光学显微镜的构造及使用

光学显微镜的原理及构造

显微镜是人类认识物质微观世界的重要工具，是现代科学研究工作不可缺少的仪器之一。显微镜自1666年问世以来已有300多年的历史了，其间随着科学技术不断发展，显微镜的品种不断增加，结构和性能逐步得到完善和提高。 根据不同的使用用途，光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜等10多种。目前，世界上许多国家都可以生产光学显微镜，牌名、种类繁杂，其中德国、日本等国制造的显微镜品质、数量占优势，但价格昂贵。 对于现代的光学显微镜，包括各种简单的常规检验用显微镜、万能研究以及万能照相显微镜等，首先要认识其构造及各部件的功能，同时要掌握正确的调试、使用和保养方法，才能在实际应用中面对各种要求时以不同的显微镜检方法，充分发挥显微镜应有的功能，提高常规检验工作效率. 光学显微镜的原理和构造

随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又能应用于金相样品的分析与检验。

下面以德国ZEISS公司

光学显微镜的结构及使用

使用日期：2017年9月26日

一、教材分析

人类在很长时间内，都是依靠肉眼来观察世界上形形色色的事物的，不过我们周围还有很多肉眼看不到的微小物体，要看到它们就要借助显微镜，这节课就来介绍如何使用显微镜。 二、实验目的

1、 练习使用显微镜，学会规范的操作方法。 2、 能够独立操作显微镜。

3、 能够将标本移动到视野中央，并看到清晰的图像。 三、重点与难点

重点：显微镜的结构和使用方法

难点：正确使用显微镜；理解实物与物像之间的关系到；理解玻片移动方向和物像移动方向之间的关系。 三、学情分析

学生们平时没有接触显微镜的机会，但是都通过很多途径见过显微镜，对它有一定的认识和了解。

四、教学环境及资源准备

显微镜，有“e”字的玻片，动、植物标本，擦镜纸，纱布。

在上课前分好组，并把显微镜发放到各组的操作台上，放置到指定的位置；发放实验时所用的器材及材料。

【新课导学】：

知识回顾：生命活动的基本层次包括哪些？

上节课我们学习到了细胞是生命活动结构和功能的最基本单位，那么同学们是否知道我们如果想观察细胞的话，应该用什么工具呢？

答：初中的时候我们用低倍光学显微镜观察细胞的，现在，让我们尝试用高倍镜来观察多种类的细胞。

基本

简要介绍资料的主要内容,以获得更多的关注

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显微镜的原理、构造、调试和使用

显微镜是人类认识物质微观世界的重要工具，是现代科学研究工作不可缺少的仪器之一。显微镜自1666年问世以来已有300多年的历史了，其间随着科学技术不断发展，显微镜的品种不断增加，结构和性能逐步得到完善和提高。 根据不同的使用用途，光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜等10多种。目前，世界上许多国家都可以生产光学显微镜，牌名、种类繁杂，其中德国、日本等国制造的显微镜品质、数量占优势，但价格昂贵。 对于现代的光学显微镜，包括各种简单的常规检验用显微镜、万能研究以及万能照相显微镜等，首先要认识其构造及各部件的功能，同时要掌握正确的调试、使用和保养方法，才能在实际应用中面对各种要求时以不同的显微镜检方法，充分发挥显微镜应有的功能，提高常规检验工作效率.

光学显微镜的原理和构造

随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又能应用于金相样品的分析与检验。

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显微镜的原理、构造、调试和使用

显微镜是人类认识物质微观世界的重要工具，是现代科学研究工作不可缺少的仪器之一。显微镜自1666年问世以来已有300多年的历史了，其间随着科学技术不断发展，显微镜的品种不断增加，结构和性能逐步得到完善和提高。 根据不同的使用用途，光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜等10多种。目前，世界上许多国家都可以生产光学显微镜，牌名、种类繁杂，其中德国、日本等国制造的显微镜品质、数量占优势，但价格昂贵。 对于现代的光学显微镜，包括各种简单的常规检验用显微镜、万能研究以及万能照相显微镜等，首先要认识其构造及各部件的功能，同时要掌握正确的调试、使用和保养方法，才能在实际应用中面对各种要求时以不同的显微镜检方法，充分发挥显微镜应有的功能，提高常规检验工作效率.

光学显微镜的原理和构造

随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又能应用于金相样品的分析与检验。

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实验一普 光学显通镜微的使用

一实验、目1的掌、握通光学显普镜微构的造原及 2、理习学并掌握正的使用方法确3 、通过久装永及片鲜切片新观，察掌一些细握结胞构 细或活动胞的点特

、实验二容(内一)显微的使镜用( )二永标久片的本察观(三制)新鲜标作本 片(四作)业

(一显微镜)的用使

显镜是微察观微物体小的密精仪器

1、光学

显镜的组微 光成学照、、明械机2、显镜微的性能指标3、显微的镜用使骤步

显镜微组的

2、显成镜的性微能标指()分1辨力 2()大放率

显镜分辨微力的能低决高定光于系统的学各 条种件被观察的。体必物放大率高须，而 且清晰物，放大体，能后呈否现清晰的细 微构，结首取先决物镜的性能于，次 其为镜和聚目镜光性能的

。

(1)辨力 R分 微镜显能分辨物两点间的小最距。 离R 0=.6λ/1N

A数

孔值 径A N 也叫做镜口率或(开口率，在)镜和物 光器聚上标有它都们数值孔径的数，值孔 径是镜物聚光和的器主要数，参也是断判 它性能的们重最要标。指

数值径孔可用式下示表NA:=·n snθ i中：式n 物—与标镜之本的间质介折率射 θ—镜的镜口物角1/2的即，半径角孔 镜。口角指是从镜 光物轴的物点上发 出光的线与镜物透 前镜有直效的边径

Essential Cell Biology powerpoint

普通光学显微镜原理及其使用

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显微镜的光学系统1. 2. 放大微小的物体或微细的结构，形成倒立实像 把像投射到目镜光阑处

光学系统

物镜 目镜 聚光器 光阑

1. 2.3.

