血色素是常见的PCR抑制物

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常见的PCR反应抑制物一览

标签:文库时间:2025-02-16
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一个PCR反应过程分为很多的步骤,同时也受到很多因素的影响,可以分为内部因素和外部因素,内部因素是指正常试剂体系中的成分,外部因素是指环境或者样本带入的因素。

体系内部因素

引物:引物是整个PCR体系最重要的部分,也是决定一个PCR反应特异性的关键,引物在设计时要遵守一定的原则(长度、扩增跨度、碱基等)。酶及其浓度:目前有两种Taq DNA聚合酶,一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠杆菌合成的基因工程酶,酶浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。dNTP的质量与浓度:dNTP溶液呈酸性,一般配置成体系需将其调节至7.0-7.5,正常情况下4种dNTP的浓度应该相等,如果其中某一种过高就会引起错配,浓度过低又会引起PCR产物的产量。模板核酸(靶标):模板核酸的量和纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,对于RNA模板更要注意RNA的降解。Mg2+浓度:主要影响PCR扩增的特异性和产量,一般要对应dNTP的浓度。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异性扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。温度与时间的设置:PCR原理三步骤涉及变性-退火-延伸三个温度点,也就是变性温度与时间、退火(复性)温度

血色浪漫

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很经典的电视剧,包含很多的人生道理,塑造了不同的人物,展示了不同的人生观和价值观。

血色浪漫

看完<<血色浪漫>> 觉得有很多要说 但却又不知从哪儿开始说 还是从钟越民说起吧 钟越民 睿智 幽默 怀旧 讲义气重情义 敢爱敢恨 勇于追求勇于放弃 不以物喜不以己悲 能处变不惊泰然自若

在钟越民的眼中 生活没有将来 只有过去和现在 在所有经历过的过去 不论是酸甜苦辣都是美好的回忆和宝贵的财富 他所要做的永远是如何让现在的生活精彩 至于将来 他从不去想 因为即使他自己也不知道下一刻他会想要过什么样的生活 因为在钟越民的人生观里 生活或者说生命 只是一种过程而没有结果 所以在他的生活中永远不会有成功和失败之分 或者说他的生活永远都是成功的 因为他的整个生命过程都在享受中 正是因为有这种心态 在任何时候 他都能处变不惊 保持一颗冷静而理智的头脑

当他在陕北插队过讨饭的生活时 他把讨饭当作乐趣 让讨饭都成为了一种美事 当他成为所在部队最有潜质的军官时 他毅然选择转业 原因很简单 他对部队生活已经失去了兴趣 所以无论留下的前途如何美好它也毫不留恋 哪怕转业后是摆煎饼摊 当他从煎饼摊转到实力雄厚的国营企业正荣集团贸易部总经理时 我仍然没有

常见的共沸物

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常见的共沸物

共沸物 水/乙醇 水/正丙醇 水/异丙醇 水/正丁醇 水/异丁醇 水/叔丁醇 水/异戊醇 水/正戊醇 水/氯乙醇 水/乙醚 水/乙腈 水/丙烯腈 水/甲酸 水/丙酸 水/乙酸乙酯 水/二氧六环 水/氯仿 水/四氯化碳 水/二氯乙烷 水/苯 水/甲苯 水/二甲苯 水/吡啶 水/二硫化碳 甲醇/二氯甲烷 甲醇/氯仿 甲醇/四氯化碳 甲醇/丙酮 甲醇/苯 甲醇/甲酸甲酯/环己烷 乙醇/乙酸乙酯 乙醇/苯 乙醇/氯仿 乙醇/四氯化碳 乙醇/苯/水 乙酸乙酯/四氯化碳 乙酸乙酯/环己烷 乙酸甲酯/环己烷 氯仿/丙酮 组分的沸点(℃) 100/78.5 97.2 82.4 117.7 108.4 82.5 131.0 138.3 129.0 35 81.5 78.0 101 141.4 78 101.3 61.2 77.0 83.7 80.4 110.5 137-140.5 115.5 46 64.7/41 56.2 77.0 56.2 80.6 17.8/48.6/33.6 78.3/78.0 80.6 61.2 77.0 78.3/80.6/100 78.0/77.0 61.2/56.4 组成(w/w) 5/95 28.8/71

