食品接触表面微生物检测方法

食品接触面微生物验证规程

编 号 编 订 人 编订日期 变更原因 发送部门 质量部、生产车间 ＳＯＰ－质— 许新生 审 核 人 页数 共5页 生效日期 批 准 人 批准日期 2016-05-13 审核日期 目的：检测生产用水、车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。

范围：本标准规定了公司生产过程中的微生物控制要求以及验证计划。 本标准适用于公司食品生产过程中对微生物控制的验证活动。

规范性引用文件：下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。

GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 14881 食品企业通用卫生规范 GB 15980 一次性使用医疗用品卫生标准

GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 G

手、设备表面微生物取样方法

一、携带物品：

酒精灯、75%酒精棉球若干、不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水、一次性手套。 备注：不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水须经高温蒸汽灭菌；10ml生理盐水根据实际所需准备多支；一次性手套需经辐照灭菌；

二、操作方法： 1、手取样

点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹车间人员手正背面，反复两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。

2、设备表面取样

点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹设备平滑表面（面积自己预先估计一个大概数值，25、50或100cm2等），反复涂抹两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。

三、细菌及大肠菌群的培养（具体操作时以GB4789.2-2010和GB4789.3-2003为准）

样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。配成1：10样液。根据污染情况，进行十倍递增稀释，吸取1ml 的1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1

环境中微生物的检测

微生物体积小、重量轻，因此可以到处传播以致达到“无孔不入”的地步。微生物种类繁多，对外界环境的适应能力又很强，只要生活条件合适，它们就可以迅速繁殖起来。因此，它们是自然界分布最广的一群生物。无论是南极、北极、高山、海洋、陆地、淡水，还是土壤、空气、动植物体内外，几乎到处都有它们的踪迹。

空气、水是维持人类生命不可或缺的物质。它们直接进入人体或与人接触。如果带有病原微生物，将成为传染疾病的媒介。通过空气和水中微生物的检验，对环境质量进行控制。

1.1 土壤中的微生物

1.1.1 土壤是微生物生活的良好环境

在自然界，土壤是微生物生活的良好环境。因为土壤具有微生物生长繁殖所必需的各种环境条件。 1.1.1.1 营养

土壤中有大量动植物残体、植物根系的分泌物、人和动物的排泄物，这些有机物为微生物提供了良好的碳源、氮源和能源；土壤中丰富的矿质元素可以满足微生物对矿质营养的要求。 1.1.1.2 水分和渗透压

土壤中具有一定的持水性，可为微生物提供水分；土壤的渗透压对微生物是等渗或低渗环境，有利于微生物摄取营养。 1.1.1.3 空气

土壤团粒结构中的小孔隙充满空气，土壤中氧的含量比大气少，平均为土壤空气体积的7%-8%。通气良好的

微生物学实验方案

题

班 级： 时 间：

1 意义

食品微生物指标是指某个或某批食品中微生物的存在与否（定性分析）或每个质量、体积、单位面积或每批产品中微生物存在的数目及其毒素（或代

谢产物）的限制（定量分析），用以评价食品的微生物学卫生状况及其安全性。 在我国食品卫生标准中，通常微生物指标包括菌落总数、大肠菌群、致病菌等的检测，其中菌落总数和大肠菌群是必检项目，致病菌不得检出。 食品中微生物菌落总数指食品检样经过处理，在一定的条件下培养后，所得1mL或1g检样中所含菌落的总数，主要作为食品被污染程度的标志，常用倾注平板菌落计数法。大肠菌群是指一群在37℃，24h能发酵乳糖产酸、产气，需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌，它反映了食品是否被粪便污染，同时也间接地指出食品是否有被肠道致病菌污染的可能性，常用的检测方法是最大可能计数法。

2 目的与要求

2.1 了解菌落总数、大肠菌群测定在食品卫生评价当中的意义

2.2学习并掌握细菌分离和活菌计数的基本方法和原理

2.3学习并掌握大肠菌群的检验方法

3 实验器材

3.1食品检样

3.2培养基 平板计数琼脂培养基：将胰蛋白胨 5.0 g、酵母浸膏 2.5 g、

《环境微生物检测——采样方法》场景剧本

题目：环境微生物检测——采样方法

主题曲、插曲 待定 影片主要角色：

男1号 梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号 小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号 小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女）

男3号 ** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号： 小王，19岁，某学校的顶岗实习生

第一场：

场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水）

时间：上午

人物：前台靓女、客户，前台靓女 以及同事两三个。

从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。

客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？

客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。

前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。

前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。

客户：对水质都监测什么呀？

前台靓女：《建筑给水排水及采暖

绪 论

一、选择题

1、菌种的分离、培养、接种、染色等研究微生物的技术发明者是：( ) A.巴斯德 B.柯赫 C.列文虎克 D.别依林克

2、第一个发明显微镜并在显微镜下看到微生物的个体形态的是：( ) A.巴斯德 B.柯赫 C.列文虎克 D.别依林克

3、通过曲颈瓶实验证实空气内含有微生物引起有机质的腐败，从而彻底否定“自生说”，并建立病原学说推动微生物学发展的是： （ ） A.柯赫 B.列文虎克 C.巴斯德 D.别依林克

