手术中留取标本处理方法

体液标本处理流程规范（试行）

一、目的：确保生物样本库工作人员高质量完成处理体液标本并有效储存的任务。 二、适用范围：此标准流程适用于组织样本库工作人员。 三、权责：所有组织样本库的成员都有义务遵守此标准流程

四、操作用具：1.8ml冻存管 Eppendorf手动单道移液器 记号笔 记录本 镊子 离心机 手套 口罩 枪头 液氮冷冻盒 标签 等

五、采集流程：基于安全考虑，所有处理生物样品的步骤，操作时必须佩戴手套、口罩作业。 1准备：

1.1 体液样本库工作人员每日去病房领取当日所取标本，及时时处理； ．

1.2 准备好冻存管、加样枪、枪头、液氮冷冻盒、冻存管等物品。进行体液分离操作前应戴好口罩、帽子、手套；

1.3 每日清洁操作台周围环境卫生，做到操作台及周围环境无血迹、无杂物等无关物品。 2体液标本处理： 2.1抗凝全血：

A．标本处理前的检查：

·检查抗凝血的抗凝效果，抗凝不完全者重新采样 ·出现溶血者，重新采集 ·患者相关信息必须填写完整； B. 低速离心：3000 rpm，10min；

C.必要时温度控制在4摄氏度高速离心；150

×××院 临床分子生物实验室质量手册 文件编号： 序号： 第 版 颁 布 日 期： 共 2 页 第 次修改 主题：HPV-DNA标本处理的标准操作程序 HPV-DNA标本处理的标准操作程序

一、目的：

规范临床分子生物实验室对临床标本的处理，提高检测结果的准确率。

二、适用范围：

人乳头状瘤病毒（HPV）基因微阵列分型检测试剂盒。

三、职责：

由临床分子生物实验室专业技术人员制定程序文件，实验室负责人审核，科室主任批准实施。

四、程序：

1、将样本及阴性对照品置室温解冻，按习惯将标本编号，按相应数量取出样本管，对应编号。 2、有效细胞的收集：

2.1 对于宫颈脱落细胞标本，先振荡混匀临床样本10秒，取800?l临床样本加入样本管， 14000rpm离心5分钟，去上清液（若收集到的有效细胞太少的话，可再次吸取取800?l临床样本加入样本管，14000rpm离心5分钟，去上清液）；

2.2 对于男性标本（棉拭子），先加入1ml生理盐水，充分振荡洗脱细胞，倒出洗脱液，14000rpm离心5分钟，去上清液；

2.3 对于血液太多的临床标本，可将收集到的细胞用已灭菌的蒸馏水漂洗一次，再离心收集细胞。

×××院 临床分子生物实验室质量手册 文件编号： 序号： 第 版 颁 布 日 期： 共 2 页 第 次修改 主题：HPV-DNA标本处理的标准操作程序 HPV-DNA标本处理的标准操作程序

一、目的：

规范临床分子生物实验室对临床标本的处理，提高检测结果的准确率。

二、适用范围：

人乳头状瘤病毒（HPV）基因微阵列分型检测试剂盒。

三、职责：

由临床分子生物实验室专业技术人员制定程序文件，实验室负责人审核，科室主任批准实施。

四、程序：

1、将样本及阴性对照品置室温解冻，按习惯将标本编号，按相应数量取出样本管，对应编号。 2、有效细胞的收集：

2.1 对于宫颈脱落细胞标本，先振荡混匀临床样本10秒，取800?l临床样本加入样本管， 14000rpm离心5分钟，去上清液（若收集到的有效细胞太少的话，可再次吸取取800?l临床样本加入样本管，14000rpm离心5分钟，去上清液）；

2.2 对于男性标本（棉拭子），先加入1ml生理盐水，充分振荡洗脱细胞，倒出洗脱液，14000rpm离心5分钟，去上清液；

2.3 对于血液太多的临床标本，可将收集到的细胞用已灭菌的蒸馏水漂洗一次，再离心收集细胞。

数字图像处理基本操作

1. 图像的缩放

图像的缩放是图像的空间域变换操作，可以认为是在输入图像和输出图像之间进行像素-像素变换。图像插值操作是图像缩放的基本方法，基本原理是，估计像素点之间位置的像素值，将输入图像和输出图像的变换在数字图像的约束下得以完善，有效的填充图像可能出现的空白点。

