活性污泥观察和大肠杆菌微生物实验
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微生物计数与活性污泥相1观察
实验五 微生物的计数与活性污泥中生物相观察
一、 实验目的
1、学习平板菌落计数法的基本原理和方法,了解血球计数板的结构和使用方法和分光光度法计数法的原理和方法。 2、学会用血球计数板对芽殖酵母进行计算。
3、学习观察活性污泥中生物相的方法,初步分析生物处理系统工作状态是否正常。
二、 实验原理
1、 平板菌落计数法
平板菌落计数法是将待测样品经适当的稀释后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据稀释倍数和取样接种量即可算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品往往不容易完全分散成单个细胞,所以长成的一个单个菌落也有可能来自样品中的2—3个或者更多细胞。因此平板菌落结果往往偏低。为了清楚阐述平板菌落计数结果,现在已倾向使用菌落形成单位,而不以绝对的菌落数来表示样品的活菌含量。 2、 分光光度法
当光线通过细菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。在一定的范围内,菌细胞浓度与透光度成反比,与光密度成正比,而光密度或透光度可以由光电池精确测出。因此,可用一系列己知菌数的菌悬液测定光密度,作出光密度--菌数
实验1,大肠杆菌的培养和分离
篇一:实验1 大肠杆菌的培养和分离实验教学提纲
实验1 大肠杆菌的培养和分离教学提纲
实验目的
1. 进行大肠杆菌的扩增,利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2. 进行大肠杆菌的分离,用固体培养基进行细菌的划线培养。
3. 说明大肠杆菌的培养条件和操作要求的原理。
实验材料
1. 配制LB液体培养基,蛋白胨0.5g,酵母提取液0.25g,氯化钠0.5g,加水50mL溶解。
2. 配制LB固体培养基,蛋白胨0.5g,酵母提取液0.25g,氯化钠0.5g,琼脂1g,加水50mL溶解(配制LB固体培养基是用来倒平板和倒试管斜面)。
实验步骤
1. 培养基灭菌。
在两个150mL的三角瓶中分别装入50mL LB液体培养基和50mL LB固体培养基(刚配好,尚未凝固),加上封口膜(一种塑料薄膜,中间有小孔的滤膜。既可以通气,又不使细菌进入。)。将培养皿用牛皮纸包好,放入高压灭菌锅中,1kg压力灭菌15min(有压力时开始计时)。 同时将需要灭菌使用的培养皿、试管、三角瓶等和所用器械(接种环、镊子等)等一块灭菌。
2. 倒平板,倒斜面。
灭菌后。待高压锅压力与大气压相同时,打开锅盖,将有培养基的三角瓶、试管、培养皿等放在灭菌后的超净工作台上。
超净工作台操作:打超净工作台的紫外
大肠杆菌及其检验
大肠杆菌及其检验
大肠杆菌的生物学特性
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简介:
大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌,分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属,并且大肠杆菌株ATCC 11775是该属的模式菌种。 附:肠杆菌科各属
大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%,而与同科的志贺氏菌属(除鲍氏志贺氏菌外)的DNA相关性可达80-87%。
大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌,一般多不致病,在一定条件下可引起肠道外感染。
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形态与染色
大小0.4~0.7×1~3um,无芽胞,大多数菌株有动力。
有普通菌毛与性菌毛,有些菌株有多糖类包膜,革兰氏阴性杆菌。 附:有动力是什么意思?请看动力试验。
革兰氏阴性杆菌是什么意思?请看革兰氏染色介绍。 大肠杆菌扫描电镜照片 大肠杆菌透射电镜照片 大肠杆菌分裂照片
最新: 大肠杆菌革兰氏染色照片
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培养特性
由于此菌合成代谢能力强,在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃,在42-44℃条件下仍能生长,生长温度范围为15-46℃。
