酶催化常数

第二节 酶促反应动力学

一、酶促反应

1913年，Michaelis和Menten根据Henri等提出的酶-底物复合物学说，用简单的快速平衡或准平衡概念推导了单底物的酶促反应方程，即米-曼氏方程（Michaelis-Menten equation）。酶促反应可表示为：

k1 k2

E + S ES E + P

k-1

酶 底物 酶-底物复合物 酶 产物

根据公式进行推导，反应速率（V0或v）与底物浓度[S]、酶浓度[E]和产物浓度[P]的关系如下：

Vo?[S][P]k2[E][S]Vmax[S] ???dtdtKm?[S]Km?[S]式中Vmax为最大反应速率。这一公式与根据快速平衡学说推导的米-曼氏原始方程形式相同，区别在于用米氏常数Km取代了复合物ES的解离常数Ks，因此仍称

大豆油酶催化脱胶初探

1999年第24卷第4期　　　　　　　　　　　　　中　国　油　脂17

大豆油酶催化脱胶初探

裘爱泳,张绪媛,刘　晔,王兴国

(无锡轻工大学食品学院,214036江苏省无锡市惠河路170号;第一作者:女,59岁,教授)

　　摘要:利用特殊的生物化学反应——酶催化水解磷脂分子,采用NOVO(丹麦)公司Lecitase10L,初探了大豆油酶催化脱胶的可行性。通过对酶浓度、反应温度、反应时间、激活剂Ca浓度、缓冲液浓度等多项单因素试验以及酶浓度,,,得出大豆油酶法脱胶的最佳工艺条件:酶活度量20IU l,1),反应温度50℃。反应结果,含磷小于10m关键词:;;　　大豆毛油经一般水化脱胶处理后仍含有012%～016%的非水化磷脂(NHP),可通过酶法(加磷脂酶A2除去)、ALCON法(此法是将压坯后的坯料用湿热处理)、SPECIAL法(主要是采用磷酸,氢氧化钠的处理),使毛油中NHP转变成水化磷脂,然后进行水化脱胶、超级脱胶法或硅法脱胶法。在物理精炼过程中,要得到比较好的产品质量及精炼得率,最为关键的是要掌握好脱胶技术。如果脱胶不完全,则加重了后段脱色、脱酸、脱臭的负担。对设备影响也比较大,如设备容易结焦,影响传热效果,过滤机滤网容易堵

篇一：过氧化氢酶动力学常数测定

实验项目二、过氧化氢酶的活力和动力学常数测定

姓 名： 赵家熙 指导教师： 谭志文 实验室： 6503 组员：①章恒炯 ② ③ 成绩： 第三部分：实验记录与分析 一、酶活力测定 （一）原始数据

1.样品原始质量：5.032g 2.标定数据：

（1）KMnO4质量数及配制：158 （2）Na2C2O4质量数：134 （3）标定数据：0.02mol/L

（4）KMnO4实际浓度：0.019mol/L3.样品滴定数据

消耗高锰酸钾溶液（ml）：实验（1）0.65

实验（2）0.50 对照（1）1.45 对照（2）1.30

（二）结果计算

1．换算系数（1mL KMnO4溶液相当于多少mg H2O2）

1.7

2.样品酶活计算（每克鲜重样品1min内分解H2O2的毫克数表示：mg H2O2/g?min）

(A?B)?VT?1.7FW?V1?t酶活(mgH2O2/g·min)=

酶活(mgH2O2/g·min)=0.218

（A-B）=0.8 VT=20.25FW=5.032V1=2.5mlt=10min

二、动力学常数的测定 （一）原始数据

（二）求出各管反应前的底物浓度[S]0和反应速度

V0

（三）以1/V0对1/[S]0作图（用exc

实验项目二、过氧化氢酶的活力和动力学常数测定

姓 名： 赵家熙 指导教师： 谭志文 实验室： 6503 组员：①章恒炯 ② ③ 成绩： 第三部分：实验记录与分析 一、酶活力测定 （一）原始数据

1.样品原始质量：5.032g 2.标定数据：

（1）KMnO4质量数及配制：158 （2）Na2C2O4质量数：134 （3）标定数据：0.02mol/L

（4）KMnO4实际浓度：0.019mol/L 3.样品滴定数据

消耗高锰酸钾溶液（ml）：实验（1）0.65

实验（2）0.50 对照（1）1.45 对照（2）1.30

（二）结果计算

1．换算系数（1mL KMnO4溶液相当于多少mg H2

实验项目二、过氧化氢酶的活力和动力学常数测定

姓 名： 赵家熙 指导教师： 谭志文 实验室： 6503 组员：①章恒炯 ② ③ 成绩： 第三部分：实验记录与分析 一、酶活力测定 （一）原始数据

1.样品原始质量：5.032g 2.标定数据：

（1）KMnO4质量数及配制：158 （2）Na2C2O4质量数：134 （3）标定数据：0.02mol/L

（4）KMnO4实际浓度：0.019mol/L 3.样品滴定数据

消耗高锰酸钾溶液（ml）：实验（1）0.65

实验（2）0.50 对照（1）1.45 对照（2）1.30

（二）结果计算

1．换算系数（1mL KMnO4溶液相当于多少mg H2

实验项目二、过氧化氢酶的活力和动力学常数测定

姓 名： 赵家熙 指导教师： 谭志文 实验室： 6503 组员：①章恒炯 ② ③ 成绩： 第三部分：实验记录与分析 一、酶活力测定 （一）原始数据

1.样品原始质量：5.032g 2.标定数据：

（1）KMnO4质量数及配制：158 （2）Na2C2O4质量数：134 （3）标定数据：0.02mol/L

（4）KMnO4实际浓度：0.019mol/L 3.样品滴定数据

消耗高锰酸钾溶液（ml）：实验（1）0.65

实验（2）0.50 对照（1）1.45 对照（2）1.30

（二）结果计算

1．换算系数（1mL KMnO4溶液相当于多少mg H2

中国生物工程杂志　ChinaBiotechnology,2008,28(2):117～123

脂肪酶催化合成生物柴油的瓶颈问题及其对策

吴义真　邹有土　林　琳33(福建师范大学生命科学学院　福州　350108)