放大物镜映来的已放大的倒立实像 校正物镜余留下来的像差将物像投射到一定的位置上，便于放映或照相

使来自光源的光线放大，聚成光束，透过载片 照明样品，射入物镜

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显微镜的光学系统---物镜 物镜显微镜的质量主要取决于物镜。价格昂贵

物镜的种类 物镜与盖片之间不加任何液体 4 ,10 根据前透 镜与盖玻 片之间介 质的不同 1. 2. 3. 干燥系物镜 水浸系物镜 油浸系物镜 ，20 ,40

水浸物镜刻有“W”或“Water”字样 水浸两用物镜刻有“Oil+w”字样 油浸物镜刻有“oil 或oel或 imm”和“HI” 字样 甘油浸物镜刻有“Glyc” 或 Glyz”字样小技巧

香柏油致癌， 香柏油致癌，且易 凝结，原则上不用！ 凝结，原则上不用！

使用油镜时要将聚光镜提升到 最高点，并放

实验一 显微镜的构造及使用方法

一、目的要求

1. 了解显微镜的构造、性能及成像原理。 2. 掌握显微镜的正确适用及维护方法。 二、实验器材

1. 显微镜、纱布、绸布 2. 酵母菌示教标本 三、普通光学显微镜简介

微生物的最显著的特点就是个体微小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。

显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括：明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜，其它显微镜都是在此基础上发展而来的，基本结构相同，只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。 （一）显微镜的构造

普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。

图1-1 显微镜构造

1.目镜 2.镜筒 3. 转换器 4. 物镜 5. 载物台 6. 聚光器 7. 虹彩光圈 8. 聚光镜调节钮 9.反光镜 10. 底座 11. 镜臂 12. 标本片移动钮 13. 细调焦旋钮 14. 粗调焦旋钮 15.电源开关 16.光亮调节钮 17.光源

1. 机械系统：

（1）

光学数码显微镜

DSX110Discover Another Dimension

对于所有传统显微镜用户，

这是OLYMPUS对下一代显微镜的方案。

自由角度宽变焦

光学数码显微镜

通过DSX光学数码显微镜系统，OLYMPUS向全世界引入了工业显微镜的一种新维度。今天，独特地融合了奥林巴斯久经时间检验的光学技术和当今最新的数码成像技术，OLYMPUS的DSX系列光学数码显微镜设定了工业显微镜的新标准。借助于诸多的先进功能和一个更简单的操作界面，即使是显微镜的操作新手，通过OLYMPUS的DSX系列光学数码显微镜也可立即得到高品质的图像和高可靠性的结果。不管面临多大的挑战，DSX都可提供相应的解决方案。

1

DSX110 集显微观察、图像采集、测量和报告共享诸多功能于一身。

高效的观察借助于高品质的光学系统和先进的数码图像技术，DSX110可实现高效的显微观察、直观的放大操作、多种多样的观察方式和优异的色彩再现。此外，其自由角度观察功能可以实现从任意的倾斜角度观测样品，同时还具备16X的精密光学变焦。便捷的图像采集多样化的图像采集方法带来了便捷、直观的操作——如同使用智能手机或平板电脑。图像采集方法选项包括景深扩展（EFI）和3D成像、全景图像采集、动态图像采

实验二 特殊显微镜的使用

实验2.1相差显微镜

一、实验目的

掌握相差显微镜的原理、构造及其使用方法。 二、实验原理

相差显微镜（phase-contrast microscope）是由P. Zernike于1932年发明的，P. Zernike于1953年获诺贝尔物理奖。相差显微镜最大的特点就是可以用于观察未经染色的标本和活细胞。

人们在光学显微镜下观察被检标本时，只有在反射光的波长（颜色）和振幅（亮度）与周围介质有变化时，方能看到被检样品的结构。活细胞近于无色透明，光波通过时，透过或反射光的波长和振幅都不发生改变，所以用普通光学显微镜难以辨清活体的结构。一般对于明暗对比很小的样品，多借助于固定和染色等理化方法，使样品和背景的反射或透射光在波长和振幅上发生变化，即在颜色和亮度上有所差异，才能识别。但有些样品一经染色就会引起变形，染色也可使有生命的样品死亡。我们可以利用相差显微镜来进行观察。相差显微镜利用了光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，因此它是一种应用在染色困难或不能染色的新鲜标本上获得高对比图像的新型显微镜。

相差方法应用于生物学上的主要价值，在于它能对透明的活体进行直接观察，无需采用使细胞致死的固定和染色的方法。