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态:
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(1)光滑型: 菌落边缘整齐,表面有光泽、湿润、光滑、呈
大肠杆菌培养方法
大肠菌群测定的操作细则
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。 食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 1 设备和材料 1.1 温箱:36±1℃。 1.2 冰箱:0~4℃。
1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。 1.4 天平。 1.5 显微镜。 1.6 均质器或乳钵。 1.7 平皿:直径为90mm。 1.8 试管。 1.9 吸管。
1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。 1.11 玻璃珠:直径约5mm。 1.12 载玻片。 1.13 酒精灯。 1.14 试管架。 2 培养基和试剂
2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。 2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。
2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。 2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。
2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。 2.6 生理盐水。
大肠杆菌和农杆菌感受态的制备
感受态制备
A 大肠杆菌感受态的制备(CaCl2法)(《水稻NR和NIR基因启动子的克隆及功能验证》第38页)
1 材料、设备及试剂
1.1 材料
大肠杆菌DH5α、BL21、Rossette、JM109菌株
1.2试剂
LB液体培养基:
蛋白胨 10g/L
酵母提取物 5g/L
NaCl 10g/L
NaOH(1mol/L) 1mL/L
400mL 0.1M/L预冷的 CaCl2溶液(高温高压灭菌)
50%甘油
75%酒精
95%酒精
液氮
1.3 实验设备
接种环、酒精灯,打火机,75%酒精,95%酒精,50mL灭菌三角瓶4个,250mL灭菌的三角瓶4个,移液抢(5mL、200μL,1000μL),灭菌的枪头(5mL、200μL,1000μL),离心管(1.5mL,50mL)恒温摇床,灭菌锅,紫外分光光度计,超净工作台,制冰机,冰盒,高速冷冻离心机。
2 实验步骤
1、从新鲜培养的大肠杆菌DH5α平板上挑取一个单菌落,接种于5mL新鲜LB培液体养基中,于37℃,200rpm振荡培养过夜。
2、培养1
大肠杆菌和农杆菌感受态的制备
感受态制备
A 大肠杆菌感受态的制备(CaCl2法)(《水稻NR和NIR基因启动子的克隆及功能验证》第38页)
1 材料、设备及试剂
1.1 材料
大肠杆菌DH5α、BL21、Rossette、JM109菌株
1.2试剂
LB液体培养基:
蛋白胨 10g/L
酵母提取物 5g/L
NaCl 10g/L
NaOH(1mol/L) 1mL/L
400mL 0.1M/L预冷的 CaCl2溶液(高温高压灭菌)
50%甘油
75%酒精
95%酒精
液氮
1.3 实验设备
接种环、酒精灯,打火机,75%酒精,95%酒精,50mL灭菌三角瓶4个,250mL灭菌的三角瓶4个,移液抢(5mL、200μL,1000μL),灭菌的枪头(5mL、200μL,1000μL),离心管(1.5mL,50mL)恒温摇床,灭菌锅,紫外分光光度计,超净工作台,制冰机,冰盒,高速冷冻离心机。
2 实验步骤
1、从新鲜培养的大肠杆菌DH5α平板上挑取一个单菌落,接种于5mL新鲜LB培液体养基中,于37℃,200rpm振荡培养过夜。
2、培养1
活性污泥各参数
