一株反硝化聚磷细菌的分离及鉴定

一株反硝化光合细菌的生物学特性及系统发育分析

摘要:【目的】养殖水体中亚硝酸盐的过量积累会对养殖生物产生毒害作用，应用脱氮细菌去除亚硝酸盐是养殖水质调控的重要手段之一，本文意在得到一株高效去除亚硝酸盐的光合细菌。【方法】采用软琼脂稀释法分离纯化光合细菌菌株，通过电镜观察、生理生化试验研究其生物学特性、依据 16S rDNA 和光合反应中心 M 亚基基因(Gene coding for photosynthetic reaction center subunit M，pufM)序列对其做系统发育分析。【结果】从淡水养殖塘中分离筛选到一株高效还原亚硝氮的光合细菌菌株 wps。该菌株为革兰氏阴性菌，细胞杆状，大小为 0. 4 － 0. 6μm × 1. 5 － 4. 0 μm，极生丛生鞭毛，片层状光合内膜，兼性厌氧光照条件生长，单菌落及液体培养物呈红色，含细菌叶绿素 a 和类胡萝卜素。最适生长 pH 范围为 5. 5 － 8. 5，最适生长盐度范围为0 － 2% ，最适生长温度范围为 25℃ － 38℃ 。菌株 wps 与 Rhodopseudomonas palustris 的 16S rDNA 序列相似性为 98. 9% ，光合反应中心 M 亚

２００９年１９（２）

生物技术５１

用酪蛋白平板初筛和发酵脱胶复筛对脱胶细菌进行筛选，有效地缩小了目的菌的筛选范围，得到了一株可明显降低原料残胶率的细菌Ｄ７，处理后原料残胶率将为５．１２％。我们又对其个体形态与菌落形态、生理生化特征１６ＳｒＤＮＡ序列进行了分析，结合《伯杰氏细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》对菌株Ｄ７进行分类鉴定。结果表明菌株所为芽孢杆菌，

［４］张海霞．绢纺原料的微生物脱胶处理技术［Ｄ］．上海：东华大学硕士学位论文，２００５：１３．

【５］李志忠，蒋少军．蚕丝蛋白酶精练工艺的理论与实践【Ｊ］．染整技术，２００６．２８（４）：１３—１５．

［６］中国纺织大学绢纺教研室．绢纺学（上册）［Ｍ］．北京：纺织工业出版

社，１９８５：１０７—１０８．

［７］ＲＥ布坎南，ＮＥ吉本斯．中圃科学院微生物研究所＜伯杰氏细菌签定手册）翻译组译．伯杰氏细菌鉴定手册［Ｍ］．３版．北京：科学出版社。

１９８４．

与腊样芽孢杆菌（励诎岱删）的同源性最高，属于腊样芽孢

杆菌类。所最适生长温度３７℃左右，最适生长ｐＨ６。５—７。５，可根据菌株Ｄ７生长的环境条件设定发酵工艺参数。该脱胶菌的获得为研究蚕丝微生物纯种发酵脱胶奠定基础。

参考文献：

［１］萤炳荣．绢纺织［Ｍ］．北京：

２００９年１９（２）

生物技术５１

用酪蛋白平板初筛和发酵脱胶复筛对脱胶细菌进行筛选，有效地缩小了目的菌的筛选范围，得到了一株可明显降低原料残胶率的细菌Ｄ７，处理后原料残胶率将为５．１２％。我们又对其个体形态与菌落形态、生理生化特征１６ＳｒＤＮＡ序列进行了分析，结合《伯杰氏细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》对菌株Ｄ７进行分类鉴定。结果表明菌株所为芽孢杆菌，

［４］张海霞．绢纺原料的微生物脱胶处理技术［Ｄ］．上海：东华大学硕士学位论文，２００５：１３．

【５］李志忠，蒋少军．蚕丝蛋白酶精练工艺的理论与实践【Ｊ］．染整技术，２００６．２８（４）：１３—１５．

［６］中国纺织大学绢纺教研室．绢纺学（上册）［Ｍ］．北京：纺织工业出版

社，１９８５：１０７—１０８．

［７］ＲＥ布坎南，ＮＥ吉本斯．中圃科学院微生物研究所＜伯杰氏细菌签定手册）翻译组译．伯杰氏细菌鉴定手册［Ｍ］．３版．北京：科学出版社。

１９８４．

与腊样芽孢杆菌（励诎岱删）的同源性最高，属于腊样芽孢

杆菌类。所最适生长温度３７℃左右，最适生长ｐＨ６。５—７。５，可根据菌株Ｄ７生长的环境条件设定发酵工艺参数。该脱胶菌的获得为研究蚕丝微生物纯种发酵脱胶奠定基础。

参考文献：

［１］萤炳荣．绢纺织［Ｍ］．北京：

反硝化细菌产品详细简介

反硝化细菌产品详细介绍

主要成分：反硝化细菌≥100亿/克，载体等。性状：本品为黄褐色粉末，有特殊的发酵味。

特点：采用优良反硝化菌株经特殊工艺发酵而成。菌株反硝化能力强，能够以亚硝态氮和硝态氮作氮源，活化简单，繁殖迅速，作用效果显著，24小时可见效。针对养殖水体亚硝酸盐偏高的情况有特效；针对藻类过度繁殖的水体能够大量消耗氮素营养，切断藻类氮素营养，维护良好水色；菌株在溶氧充足及厌氧条件下均可生存并进行反硝化反应，优化底质的物理、化学环境。