图像的插值包括三种方法：1.最近邻插值，该算法中，输出图像中每一个像素点的值就是与该点在输入图像中变换位置最临近采样点的值。2.双线性插值，该方法的输出像素值是它在输入图像中2*2邻域采样点的平均值。3.双三次插值，相比于双线性插值，其插值邻域大小为4*4，插值效果好，但相应计算量也较大。

Matlab图像处理工具箱中的函数imresize可以对图像进行缩放操作，同时指定以上所介绍的插值方法作为其函数。以下基于matlab实现图像“hd1.bmp”的不同方式的缩放（这里设置放大倍数为2倍）

%图像缩放操作代码：

>> J=imread('hd1.bmp'); %图像的读入

>> x1=imresize(J,2); %将图像以最近邻插值放大两倍 >> x2=imresize(J,2,'bilinear');

数据列表的基本处理方法

第一节 基本概念

数据列表是一个矩形表格，表中单元格没有进行过合并。 数据列表的一行数据叫做一条记录 数据列表的一列数据叫做一个字段，

数据列表的每一列可以有一个名字——字段名，如果一个数据列表有字段名，则一定是在数据表列的第一行。

字段名 1行叫做1条记录 1列叫做1个字段

图：数据列表的基本概念

如果表格中有单元格由2个以上的单元格合并而成，那么这个这个表格就不是数据列表。

这个单元格由两个单元格合并而成

图：非数据列表的例题

对于数据列表，excel可以进行数据表的排序、筛选、分类汇总、做数据透视表、多表的合并计算等操作，也可以使用数据库函数对其进行处理等。而非数据列表不能做上述操作，也

不能运用数据库函数等。

第二节 数据列表的数据筛选

数据筛选是对一个数据列表，筛选出满足给定条件的数据行（记录）。对不满足条件的数据行（记录）进行隐藏，使其不显示出来。

Excel的数据筛选分为自动筛选和高级筛选2种。

一、自动筛选

自动筛选是excel对使用“自动筛选”命令的数据列表的每一个字段的字段名（没有字段名的数据列表则是每一个字段的第1行）设置一个筛选条件设置下拉列表框，使用者可根据需要设置筛选条件。

数据列表

第一部分 企业所得税汇算清缴稽查企业应注意法律证据举证 一、税务稽查对象选定的因素和稽查选案基本流程

充分利用征收信息、税源监控信息，税收管理信息，收集相关信息对纳税人收入信息、财产信息、生产信息、销售信息、营销信息、财务信息、租赁信息、投资信息、注册信息等进行综合指标配比。最终选定为稽查对象。

1、选案中税务稽查对象一般是通过以下方法产生 2、税务稽查执法程序法律限制及要求

实施稽查前应当向纳税人发出书面稽查通知，告知其稽查时间、需要准备的资料、情况等，但有特殊情况不必事先通知： 3、税务机关调阅企业帐务、资料等相关凭据的法律程序

调取账簿及有关资料应当填写《调取账簿资料通知书》、《调取账簿资料清单》。

二、企业所得税税前扣除票据合法性的稽查

税前扣除凭证的具体种类、形式、格式并不重要，但必须能够起到税前扣除的证明作用。 具体分两大类:

㈠、成本构成需要提供的凭证 注意三个环节检查

企业入库购进存货或商品的成本，其凭证主要检查：购货发票、运费发票、装卸费发票或收据、农产品收购凭证、清选整理人工费领

款收据等

㈡、税前扣除凭证应具有的特征

《中华人民共和国企业所得税法》第八条规定：企业实际发生的与取得收入有关的、

组织样本处理

通常情况下，为了方便研究人员对样本的选择和使用，样本库除对原始样本进行分装保

存外，尚需对样本做进一步的提纯处理，以获得样本的衍生物，供研究者使用。这样既能控制样本的使用量，减少对样本不必要的浪费，又能保证其质量不受影响。可从快速冰冻保存的组织样本中直接提取DNA、RNA和蛋白质；或将OCT包埋组织样本用于制作冰冻组织切片；将福尔马林固定石蜡包埋组织样本用于制作石蜡切片；也可取特定的样本进行细胞培养成为细胞系。