常见的共沸物

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常见的共沸物

共沸物 水/乙醇 水/正丙醇 水/异丙醇 水/正丁醇 水/异丁醇 水/叔丁醇 水/异戊醇 水/正戊醇 水/氯乙醇 水/乙醚 水/乙腈 水/丙烯腈 水/甲酸 水/丙酸 水/乙酸乙酯 水/二氧六环 水/氯仿 水/四氯化碳 水/二氯乙烷 水/苯 水/甲苯 水/二甲苯 水/吡啶 水/二硫化碳 甲醇/二氯甲烷 甲醇/氯仿 甲醇/四氯化碳 甲醇/丙酮 甲醇/苯 甲醇/甲酸甲酯/环己烷 乙醇/乙酸乙酯 乙醇/苯 乙醇/氯仿 乙醇/四氯化碳 乙醇/苯/水 乙酸乙酯/四氯化碳 乙酸乙酯/环己烷 乙酸甲酯/环己烷 氯仿/丙酮 组分的沸点(℃) 100/78.5 97.2 82.4 117.7 108.4 82.5 131.0 138.3 129.0 35 81.5 78.0 101 141.4 78 101.3 61.2 77.0 83.7 80.4 110.5 137-140.5 115.5 46 64.7/41 56.2 77.0 56.2 80.6 17.8/48.6/33.6 78.3/78.0 80.6 61.2 77.0 78.3/80.6/100 78.0/77.0 61.2/56.4 组成(w/w) 5/95 28.8/71

血色浪漫的经典台词

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血色浪漫的经典台词

【篇一:血色浪漫的经典台词】

共收录42个《血色浪漫》的句子:本页收录的《血色浪漫》经典台词/《血色浪漫》经典语录根据受欢迎度排序,通过这些《血色浪漫》台词可以了解《血色浪漫》的特色。如果您也有私藏的《血色浪漫》语录或喜欢的《血色浪漫》名句,欢迎出来与我们共享。

【篇二:血色浪漫的经典台词】

我们是祖国的花朵,需要常浇水。

马主任,千万别对钟跃民这小子手软,先灌辣椒水,再上老虎凳,一下垫八块砖,千万别使美人计,这孙子肯定将计就计。 我要不打你不就不知道我是卖白薯的。

远看金鸡独立,近看骏马缺蹄,跑似风摆荷叶,躺在炕上不一般齐。 最近刚看了一本书,对我教育意义挺大的,这本书的名字叫《雷锋同志的故事》!

我们要从思想上教育他们,精神上感化他们。

我他妈的真感谢死你了(注意语境:装大粪时跃民对郑桐说来着) 怎么我一楞神的工夫,你们怎么就象浇了大粪的庄稼一样,蹭蹭往上蹿哪!

咱中国人民时候嫌过麻烦?

中国革命为什么老受挫折,就是你们这群人老窝里斗。 你太阳啊,你有功。

有天天拿着菜刀出门的诗人吗?

靠劳动吃饭永远不丢人……(于是钟跃明就走上了卖煎饼的道路) 一有扛雷的事,你就准叫郑桐。(在陕北知青办郑桐说的) 我恨不得把心掏出来给你

Module 7 定量PCR数据常见故障排查

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Module 7: 定量PCR数据常见故障排查

定量PCR是什么?一种灵敏的实时监测目的基因PCR扩增的技术2

定量PCR的优势 灵敏度高(可以检测低拷贝的目标样本) 重复性好 不需要后续的操作(电泳 染色 凝胶成像等) 不需要后续的操作(电泳、染色、凝胶成像等) 简单的操作流程就能得到准确的定量数据3

PCR的三个阶段指数增长期:每经过一个循环PCR产物呈两倍增长 指数增长期 每经过 个循环PCR产物呈两倍增长PCR产物 PCR产物 (对数图) 对数图)指数增长期循环数4

PCR的三个阶段线性增长期:反应速度减缓 线性增长期 反应速度减缓线性增长期PCR产物 PCR产物 (对数图) 对数图)指数增长期循环数5

PCR的三个阶段平台期:反应速度进一步减缓并趋于终止 平台期 反应速度进 步减缓并趋于终止线性增长期PCR产物 PCR产物 (对数图) 对数图)平台期指数增长期循环数6