主要作用：

1、还原水体中的亚硝酸盐，使之生成无害的氮气，解除亚硝酸盐的危害。

2、消耗氮素营养，抑制藻类过度繁殖，净化水体。

3、抑制致病菌。

4、改良底质。

推荐用法：

1、用30倍重量水浸泡本品200-500克/亩·米水深3小时后，全池泼洒。 适用范围：

①各种海、淡水养殖水体亚硝态氮含量超标。

②藻类过度繁殖，水体透明度太低，水色太浓。

③底质恶化，长泥皮、青苔。

④老化塘。

2、养殖期间定期（7-15天200-500克/亩·米水深）使用能够有效预防和控制亚硝酸盐危害。

3、针对养殖水体亚硝酸盐比较高时，用500克红糖配合1包反硝化细菌加水浸泡12小时以上，每包可用1.5亩，上午10点

硝化细菌 -生态系统中的生产者

基本简介

硝化细菌（Nitrifying bacteria）是化能生物，自养需氧型细菌，以二氧化碳为碳源，通过代谢将氨或铵盐氧化成硝酸盐。可以用不含有机碳的培养基培养。

硝化细菌属于自养性细菌，可以看做生产者，它包括两种完全不同的代谢群：亚硝酸菌属( nitrosomonas ) 及硝酸菌属( nitrobacter )，它们包括形态互异的杆菌、球菌和螺旋菌。亚硝酸菌包括亚硝化单胞菌属、亚硝化球菌属、亚硝化螺菌属和亚硝化叶菌属中的细菌。硝酸菌包括硝化杆菌属、硝化球菌属和硝化囊菌属中的细菌。两类菌均为专性好气菌，在氧化过程中均以氧作为最终电子受体。大多数为专性化能自养型，不能在有机培养基上生长，例如亚硝化单胞菌（Nitrosomonas）、亚硝化螺菌（Ni-trosospira）、亚硝化球菌（Nitrosococcus）、亚硝化叶菌（Ni-trosolobus）、硝化刺菌（Nitrospina）、硝化球菌（Nitrococcus）等。只有少数为兼性自养型，也能在某些有机培养基上生长，例如维氏硝化杆菌（Nitrobacterwinogradskyi）的一些品系。

从形态上看，也有多样，如球形、杆状、螺旋形等，但均为无

从海泥中分离纯化得到1株产红色素细菌,对该菌进行生理生化分析和16SrDNA鉴定。结果表明：该菌为革兰氏阴性,H2S、V.P.、酶触及明胶液化试验呈阳性,可在4～37℃下生长。可利用的碳源有麦芽糖、纤维二糖、甘油、D-葡萄糖、D-果糖、海藻糖、蔗糖及D-甘露醇等,可利用的氮源有蛋白胨、酵母膏和牛肉膏等;16SrDNA鉴定为Serratia marcescens,并建立了H2系统发育树。

黑龙江农业科学 2 1 ( ) 9￣ 9 0 2 2:0 2 Heln j n rc lu a ce c s i gi g Ag iut rlS in e o a

一

株红色素产生菌 H2的初步鉴定赵昌会(南科技学院，南永州 4 50 )湖湖 2 1 0

摘要：海泥中分离纯化得到 1产红色素细菌，从株对该茵进行生理生化分析和 1 S r NA鉴定。结果表明： 6 D该茵为革兰氏阴性， S V. .酶触及明胶液化试验呈阳性， H、 P、可在 4 3℃下生长。可利用的碳源有麦芽糖、~ 7纤

维二糖、油、)葡萄糖、)果糖、藻糖、糖及 I甘露醇等，甘 I _ I _海蔗 ) _可利用的氮源有蛋白胨、母膏和牛肉膏等；酵1Sr 6 DNA鏊定为 S r a i mc￣ s l,建

目录

正文

第一篇：5一株紫丁香教案

5一株紫丁香

教学目标：

1、正确、流利、有感情地朗读课文。

2、学写三个生字。

3、体会小学生赞美和感激老师辛勤奋劳动的真挚情感，懂得要尊敬老师，热爱老师的道理。

教学课时：

2课时

第一课时

一、谈话引入，揭示课题

1、小朋友，教师节那天，老师收到很多贺卡，你们知道是谁送给老师的吗?（学生说）对，是老师以前教过的学生送的。有他们自己亲手设计制作的，有自己买的。老师特别喜欢同学们自己设计制作的贺卡。那天你们是怎样向老师祝贺的?