根据处理提纯的样本不同，采取不同的储存方式。如DNA、RNA和蛋白样本可以放在

冻存管中超低温保存，组织切片存放在切片盒中室温下保存，细胞系在液氮中保存。 1. DNA提取

从快速冰冻保存的组织样本、OCT包埋组织的样本、福尔马林固定石蜡包埋组织样本或石蜡切片中均可提取DNA 样本，过程稍有区别，但多采用酚-氯仿法从新鲜或冰冻组织，以及细胞等样本中提取DNA，样本的处理按照标准操作程序进行。用紫外分光光度计法测定DNA的浓度，琼脂糖凝胶电泳检测法检测DNA的纯度。在DNA 保存区储存DNA样本，DNA样本应保存在-80℃冰箱中，并做好标记。 2. RNA提取

RNA很容易被污染和降解。最好是从经过RNA酶抑制剂处理的组织中

生活中常用水处理设备基本处理方法分析

水处理设备基本知识

天然水源，包括地面水和地下水，都含有各种不同的杂质。水源中所含的这杂质按其颗粒大小及存在的形态可分为悬浮物质、胶体物质和溶解物质三类，水中杂质还可分为无机物、有机物和微生物三类。这时水处理设备起到了关键的过滤分离作用。 悬浮物的主要特征是在动水中呈悬浮状态，在静水中的状态是轻者上浮、重者下沉。地面水中的无机悬浮物主要是泥沙、大颗粒粘土或矿物质废渣等，这些杂质的比重较大，易于下沉。有机悬浮物中大的如水草、小的如某些浮游生物(如藻类、细菌或原生动物)的繁殖和死亡残骸等，也有来自污水中的有机物。水草等颗粒较大的悬浮物容易去除，而颗粒较小的则难以去除。 天然水中的胶体杂质分为无机胶体(硅酸胶体、粘土胶体)和有机胶体(各种蛋白质和腐殖质等)两大类。胶体杂质的特征是在水中相对稳定，静置多时也不会自然沉淀。

天然水中的溶解物质有：以分子状态存在于水中的主要是氧(O2)、二氧化碳(CO2)。以离子状态存在于水中的基本上都是无机盐类溶解于水中的结果，如钙、镁、铁、碳酸根、硫酸根、氯

技术资料由上海莱特莱德水处理公司提供

根等。溶解杂质不可能用任何机械方法或凝聚方法去除，它们稳定地、均匀地分散

临床病原学检测与标本的正确留取

痰液标本采集与运送

?痰液由气管、支气管和肺泡所分泌

?正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘膜受刺激时，分泌物增多，但多为清晰、

水样，无临床意义。

?病理情况下痰量增多，呈不透明并有性状改变

采集目的

一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。

一般原则

1采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。

2宜采集清晨第二口痰液。

3对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24小时内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。

4怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。

采集方法

1、自然咳痰与雾化倒痰法：无痰或痰量极少者可用3%～5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5min后留取痰液。如有可能，应在护理人员直视下留取清晨第二口痰。嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内。应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。

2、支气管镜法：鼻或口腔插入支气管镜。常用采集方法有经支气管镜吸引、支

气管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。

3、经人工气道吸引法：进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接

组织样本处理

通常情况下，为了方便研究人员对样本的选择和使用，样本库除对原始样本进行分装保

存外，尚需对样本做进一步的提纯处理，以获得样本的衍生物，供研究者使用。这样既能控制样本的使用量，减少对样本不必要的浪费，又能保证其质量不受影响。可从快速冰冻保存的组织样本中直接提取DNA、RNA和蛋白质；或将OCT包埋组织样本用于制作冰冻组织切片；将福尔马林固定石蜡包埋组织样本用于制作石蜡切片；也可取特定的样本进行细胞培养成为细胞系。

根据处理提纯的样本不同，采取不同的储存方式。如DNA、RNA和蛋白样本可以放在

冻存管中超低温保存，组织切片存放在切片盒中室温下保存，细胞系在液氮中保存。 1. DNA提取

从快速冰冻保存的组织样本、OCT包埋组织的样本、福尔马林固定石蜡包埋组织样本或石蜡切片中均可提取DNA 样本，过程稍有区别，但多采用酚-氯仿法从新鲜或冰冻组织，以及细胞等样本中提取DNA，样本的处理按照标准操作程序进行。用紫外分光光度计法测定DNA的浓度，琼脂糖凝胶电泳检测法检测DNA的纯度。在DNA 保存区储存DNA样本，DNA样本应保存在-80℃冰箱中，并做好标记。 2. RNA提取

RNA很容易被污染和降解。最好是从经过RNA酶抑制剂处理的组织中