3

摘要　生物柴油,一种新型的清洁能源燃料,具有可再生、可生物降解、环境友好等优良的品性,可部分或全部替代石化柴油。碱催化法、脂肪酶催化法及超临界法是合成生物柴油的主要工艺,其中脂肪酶催化法是一种节能型、环保型工艺,在节能和环保方面,有着碱催化法无可比拟的优越性,具有良好的工业应用前景。但目前在实现产业化的进程中仍存在如酶成本高、稳定性较差、甲醇对酶的失活效应及反应时间长等瓶颈问题。通过固定化技术和全细胞催化剂的采用、甲醇流加方式的改进、溶剂工程的改善及酰基受体和耐醇酶的开发等技术手段,结合固定床生物反应器,较好地解决了这些瓶颈问题,从而推进了酶催化法合成生物柴油的工业化进程。主要对酶法合成生物柴油工艺存在的主要问题及相应对策研究进展进行概括介绍,并对其工业化发展前景进行讨论。

关键词　生物柴油　脂肪酶　酶催化法　瓶颈

中图分类号　Q819

　　美国能源署对1995～2005年期间能源生产消耗的官方统计数据显示:沙特阿拉伯、俄国和美国2005年的石

单元整合1-2细胞代谢与酶;(2)酶(催化作用、活化能、高效性

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新课标高考总复习

(对应学生用书P65)

单元整合1-2细胞代谢与酶;(2)酶(催化作用、活化能、高效性

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单元整合1-2细胞代谢与酶;(2)酶(催化作用、活化能、高效性

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核心术语 (1)细胞代谢与酶；(2)酶(催化作用、活化能、高效性、专一性、 最适温度、最适pH);(3)ATP(ADP、高能磷酸键、腺苷、直接能源、 主要能源、最终能源);(4)光合作用(光反应、暗反应、水的光解、CO2 的固定、C3的还原、C5的再生、类囊体薄膜、叶绿体基质);(5)细胞呼 吸(有氧呼吸、无氧呼吸、细胞质基质、线粒体基质、线粒体内膜);(6) 绿叶中色素的提取和分离(纸层析法、层析液、无水乙醇、二氧化硅、 碳酸钙、滤液细线)。

内连外展：本讲内容可与前后面的知识相关联。(1)可与细胞的结构相联系；(2)可与细胞的生命历程相关联；

第 次课 4 学时

实验14 过氧化氢催化分解反应速率常数的测定

一、实验目的

1. 测定过氧化氢催化分解反应速率常数；

2. 掌握通过测量反应系统的体积跟踪反应系统浓度从而研究反应速率的方法。

二、实验原理

过氧化氢在没有催化剂存在时，分解反应进行的很慢。加入催化剂能够提高分解速率。过氧化氢分解反应的化学计量式如下：

H2O2(l) = H2O(l) + 1/2O2(g) 若以KI为催化剂，在KI作用下催化分解步骤为：

KI(l) + H2O2(l) = KIO + H2O(l) （慢） KIO = KI(l) + 1/2O2(g)

由于第一步的速率比第二步慢得多，所以，第一步为反应的控制步骤。因而可以假定其反应的速率方程式为：

-dcA/dt =k’cKIcA

式中，cA为反应系统中反应到t时刻H2O2浓度，因KI在反应过程中浓度不变，故上式可简化为

- dIcA/dt = kIcA （14.1） 式中k=k’cKI, 将上式分离变量积分：

当 t=0 时， CA=C0 ；

热动力学方法在酶催化反应研究中的应用

摘要：本文介绍了热动力学方法在酶催化反应研究中的应用，主要包括酶活性的测定、酶催化反应动力学研究和生化常数的测定、酶抑制、激活动力学研究、还包括在酶反应热力学、物质构效关系研究等方面的应用。

关键词：热动力学；酶；应用

酶是存在于生物体内的一些具有专一性和高催化活性的蛋白质或核酸，它贯穿于生命活动的全过程，生命系统中的各种生物化学反应绝大多数都是在酶催化下完成的。因而对酶催化反应研究对于认识生命活动的本质，揭示生命的奥秘有着重要的意义。

具有非特异性的热动力学方法与具有高选择性和专一性酶催化反应体系相结合，恰好能够优势互补。因此，热动力学方法自建立之始便将酶反应确立为主要研究对象之一，反之，酶催化反应研究也借助热动力学方法这一有力的武器而得到了突飞猛进的发展。热动力学方法在酶催化反应研究中的应用，主要在以下几个方面取得了令人瞩目的成就。 1. 酶活性的测定

与经典的酶活性测定方法相比，热动力学方法的非特异性使其可以广泛地运用于许多酶反应体系的活性检测。热动力学方法作为一种新型的广谱性的酶活性检测方法，既可以用于 酶制品的活性检测，也能够用于生物组织中酶活性测定。不仅具有速度快、操作方便等优点， 而且可以