CTAB溶液配制

CTAB法提取DNA法试剂配制方法

1、1M Tris-HCl 1L配制量

配制方法 称量121.1g Tris 置于1L烧杯中。

加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓盐酸

7.4 70ml

7.6 60ml

8.0 42ml

将溶液定容到1L。

高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却后加调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、10×TE Buffer 1L配制量

配制方法 量取下列溶液，置于1L 烧杯中

1M Tris-HCl Buffer (pH= ) 100ml 500mM EDTA (pH 8.0)

附录：常用试剂配制及应用

一、常用缓冲液、试剂的配制

碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer)

由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。

附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7）

pH 9.2 9.3 9.4 9.5 9.6 9.7 9.8 9.9 0.2mol/L Na2CO3 (ml) 4.0 7.5 9.5 13.0 16.0 19.5 22.0 25.0 0.2mol/L NaHCO3 (ml) 46.0 42.5 40.5 37.0 34.0 30.5 28.0 25.0 pH 10.0 10.1 10.2 10.3 10.4 10.5 10.6 10.7 0.2mol/L Na2CO3 (ml) 27.5 30.0 33.0 35.5 38.5 40.5 42.5 45.0 0.2mol/L NaHCO3 (ml) 22.5 20.0 17.0 14.5 11.5 9.5 7.5 5.0 磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB)

磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH

Western blot 实验所需试剂配制方法

页脚内容

WB 所需溶液的配制

1 Tris-甘氨酸电泳缓冲液 (Running buffer) 5× Tris base 15.14g

Glycine(甘氨酸) 72.0g

SDS 5.0g

蒸馏水 溶解至1000ml

5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液：15.1g Tris 碱和72ｇ甘氨酸，5ｇ电泳级的SDS ，双蒸水定容至1L ，pH 值为8.3。使用前，将5×稀释到1×：取200ml 5×，定容到1000ml 。

2 转膜缓冲液 （Sending buffer ）（现用现配） 1000 ml 1500 ml

Glycine(甘氨酸) 14.413 g 21.6 g

1.0 M Tris.HCl (pH8.3) 25 ml 37.5ml

10% SDS 1 ml 1.5 ml

甲醇 (methanol) 200 ml 300 ml

蒸馏水 溶解至1000 ml 溶解至1500 ml

必须新鲜配置，因为甘氨酸溶于水后易分解。小片段可不加SDS 。

3 10% SDS 配置

电泳级十二烷基硫酸钠也叫SDS （Sodium Dodecyl Sulfate ，SDS,C 12H 25O 4NaS ）溶液:

柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

0.1mol/L

pH

柠檬酸 （毫升）

3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8

18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 10.3 9.2

0.1mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 9.7 10.8

5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 pH

0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 1.4

0.1mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0 18.6

柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1mol/L溶液为29.41克/毫升。 关键词：柠檬 mol/L 分子 0.1mol/L 18.6

化学实验室标准溶液的配置

标准液配溶培训制料一、标资物准质定的义二 无、机学实验室现有化标的溶准 三液无、机准物标的管质理四、标溶液核查处准和失处理效五标准溶液、配置注的意项事李秋妹2 04.5.231

化学实验室标准溶液的配置

一、准标物的质义定.1准物标质(efRreenc eatMreia) RMl

有一种或多具足种均够匀和很好定确的特性值，了用校准设备以评价，测 量法方或材料给值的材赋料物或2质有.证准标质(C物reitifdeR feernce eMtaeial ) CrRM附有证 书标准物的，质一种或其多特性种值建立了溯源用性的程序确定 ，使之溯源可到确准复现的用表示于特性值的计该量位，而单每个且准值 标附有给都定置信平水不确的度定 .3准基标物质准Pr(imay Rrefrenec Maetreial) PRM 种具一最有高计量品，用基质准方法定量确值的准物标也叫质级一标 物准质

化学实验室标准溶液的配置

二无机、学化实验室有的现准标液溶.1目前机化无实学室现有验标的准液溶M有rec,国标，kCACU 和SNI,习惯等以erMk,AcCUC准标溶用于配制标准液作工 液溶国，标准溶液用于配标CCV制。2 .机标无准液有溶标和单混标之分介质，

氢氧化钠标准溶液的配制和标定

一、目的要求

1.掌握NaOH标准溶液的配制和标定。

2.掌握碱式滴定管的使用，掌握酚酞指示剂的滴定终点的判断。 二、方法原理

NaOH有很强的吸水性和吸收空气中的CO2，因而，市售NaOH中常含有Na2CO3。 反应方程式： 2NaOH + CO2 → Na2CO3 + H2O 由于碳酸钠的存在，对指示剂的使用影响较大，应设法除去。 除去Na2CO3最通常的方法是将NaOH先配成饱和溶液（约52%，W/W），由于Na2CO3在饱和NaOH溶液中几乎不溶解，会慢慢沉淀出来，因此，可用饱和氢氧化钠溶液，配制不含Na2CO3的NaOH溶液。待Na2CO3沉淀后，可吸取一定量的上清液，稀释至所需浓度即可。此外，用来配制NaOH溶液的蒸馏水，也应加热煮沸放冷，除去其中的CO2。 标定碱溶液的基准物质很多，常用的有草酸（H2C2O4?2H2O）、苯甲酸（C6H5COOH）和邻苯二甲酸氢钾（C6H4COOHCOOK）等。最常用的是邻苯二甲酸氢钾，滴定反应如下： C6H4COOHCOOK + NaOH → C6H4COONaCOOK + H2O