2、你们真是尊师爱师的好孩子。今天老师给大家带来了一位客人，(出示课文插图)，你们看她是谁?（学生说）这位老师在干什么呀?（学生说）同学们真好!老师为了培育学生，不知道花了多少心血，流了多少汗水，熬了多少个夜晚啊!今天，我们就来学习一首散文诗，看看诗中的小朋友是怎样尊师爱师的。(板书：6、一株紫丁香)请同学们齐读课题。(学生读课题)。

3、看了图，读了课题，大家有什么问题想问？（这株紫丁香是谁种的？为什么种？）

二、

路边，一抹黯淡的绿隐藏在被朦胧雨幕笼罩着的灰白墙色中。

那是一盆娇弱的百合花，水晶般透明的雨水都可能让它跌倒，盆子早已破了一大半，绵软的根抓不住逃跑的泥土，任凭风雨将它带走，它却无能为力。百合默默落泪，泪水顺着叶的脸颊滑落。一滴，又将一丝沙砾冲刷走了。

一个妇人把这盆破碎不堪的百合抱回家了，妇人日日夜夜地精心照料着它。为它的叶片拂去灰尘。她天天对着百合说话，大至宇宙的某个星系，小至地下的某只蝼蚁。妇人抱着希望，并把这种情感传达给百合。

它收到了呀，百合为了妇人，拼尽全力，不断汲取营养。但是，太阳升起，月亮落下，日复一日，终不见花朵的笑颜。它急了，它怎么可以辜负她的期待？可天却听不见它的期盼，它还是没能开出花，妇人对它的关怀逐渐消失，直至没有。百合号啕大哭，它恨自己，自己怎么那么没用，竟连小小的一朵花也开不出。屋外雷声滚滚，很快就开成一道雨帘，像是天空为它流的眼泪，它不甘心呀，它努力了那么久，怎么会没有成果！

时间消逝，犹如奔跑的白驹。不断地努力，拼命地吸取营养。终于，它在某一天，在不断地努力中，得到了收获它开了一朵小百合。百合随着鸟鸣，舞动着身姿，想要把自己最美的一面展现出来，妇人也不知怎作文么了，竟然破天荒地去瞧了它一眼，大喜过望。妇人闻着花香，她

记得读二年级的时候，我和朋友有一次在操场里玩耍，突然惊奇地发现了有块石头上长着一棵幼苗。心想：为什么幼苗不在土里生长，却长到石头上呢？

放学后，我迫不急待地问妈妈这是怎么一回事，妈妈摇摇头：我也不知道，你去查一下百度吧！”。听完，我飞奔进房间，打开电脑滴滴”啊！终于查到了一篇关于描写种子生长过程的文章。

于是我照着这篇文章所写的步骤做。先拿来两个花盆，在一个花盆里装着石头，另一个花盆里面放着泥土，然后分别把蒲公英的种子放上去，最后浇上水。

第二天，我竟然看到石头里的种子涨起来了，而土里却丝毫没有动静，我疑惑极了。心想：石头作文里都没有营养怎么会发芽呢？哦，对了，去问宋老师（她即是数学老师又是科学老师），她应该知道。课间时间，我急匆匆地走进了办公室，宋老师正在批改作业，我将心中的疑惑告诉了宋老师。宋老师语重心长地对我说：世界上每一样东西都是有生命的，而植物的种子却有着顽强的生命。石头那盆会发芽，估计是你放在有阳光的地方，而泥土那盆估计你放在阴暗的地方。”

回家后，我照着老师的话，把装着泥土的那盆移到阳光能照射得到的地方。果然，过了几天，那盆开始长茎了，我兴奋极了。

这次经历，我明白了：植物的生命是顽强的，一颗种子，即使

第３４卷第６期

２０１１年６月

ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ

杯诧尉鹳敢求

Ｖ０１．３４Ｎｏ．６

Ｊｉｍ．２０１１

李静，王文文。梁磊，等．耐盐好氧反硝化菌筛选及其反硝化特性的研究阿．环境科学与技术，２０１１，３４（６）：４８＿５２．ＬｉＪｉｎｇ，ＷａｎｇＷｅｎ—ｗｅｎ，ＬｉａｎｇＬｅｉ，ｅｔａ１．ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｌｔｒｉｆｙｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｗｉｔｌＩｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆａｅｒｏｂｉｃｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３４（６）：镐－５２．

耐盐好氧反硝化菌筛选及其反硝化特性的研究

李静１，

王文文ｔ，

梁磊２，

冯文清３

（１．广东轻工职业技术学院，广东广州５１０３００；２．广州甘蔗糖业研究所，广东广州５１０３１６；

３．广州奥桑味精食品有限公司，广东广州５１０２８０）

摘要：为了筛选耐盐好氧反硝化菌，对活性污泥进行耐盐与好氧反硝化驯化后，分离得到具有很强反硝化能力的菌株ＧＱ—４２。经菌落形态特征观察、生理生化测定及１６ＳｒＤＮＡ测序及同源性比较等过程，鉴定为蜡状芽孢杆菌。通过对菌