传统的PCR在平台期进行终点定量线性增长期 PCR产物 PCR产物 (对数图) 对数图) 指数增长期平台期凝胶电泳检测循环数7

指数增长期定量效果最佳(对数图)指数增长期同一样品10倍梯度稀释8

线性增长期定量效果 般 定量效果一般线性增长期 (对数图) 指数增长期同一

实时定量PCR中的常见问题及解决办法

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对实时定量PCR实验中遇到的常见问题总结。

实时定量PCR中的常见问题及解决办法

1、反应后无扩增曲线出现

1)确认程序中是否设置了信号采集步骤:两部法扩增程序一般将信号采集设置在退火延伸阶段;三步法扩增程序应当将信号采集设置在72℃延伸阶段。

2)扩增效率问题:电泳检测realtimePCR反应产物,观察是否有正确大小的目的条带出现。如果没有,则逐一排查引物、模板以及反应条件问题。

3)循环数不够:一般可设置循环数为40。

2、Ct值出现太晚

1)模板浓度过低或模板降解:重新制备模板再进行实验。

2)扩增效率低:优化反应条件,或者重新设计PCR引物。

3)PCR产物过长:一般设计为100-200bp即可。

4)反应体系中含有抑制剂:常在模板质量不高时出现,重新制备模板或将模板稀释后使用。

3、扩增曲线形状异常

1)扩增曲线不光滑:信号太弱,经系统矫正后产生。提高模板浓度重复实验。

2)扩增曲线断裂或下滑:模板浓度较高,基线的终点值大于Ct值。减小基线终点 (Ct值- 4),重新分析数据。

3)个别扩增曲线突然骤降:反应管内留有气泡,由于温度升高后气泡破裂,使仪器检测到的荧光值突然降低所致。进行扩增反应之前要仔细检查反应管内是否有气泡残留。

4、阴性对照出现扩增曲线

1)阴

常见有机物的COD,BOD

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化合物名称

熔点 ℃

沸点 ℃ 16.6 -7.5 189 -24 117 198 135 170 124 136.2

密度 kg/L 0.71 0.769 1.58 0.898 1.116 0.93 0.903 0.97 0.867

水中溶解度 g/L 易 易 易

COD 值 g/g 2.13 2.5 0.59 1.05 1.29~1.5 1.92 2.2

BOD 值 g/g 0.8

生物降解性

一乙胺 一甲胺 一氯乙酸 一氯甲烷 乙二胺 乙二醇 乙二醇单乙醚 乙二醇单丁醚 乙二醇单甲醚 乙苯 乙苯胺(混合物) 乙炔 2-乙基已醇 乙基仲戊基酮 乙烯亚胺 乙脯 乙酰乙酸乙酯 乙酰丙酮 乙酰马啉 乙酰苯汞 乙酰苯胺 乙酰胺 乙酸 乙酸乙烯酯 乙酸乙酯 乙酸丁酯 化合物名称 乙酸丙酯 乙酸戊酯 乙酸异丁酯 乙酸异丙酯 乙酸环已酯 乙酸苯酯 乙酸叔丁酯 乙酸钙 乙酸钠 乙酸钾 乙酸铵 乙醇 乙醇胺

-80.6 -92.5 61 -97.7 8.5 -13 -40 -85 -95

0.375+ +

-0.3 0.01(1.0) 1.15~0.67(0.91) 1.58 0.7~1.68 0.12~0.50(1.10) 1.73

0.51+ 0.008+ 0.84+ 0.8

细胞色素C的提取

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实验一、细胞色素C的制备和测定

摘要:细胞色素C为含铁卟啉的结合蛋白质,包括多种能够传递电子的含铁蛋

白质。广泛存在于各种动植物组织和微生物中。它是呼吸链中极重要的电子传递体。细胞色素C是一种细胞呼吸激活剂。在临床上可以纠正由于细胞呼吸障碍引起的一系列缺氧症状,使其物质代谢、细胞呼吸恢复正常,病情得到缓解或痊愈。在自然界中,细胞色素C存在于一切生物细胞里,其含量与组织的活动强度成正比。本实验以新鲜牛心为材料提取、制备和纯化细胞色素C,得到其粗品溶液,并进行含量测定。

关键词:细胞色素C 提取 制备 纯化 含量测定 1、原理:

细胞色素C包括多种能够传递电子的含铁蛋白质总称。广泛存在于各种动植物组织和微生物中。它是呼吸链中极重要的电子传递体,细胞色素C(cytochrome c,CytC)只是细胞色素的一种。它在呼吸链上位于细胞色素还原酶和细胞色素氧化酶之间。线粒体中的细胞色素绝大部分与内膜紧密结合,仅有细胞色素C结合轻松,较易被分离纯化。

细胞色素C为含铁卟啉的结合蛋白质,每个细胞色素C分子含有一个血红素和一条多肽链。分子质量约为13000,蛋白质部分由104个左右的氨基酸残基组成,其中赖氨酸含量较高,等电点10.2-10.8

叶绿体色素的提取 - 图文

标签:文库时间:2025-02-16
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叶绿体色素的提取、分离、定量及理化性质的鉴定

【实验目的】

1.掌握提取和分离叶绿体色素的方法; 2.掌握测定叶绿体色素含量的方法;

3.熟悉叶绿体色素的理化性质及吸光特性;

4.了解植物叶绿体色素组成及其与生境的相关性。 【实验原理】

1.叶绿体色素是植物进行光合作用的重要物质,叶绿体色素包含绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类,这两类色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。提取液可用色层分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同,当用适当的溶剂推动时,混合物中各成分在两相(流动相和固定相)间具有不同的分配系数,所以它们的移动速度不同,经过一定时间层析后,便将混合色素分离。

2.叶绿素是一种二羧酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯,故可与碱起皂化反应而生成醇(甲醇和叶绿醇)和叶绿酸的盐,产生的盐能溶于水中,可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开

图一:叶绿素的结构

3.叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性,叶绿素吸收光量子而转变成激发态,激发态的叶绿素分子很不稳定,当它变回到基态时可发射出红光量子,因而产生荧光。