土壤中放线菌的分离纯化实验思考与讨论

土壤中放线菌的分离和纯化实验

一、实验目的

1、制作

MS培养基的方法，掌握母液的保存方法。

2、掌握培养基的灭菌方法。

掌握外植体的消毒和超净工作台的使用。 4、掌握放线菌的分离纯化及染色的基本流程； 5、 掌握高氏一号培养基的配制方法；

6、 复习分离纯化放线菌的基本操作技术、培养方学会使用高压蒸汽灭菌锅。

7、培养微生物实验的设计思路和动手能力。

二、实验材料

高压蒸汽锅、培养瓶、石斛的愈伤组织、超净工作台，酒精灯、酒精棉球、镊子、电子天平、称量纸、烧杯、量筒、

显微镜、三角锥形瓶、无菌培养皿、接种环、酒精灯、分析天平；接种环、载玻片、盖玻片、玻璃珠、移液枪、剪刀

三、实验原理

植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）

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或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科。

四、实验步骤

1、配制MS培养基8L，称取马铃薯1600g、香蕉400g、蔗糖240g、活性炭8半勺、琼脂80g、配制

土壤中放线菌的分离和纯化实验

一、实验目的

1、制作

MS培养基的方法，掌握母液的保存方法。

2、掌握培养基的灭菌方法。

掌握外植体的消毒和超净工作台的使用。 4、掌握放线菌的分离纯化及染色的基本流程； 5、 掌握高氏一号培养基的配制方法；

6、 复习分离纯化放线菌的基本操作技术、培养方学会使用高压蒸汽灭菌锅。

7、培养微生物实验的设计思路和动手能力。

二、实验材料

高压蒸汽锅、培养瓶、石斛的愈伤组织、超净工作台，酒精灯、酒精棉球、镊子、电子天平、称量纸、烧杯、量筒、

显微镜、三角锥形瓶、无菌培养皿、接种环、酒精灯、分析天平；接种环、载玻片、盖玻片、玻璃珠、移液枪、剪刀

三、实验原理

植物组织培养即植物无菌培养技术，又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等）、组织（如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等）

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或细胞（如大孢子、小孢子、体细胞等）以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的学科。

四、实验步骤

1、配制MS培养基8L，称取马铃薯1600g、香蕉400g、蔗糖240g、活性炭8半勺、琼脂80g、配制

实验七 放线菌的形态观察 生物112 周泓兆 1102040226 一、目的

1.学习观察放线菌形态的基本方法； 2.观察放线菌的个体形态特征。 二、原理

放线菌是一类丝状原核微生物，因其菌落在固体表面常呈放射状生长而得名。放线菌主要存在于土壤中，大部分是腐生菌，少数寄生，也有与植物共生固氮的。

放线菌通常由分支发达的菌丝体组成，菌丝直径为0.2-1.2μm。主要由两部分组成，一部分生长在培养基内，一般没有横隔，有固定和吸收养分的作用，称为基内菌丝或营养菌丝，当基内菌丝发育到一定阶段，即可向空中伸展形成气生菌丝。在显微镜下观察时，气生菌丝颜色较深，并且比基内菌丝粗两倍左右。有些种的气生菌丝发育到一定阶段，其顶端可形成孢子丝。有的仅在气丝上形成单个或一对球形孢子。孢子丝分直、波曲、螺旋等形状。螺旋有松、紧、大、小之分，其方向也有左旋和右旋之分，大多数种为左旋，少数种为右旋。螺旋的数目也是种的特征之一。孢子丝的着生方式分为单生、丛生和轮生。大部分放线菌的孢子丝长到一定阶段均可凝聚分裂形成孢子，少数的则以较原始的横隔分裂方式形成孢子。孢子有球状、椭圆状、杆状、瓜子状等形状，在光镜下即可观察。

放线菌菌落小，与培养基结合较紧密，不宜用接种钩挑取，因而

放线菌分类 放线菌纲 (Actinobacteria) 1酸微菌亚纲(Acidimicrobidae) 2红色杆菌亚纲(Rubrobacteridae) 3红蝽杆菌亚纲（Coriobacteride） 4 腈基降解菌亚纲（Nitriliruptoride） 5放线菌亚纲(Actinobacteridae) 一、酸微菌亚纲(Acidimicrobidae)

1 酸微菌目(Acidimicrobiales)

酸微菌亚目(Acidimicrobineae)

酸微菌科(Acidimicrobiaceae)

酸微菌属(Acidimicrobium) 典型种：氧化亚铁微酸菌（Acdimicrobium ferrooxidans）

二、红色杆菌亚纲(Rubrobacteridae)

1 红色杆菌目(Rubrobacterales)

红色杆菌亚目(Rubrobacterineae)

红色杆菌科(Rubrobacteraceae)

红色杆菌属(Rubrobacter)

2 土壤红杆菌目（Solirubrobacterales）

土壤红杆菌科（Solirubrobacteraceae

文章编号:100128751(2002)0120018205

几种主要稀有放线菌的选择性分离

李文均1　张忠泽2　姜成林1　　综述

(1云南大学教育部微生物资源开放研究重点实验室,　昆明650091;

2中国科学院沈阳应用生态研究所,　沈阳110015)