实验一 溶液的配制

一、 实验目的

1． 掌握各种浓度溶液的配制及溶液稀释的操作

2． 熟悉规范化地使用台秤、量筒或量杯等仪器的实验操作 3． 培养细心观察，准确操作，认真记录的良好习惯

二、实验原理

溶液的浓度是指一定量的溶液或溶剂中所含溶质的量。常用的浓度表示方法有：

物质的量浓度：CB=nB/V 单位：mol/L 质量浓度：ρB=mB/V 单位：g/L 质量分数：ωB=mB/m 体积分数：φB=VB/V

溶液浓度的配制方法有两种：

1． 用一定量的溶液中所含的溶质来表示溶液的浓度，如ωB，其配制的方法是：将定量的溶质和溶剂混合均匀即可

2． 用一定体积的溶液中所含溶质的量来表示溶液的浓度，如CB、ρB、φB，其配制的方法是：将一定量的溶质与适量的溶剂酰混合，使得溶质完全溶解，定量转移到量筒或量杯中，然后再加溶剂到溶液总体积，最后用玻璃棒搅匀。

三、实验预习题

1． 配制固体溶质的溶液时，该如何操作？ 2． 用浓硫酸配制稀硫酸时，该如何操作？

3． 什么叫浓度？表示溶液的浓度有几种方法？写出其数学表达式

四、实验用品

φB＝0.95的酒精，Na

实验一 溶液的配制

班级： 学号： 姓名： 得分 .

一、是非判断题：（每小题3分，共30分）

( ) 1．将移液管所取液体放入容器时，应将留在尖端的液滴吹出。

( ) 2. 移液管或吸量管在使用前需洗涤和润洗，润洗方法即先用滤纸将管口内外水珠吸去，再用被移溶液润洗三次，润洗后的溶液应该弃去。

( )3. 定容时，将容量瓶放在桌面上，使刻度线和视线保持水平，滴加蒸馏水至弯月面下缘与标线相切。

( )4.使用天平时，取砝码必须用镊子，其原因主要是可轻轻地将砝码放在托盘上，天平不易损坏。

( )5. 在配制 SbCl3溶液时，常先用一定量的6 mol L-1的HCl溶解SbCl3 ，再加水稀释至刻度。

( )6．容量瓶在闲置不用时，应在瓶塞及瓶口处垫一纸条，以防粘结。 ( )7．配制溶液过程中，当溶液达到容量瓶的2/3容量时，应将容量瓶拿起，盖上瓶塞，颠倒摇匀使溶液初步混匀。

( )8．吸取5.00mL、10.00mL、25.00mL等

实验一 溶液的配制

一、 实验目的

1． 掌握各种浓度溶液的配制及溶液稀释的操作

2． 熟悉规范化地使用台秤、量筒或量杯等仪器的实验操作 3． 培养细心观察，准确操作，认真记录的良好习惯

二、实验原理

溶液的浓度是指一定量的溶液或溶剂中所含溶质的量。常用的浓度表示方法有：

物质的量浓度：CB=nB/V 单位：mol/L 质量浓度：ρB=mB/V 单位：g/L 质量分数：ωB=mB/m 体积分数：φB=VB/V

溶液浓度的配制方法有两种：

1． 用一定量的溶液中所含的溶质来表示溶液的浓度，如ωB，其配制的方法是：将定量的溶质和溶剂混合均匀即可

2． 用一定体积的溶液中所含溶质的量来表示溶液的浓度，如CB、ρB、φB，其配制的方法是：将一定量的溶质与适量的溶剂酰混合，使得溶质完全溶解，定量转移到量筒或量杯中，然后再加溶剂到溶液总体积，最后用玻璃棒搅匀。

三、实验预习题

1． 配制固体溶质的溶液时，该如何操作？ 2． 用浓硫酸配制稀硫酸时，该如何操作？

3． 什么叫浓度？表示溶液的浓度有几种方法？写出其数学表达式

四、实验用品

φB＝0.95的酒精，Na

标准溶液的配制

⒈ 0.1mol／LHcl:量取分析纯盐酸配(相对密度1.19)9ml；以水稀释至1L ⒉ 1mol／L Hcl:量取分析纯盐酸配（相对密度1.19)90ml；以水稀释至1L ⒊ 0.1mol／LNaOH:称取分析纯4g氢氧化钠溶于水；稀释到1L

⒋ 0.1mol／L AgNO3:取分析纯硝酸银于120℃干燥2h；在干燥器内冷却，准确称取17g，溶于水；在容量瓶中稀释至1000ml；储于棕色瓶中

⒌ 0.05mol／LEDTA：称取分析纯乙二胺四乙酸二钠20g；以水加热溶解后，冷却；稀释至1L

⒍ 0.1mol／L碘溶液：称取分析纯碘26g及碘化钾80g溶于最少量水中；待溶解完全后稀释至1L。储于棕色瓶中备用

⒎ 0.1mol／L硫代硫酸钠溶液：称取硫代硫酸钠（分析纯）25g溶于水中；加入碳酸钠0.1g；稀释至1L

⒏ 0.05mol／L硫酸亚铁铵：称取硫酸亚铁铵20g，溶于冷的5％硫酸500ml；溶解完毕后，以5％的硫酸稀释至1L

⒐ 0.1mol／L重铬酸钾标准液：取分析纯重铬酸钾于150℃干燥1h；在干燥器内冷却；准确称取29.421g溶解于水，在容量瓶中稀释至1000ml，并加入30g硫酸汞

⒑ 25％硫代硫酸钠：称