摘要:污水处理的方法很多,对于大、中型污水处理厂来说,活性污泥法仍是首选工艺,因为它具有运行稳定,耐负荷运行成本低维护方便和处理效果良好的特点。在以活性污泥法处理污水的实际运行中,影响污水处理效果的因素很多,例如:曝气池混合液浓度(MLSS)、污泥沉降比、污泥负荷、污泥回流比、停留时间、溶解氧(DO)、挥发性混合液浓度(MLVSS)、气水比、水温、pH值等都是影响污水处理效果的重要因素,但是,在污水处理工艺的运行管理中,大多以曝气池混合液浓度、沉降比、污泥指数、进出水水质作为指导运行的主要参数。我厂运行十几年来,重点通过曝气池污泥沉降比辅以其它参数来指导污水处理工艺运行,本文对沉降比在运行管理中的重要作用加以研究和探讨。
关键词:沉降比 活性污泥法 管理 指导作用
1 理论依据
利用活性污泥法处理污水,主要是通过活性污泥微生物,在有氧的情况下,将有机物合成新的细胞物质或将其分解代谢,然后再经过由合成细胞形成的菌体有机物的絮凝、沉淀、分离,从而达到去除污水中有机物、净化污水的目的。微生物代谢关系图如下:
污水净化的重要环节,首先是污水中有机物在曝气池中微生物的作用下合成菌胶团的过程,其次是菌体有机物的絮凝、沉淀和分离过程;由此推
活性污泥的培养步骤
字号: 大 中 小 活性污泥的培养步骤 一、活性污泥的培养步骤 1. 向好氧池注入清水(同时引入生活污水)至一定水位,并注意水温。 2. 按风机操作规程启动风机,鼓风。 3. 向好氧池投加经过滤的浓粪便水(当粪便水不充足时,可用化粪池和排水沟内的污泥补 充。),使得污泥浓度不小于1000mg/L,BOD达到一定数值。 4. 有条件时可投加活性污泥的菌种,加快培养速度。 5. 按照活性污泥培养运行工艺对反应池进行曝气、搅拌、沉降、排水。 6. 通过镜检及测定沉降比、污泥浓度,注意观察活性污泥的增长情况。并注意观察在线PH 值、DO的数值变化,及时对工艺进行调整。 7. 测定初期水质及排水阶段上清液的水质,根据进出水NH3-N、BOD、COD、NO3-、NO2-等浓度数值的变化,判断出活性污泥的活性及优势菌种的情况,并由此调节进水量、置换量、 粪水、NH4Cl、H3PO4、CH3OH的投加量及周期内时间分布情况。 8. 注意观察活性污泥增长情况,当通过镜检观察到菌胶团大量密实出现,并能观察到原生动物(如钟虫),且数量由少迅速增多时,说明污泥培养成熟,可以进生产废
大肠杆菌培养操作规程
大肠杆菌培养操作规程
一、 目的及适用范围
制订本规程的目的为规范大肠杆菌总RNA的制备,保证为诊断试剂产品提供质量可控的质控品及标准品基质。本规程适用于南京实验室提取大肠杆菌总RNA的操作。依照本操作规程,每次可提前大约提取基质液原液2.7ml。
二、 常规时间安排 预计安排 步骤 耗材准备 PBS储存液配置 第一天 培养基配制 灭菌 领取菌种 菌种复苏 第二天 接种 分装培养 RNA完全提取根据需求,自行安排。
三、 培养用耗材准备
1、 锥形瓶、双层铝箔、棉绳
2、 包扎一盒1ml的枪头,50ml康宁冻存管
四、 培养基配制(早上)
培养基应现配现用,每次配置350ml,一次性使用完毕。
1、 按下表称取物资配置LB培养基到500ml锥形瓶中: 例如:配制350mlLB培养基配方如下:[配置双份] 蛋白胨 成分名称 TRYPTONE 称取质量 3.5g 钠 3.5g YEAST XTRACT 1.75g 补足350ml 氯化酵母提取物 去离子水 耗时评估 20min 40min 20min 3h 10min 9h 40min 13h 2、 用双层铝箔和棉绳对锥形瓶进行封口,摇晃锥形瓶以使各物质迅速、均匀、
完全、溶解。待灭
肉鸡大肠杆菌病的诊治
维普资讯
畜牧兽压杂志
第 2卷】
第3 期
20 0 2年
肉鸡大肠杆菌病的诊治姚忠会(南省文山州农业学校 .南文山云云 630 ) 60 0
中图分类号:5 . 1 8 8 3
文献标识码: B
文章编号:0 4 6 0 (0 Z 0 0 30 1 0— 7 4 Z 0 ) 30 4 1
Z0 0 1年 3月,山县城郊某鸡场 2 0文 0 0多只 3 0
糖、麦芽糖、甘露醇,三糖铁产酸产气、不产生 H:不 s,液化明胶,尿素酶阴性,不利用拘木酸盐,基质试验阳性, .试验阳性, P试验阴性。 M R. V3 3动物试验 .
日龄艾维因肉鸡发生以呼吸困难、喘鸣、下痢为主要症状的疫情,日死亡 1 0多只。经诊断为大肠杆菌病现报道如下:
1发病情况该鸡群在 3 0日龄时发病病鸡主要表现精神萎顿,畏寒,挤堆,翅下垂,呼吸困难,喘鸣,食废绝,饮部分鸡拉灰黄色或灰绿色稀便。发病后 3d开始出现死 亡 .日死亡 1每 O多只, d时间就已死亡 8 1 5 0几只,且
用 2 4h普通肉汤培养物,腔接种 5只小白鼠,腹 同时用灭菌肉汤接种 2只小白鼠作为对照,剂量均为00 . Zm]只种后 4/接 8 h内, 5只试验小白鼠均死亡,
2只对照小白鼠均健活;剖检可见死亡鼠心外膜有点