　　摘要:　放线菌是具有巨大工业价值的一类微生物,但一百多年来人们只分离到自然界实有总数的10%～

20%。之所以绝大多数的微生物未被发现,主要原因是受分离条件和技术的限制。因此放线菌尤其是稀有放线菌的

选择分离技术仍然是放线菌生物学研究和资源开发中的重大课题。作者根据自己在放线菌分离方面的多年经验,对一些主要的可产生生物活性物质的稀有放线菌(小单孢菌、小双孢菌、小四孢菌,链孢囊菌、指孢囊菌,游动放线菌,马杜拉放线菌,双孢放线菌)常用的选择性分离方法进行系统介绍。

关键词:　稀有放线菌;　选择分离;　方法中图分类号:　Q 939.13+2　　　文献标识码:　A

收稿日期:2001204226;　修订日期:2001210205

基金项目:教育部微生物资源开放研究重点实验室开放研究基金资助项目。

作者简介:李文均,男,生于1973年,在读博士研究生,助理研究员,主要从事放线菌的分离、分类研究。

张忠泽,男,生于1939

山东大学

放线菌的形态观察

一、 实验目的：

1、 学会并掌握放线菌的观察方法——插片法 2、 了解放线菌的基本形态

3、 巩固显微操作技术及无菌操作技术 二、 实验原理：

1、 放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成，制片时不采取涂

片法，以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。

2、 在插片法中，将灭菌盖玻片插入接有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻

片和培养基交接处生长而依附在盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于同生长时期的放线菌进行观察。

3、 高氏Ⅰ号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。此

合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能互相作用而产生沉淀。因此才混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将两种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。此外，合成培养基有的还需要补加微量元素，如Fe。

4、 放线菌的菌落特征：干燥、不透明，表面呈紧密的丝绒状，上有一层

色彩鲜艳的干粉；菌落与培养基的连接紧密，难以挑取。其孢子的表面结构、形状及颜色在一定条件下比较稳定，是鉴定菌种的重要依据。

1

放线菌在自

山东大学实验报告 2014年 11 月 19 日

姓名 王海宽 班级 12级生物基地 学号 201200140099 同组者：孙梦杰、袁家奇、肖荷 科目 微生物学实验 题目 放线菌的培养与形态观察 组别 周三第六大组

放线菌的培养与形态观察

一．实验目的

1．掌握配制合成高氏一号培养基的一般方法。 2．掌握放线菌形态的基本观察方法。 3．了解并掌握放线菌的形态。

二．实验原理 1．高氏I号培养基

高氏 I 号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如Fe元素。 2．放线菌

放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝 ( 简称“基丝” ) ，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生

山东农业大学硕士学位论文

山東農業大學 硕 士 学 位 论 文

放线菌菌株Y23活性物质的分离纯化及理化性质的初

步研究

Study on isolation and purification of the antibiotic substance from the fermentation broth of actinomycetes

strain Y23 and the primary its characteristics.

2010年4 月 29 日

目录

中文摘要 ............................................................................................................... 1 Abstract ................................................................................................................. 2

I

放线菌菌株Y23活性物质的分离纯化及理化性质的初步研究

1 引言 ..............

湖州师范学院 微生物实验

实验五

放线菌、 放线菌、霉菌及酵母菌的 形态观察

湖州师范学院 微生物实验

一.实验目的学习并掌握观察放线菌、 学习并掌握观察放线菌、霉菌及酵母菌 形态的基本方法； 形态的基本方法； 初步了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 初步了解放线菌、 特征。 特征。

湖州师范学院 微生物实验

二.实验原理1.放线菌：是一类主要呈菌丝状生长和孢子繁 放线菌： 放线菌 殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌， 殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌，广泛分布 于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。 于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。 放线菌的菌落形态特征为：形成干燥、 放线菌的菌落形态特征为：形成干燥、不透 表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉” 明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉” 的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取， 的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取， 菌落正反面颜色不一致， 菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平 板上有变形的现象，有泥腥味。 板上有变形的现象，有泥腥味。

湖州师范学院 微生物实验

湖州师范学院 微生物实验

放线菌在显微镜下一般气丝在上， 放线菌在显微镜下一般气丝在上，基丝在 气丝色暗，基丝较透明。 下，气丝色暗，基丝较透

广东工业大学土壤中微生物的分离与纯化实验报告

微生物学实验报告

实验名称：土壤中微生物的分离与纯化

课程名称 环境微生物学实验

学 院 环境科学与工程学院

专业班级 2011级环境科学（1）班

学 号 3111007364

姓 名 刘迪鸿

联系方式 13824426973

2013年 12 月 10 日

广东工业大学土壤中微生物的分离与纯化实验报告

实验报告 土壤中微生物的分离与纯化

刘迪鸿

（广东工业大学11级环科（1）班）

摘要：各种微生物生长所需条件存在差异，根据需要配制不同的培养基可以得到只含目标菌株的纯培养。

关键词：选择培养基，分离，纯化

一、 实验目的与要求

1. 明确培养基的配制原理，并通过对微生物培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2. 掌握根据需要选取不同的环境以找到目标菌株的基本方法，学习分离纯化微生物的基本操作技术，进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术，掌握微生物培养方法以及接种方法。

二、实验方案

1. 实验原理

培养基是人工的将多种物质按各种微生物生长的需要配制而成的一种混合营养基质，用以培养或分离各种微生物，因此，培养基质应当有微生物所能利用的营养成分（包括碳源，氮源，能源，无机盐