钙调蛋白复合物后激活MLCK，造成肌肉收缩后并没有明显的Ca2+浓度下降，MLCK一直维持活性，横桥与肌动蛋白解离不彻底，肌肉不完全舒张，

实验数据分析

1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图2. 洗脱Ach后的小肠运动曲线

由图可知，加入0.01?h后，可见离体肠管活动增强，曲线出现收缩频率变快，幅度增加。主要原因和消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M型乙酰胆碱受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。

2. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图3. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图4. 洗去CaCl2后的小肠运动曲线

由图可知，加入2êCl2溶液2滴后，离体肠管活动稍有减弱，描记曲线出现收缩幅度略微减弱。可能是因为加入CaCl2后，细胞内Ca2+浓度升高，一直处于较高水平。生成钙调蛋白复合物后激活MLCK，造成肌肉收缩后并没有明显的Ca2+浓度下降，MLCK一直维持活性，横桥与肌动蛋白解离不彻底，肌肉不完全舒张，

不同因素对家兔离体肠肌运动的影响

浙江中医药大学

【摘要】目的：观察盐酸(HCl)、氢氧化钠(NaOH )、温度、肾上腺素(E)、乙酰胆碱(Ach)、缺空气对家兔离体肠肌运动的影响。 方法：分别给予离体家兔肠肌标本HCl、NaOH、低温、肾上腺素、乙酰胆碱、缺空气刺激，完成每次刺激并出现明显现象后用38℃台氏液冲洗肠肌标本，观察其收缩活动的特点并记录。 结果：滴加Ach、NaOH 后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加E、 HCl 肠肌运动张力与频率迅速降低；将38℃的台氏液迅速换成25℃的台氏液后，肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅速降低后逐渐增大；停止通空气后，肠肌运动张力先迅速增强后逐渐降低和频率逐渐降低。 结论：HCl、低温和肾上腺素可抑制离体肠肌的运动，NaOH和乙酰胆碱可增强离体肠肌的运动。

【关键词】：离体肠肌；台氏液；Ach；E；NaOH；HCl

【 Abstract 】 objective: to observe the hydrochloric acid (HCl), sodium hydroxide (NaOH), temperature, epinephrine (E), acetylcholine (Ach), lack of ai

不同因素对家兔离体肠肌运动的影响

姓名： 浙江中医药大学200*级********专业 * 班 * 组 学号：

摘要：目的 研究0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素(E)、1当量NaOH、1当量HCl、25℃台氏液、缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法 本实验取家兔离体肠肌，并用生物信号采集处理系统记录其在不同因素作用下的张力曲线。 结果 实验结果显示当滴加0.01%乙酰胆碱、NaOH刺激离体肠肌时，张力曲线明显上升，且频率加快，当用0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等条件刺激离体肠肌时，张力曲线则下降，且频率减慢。 结论 0.01%乙酰胆碱、NaOH能促进肠肌的运动，而0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等因素则抑制肠肌的运动。

前 言

肠道平滑肌有壁内神经丛，因此有自动节律性收缩的特性，其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节[1]。平滑肌对某些化学物质（如：酸、碱等）及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。小肠平滑肌的电活动有快波和慢波两种基本形式。慢

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实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察

【实验目的】

学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。

【实验原理】

消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。

【实验材料】

实验动物：家兔，2.0-2.5kg

实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。

实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。

【实验步骤】

1.恒温浴槽的准备工作；

2.标本制备；

3.仪器连接与设置；

4.启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。

观察项目

1.自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性

收缩及张力水平。

2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。

（1）乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠

实验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察

【实验目的】学习一种离体组织器官试验方法；观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、

肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。

【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激

较为敏感等生理特性。将离体的组织、器官至于模拟的内环境中，可在一定时间内保持其功能，从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。

【实验步骤】

1.恒温浴槽的准备工作 2.标本制备 3.仪器连接与设置 4.启动计算机开始记录

【观察项目】

1.自动节律收缩

2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用 (1)乙酰胆碱的作用 (2)阿托品的作用

3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用 (1)肾上腺素的作用 (2)去甲肾上腺素的作用 4.观察钙离子对肠断收缩的影响 5.观察温度对肠断收缩的影响 6.观察酸碱度对肠断收缩的影响

机 能 实 验 学 实 验 报 告

课题名称：传出神经药物对离体肠肌的作用 院 （系）：韶关学院医学院

专业班 级： 2011级临床医学本科班 学生姓名：符宏展 学 号：112 指导教师：梁俊辉

二○一三 年 六 月 五 日

机能实验报告

实验目录：

1 实验目的

2 实验装置和器材

3 实验药物

4 实验动物

5 实验原理

6 实验方法

7 实验注意事项

8 实验结果

实验数据

实验记录波型及静态测量数据

9 实验结果讨论

10 实验结论

11 实验思考

实 验 报 告

实验次序： 九 实验项目：传出神经药物对离体肠肌的作用 班级：11临本 姓名：符宏展 学号：112 实验类型（打√）：（基础□ 综合□ 设计□） 一、实验预习

实验预习报告内容原则上应包含实验目的、实验原理、实验主要仪器、试剂及实验步骤。 实验目的： 掌握：1.消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。 2.哺乳动物离体器官灌流法。 实验装置和器材：RM6240生物信号采集与处理系统、离体器官恒温灌流仪、

实验

实验五 离体蛙心灌注

目的

学习离体蛙心灌流的方法；观察内环境理化因素的相对恒定对维持心脏正常节律性活动的重要作用；了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。

原理

动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发生改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件。

器材与药品

蛙心陶罐、蛙心夹、常用蛙手术器械、铁架台、双凹夹、滴管、小烧杯、氯化钠溶液（1%NaCl）、氯化钙溶液（2%Ca Cl）、氯化钾溶液（1%KCl）、肾上腺素（1/10000Ad）、乙酰胆碱（1/100000Ach）、任氏液（Ri/lger’s solution新鲜配制）等。

步骤

（1）取一只蟾蜍或蛙，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨，暴露心脏。用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。

（2）识别心脏的各个部分，包括心房、心室、静脉窦等，并观察心跳。

（3）插蛙心插管，制备离体蛙心。先在左右主动脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。再在左主动脉下穿一线结扎。用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主