4、证实炭疽病菌是炭疽病病原菌的是著名的德国细菌学家： （ ） A.柯赫 B.列文虎克 C.巴斯德 D.别依林克 二、填空题

1、第一个用自制显微镜观察到微生物的学者是__________，被称为微生物学研究的先驱者，而法国学者__________和德国学者__________则是微生物生理学和病原菌学研究的开创者。 2、微生物学的发展简史可分为__________、_________、__________、________、______。 3、按微生物的应用领域来分的学科有_

《食品微生物学》复习题

绪 论

1. 什么是微生物？什么是微生物学？微生物的五大特性？ 2. 什么是食品微生物学？它与微生物学有何异同？ 3. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人 ? 4. 食品微生物学的研究对象是什么？

微生物的形态结构和功能

一 名词解释：

1、菌落 2、缺壁细菌 3、芽孢 4、糖被 5、肽聚糖 6、 L型细菌7、霉菌8、噬菌斑9、病毒10、温和噬菌体 11、烈性噬菌体 二填空：

1.按生物六界分类系统，微生物包括、、和。

2. 细菌的形态十分简单，基本上只有、、三大类。 3. 细菌是以方式繁殖。

4. 细胞的特殊结构有，，，。

5. 细菌大小的度量单位是，球菌用表示，杆菌用表示。

6. 原生质体和球状体有几个共同特点，主要是，细胞呈状，对十分敏感。 7. 真菌一般包括， ， 三种。

8. 酵母菌的无性繁殖方式主要有 。 9.霉菌的无性孢子有______、__ __、__ _和 __ ___，有性孢子有__ ___、__ __、__ _____和_______。

10. 细菌细胞核糖体是s、酵母菌的核糖体是s和s、霉菌的核糖体是s。 11.病毒是严格的_ _,它

班级：

姓名： 学号：

题号 得分 一 二 三 四 五 六 总分 一、名词解释（总分10分，每题2分）

1．菌落

2．菌落总数

3．培养基

4．乳酸菌

5．大肠菌群

二、填空题（总分20分，每空1分）

1．与食品工业密切相关的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属中的 等。采用 法，检测酸奶中的各种乳酸菌可以获得满意结果。

2．我国卫生部颁布的食品微生物指标主要有 、 和 三项。 3．在菌体形态观察中，需进行制片后才能进行显微镜下观察，观察细菌时采用的制片方法是 ，观察放线菌时采用的制片方法是 ，观察真菌采取的制片方法是 。

4．微生物生长需要的营养要素有水、 、 、 、生长因子和能源。 5．根据细菌的生长曲线，可将细菌的生长分为 、 、 、 四个时期，作为研

第一章 绪 论

1．微生物的六大共性为_________、_________、_________、_________、_________、_________。 2．简述微生物发展史上每个时期的特点和代表人物？

3．1969年，Whittaker将生物界划分为动物界、植物界、_________、真菌界和 _________五界系统。

4. 试述巴斯德、柯赫对微生物学的贡献？ 5. 细菌学的奠基人是_________。

A、巴斯德 B、柯赫 C、列文虎克 D、李斯特 6. 微生物学的奠基人是_________。

A、列文虎克 B、巴斯德 C、柯赫 D、李斯特

7. 微生物在自然界中分布很广，其原因是由于_________。

A、个体微小 B、营养类型与呼吸类型多样 C、有的可形成休眠体 D、应为A、B、C三者

8.微生物分布广的主要原因有_________、_________、_________。

9.微生物的发展史可以划分为_________、_________、_________、_________、_________。

10.1929年，Fleming发现了

第一章 绪论 一、填空题

1 世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人 列文虎克，他的最大贡献是利用自制的 单式显微镜 发现了微世界。

2 微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德，而被称为细菌学奠基者是德国的 科赫。

3 微生物的五大共性指：体积小面积大、 吸收快转化多、生长旺繁殖快、 适应强易变异、 分布广种类多，其中最主要的共性应是：体积小面积大。(课文中给出的特点是1、大多数微生物肉眼难以直接观察2、微生物通常以独立的增值单位存在3、微生物结构简单4、微生物生长快速5、微生物几乎无所不在6、微生物的研究使用相同的方法)因为有一个巨大的营养物质吸收面，代谢废的排泄和环境信息的交换面，并由此产生其他4个共性。

4 微生物包括： 无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒；具原核细胞结构的真细菌、古生菌、具真核细胞结构的真菌，单细胞藻类、原生动物等。 二、选择题

1、微生物是一些个体微小，构造简单的低等生物的总称，它们的大小一般小于（ C ）。

A、1cm B、1mm C、0.1mm D、1μm

2、当今，一种新的瘟疫正在全球蔓延，它是由病毒引起的（C ）。 A、鼠疫 B、天花 C、艾滋病 D、霍乱 3、人类已消